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        求助各位老师,3T3-L1脂肪细胞MTT怎么做?用脂肪前细胞和成熟脂肪细胞各做一遍吗?

        相关实验:基于 MTT 的细胞毒性实验

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        dxy_3rfsmpv2


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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        脂肪细胞做MTT一般做成熟脂肪细胞就行

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        需要用脂肪前和成熟脂肪细胞各做一遍。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物)法是一种检测细胞代谢活性的方法,常用于测定细胞增殖能力、毒性作用等。下面是3T3-L1脂肪细胞MTT的操作步骤:

        将3T3-L1细胞接种到96孔板中,按照实验要求培养到适当的状态,如脂肪前体细胞或成熟的脂肪细胞。

        在培养过程中,准备MTT试剂。MTT试剂通常是将5 mg的MTT粉末加入1 mL的PBS中,制成1 mg/mL的浓度,过滤灭菌备用。

        将培养好的细胞液吸取掉,加入100 μL的无血清培养基,再加入100 μL的MTT试剂,使细胞充分接触试剂。

        将96孔板放入37℃的培养箱中,孵育4小时。

        取出96孔板,吸取液体,加入150 μL的DMSO(二甲基亚砜)混合溶液,将96孔板放置在振荡器上振荡10分钟,使MTT形成的蓝色晶体充分溶解。

        最后在酶标仪中读取吸光度值,以判断细胞的代谢活性和生长情况。

        对于您的问题,如果您想比较脂肪前体细胞和成熟的脂肪细胞的代谢活性和生长情况,可以对它们分别进行MTT实验,比较它们之间的差异。另外,如果您只想确定细胞的代谢活性和生长情况,也可以只选择其中一个类型的细胞进行MTT实验即可。

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