实验问答

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问iscience投稿

loveliufudan

根据 iScience 的官方投稿指南，他们鼓励作者提供原始数据和WB图像作为补充资料，但并没有要求必须提供。所以您可以根据自己的情况决定是否提供原始数据和WB整膜图像。如果您决定提供WB条带图像，剪切后的图像通常比整膜图像更难以比较，因为在剪切后，您无法看到同一个膜上的其他蛋白质。建议您提供完整的WB整膜图像，以便审稿人和编辑能够更好地评估您的结果。

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问小鼠肾脏中采用RT-PCR，WB测NO相关指标结果与血浆NO浓度趋势不一致，该如何分析？

loveliufudan

这个情况有几种可能的解释：这个NOmRNA可能不是编码eNOS蛋白的mRNA，而是其他的与NO有关的mRNA。因此，你需要仔细检查你所测定的mRNA是哪一个。尽管NO蛋白和mRNA在生物学上都与NO的生物学功能相关，但它们的关系可能非常复杂。例如，NO的生物合成和降解是高度调节的，可能存在不同的机制来调节NO的生成和释放，以及调节eNOS的表达和稳定性。因此，这两个结果可能只是巧合。由于你使用了模

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问求助！测RNA浓度用TE buffer溶，RT PCR怎么办

loveliufudan

如果你需要精确测量RNA的浓度并用于后续实验，建议不要使用TE缓冲液溶解RNA，因为TE缓冲液中含有EDTA，可以抑制酶的活性，包括逆转录酶（RT），可能影响后续的RT-PCR实验。此外，TE缓冲液还含有Tris，可能影响PCR的特异性。如果你已经使用了TE缓冲液溶解RNA，建议重新提取RNA并使用其他缓冲液进行溶解，例如纯化水或RNase-free水，这些缓冲液不会对RNA分子产生抑制作用。如果

3 回答1028 围观

问RNA在无酶EP管-80度保存多久

loveliufudan

在没有使用RNase酶的条件下保存RNA需要避免RNA降解的因素，比如水解酶、氧化酶、菌落等。一般来说，在使用RNAlater等RNA保护剂的情况下，可以将样品在室温下保存数小时至数天，或在4°C冰箱内保存数周至数月，或在-80°C冰箱内长期保存数年至数十年。但是，在没有使用RNA保护剂的条件下，保存时间会大大缩短。一般建议将RNA样品在室温下保存不超过1小时，或在4°C冰箱内保存不超过1-2天，

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问2，3-BPG旁路

loveliufudan

2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)旁路，也称为拉普曼途径，是一种在糖酵解过程中通过将1,3-二磷酸甘油转化为2,3-BPG来产生ATP的代谢途径。在这个过程中，2,3-BPG被用来调节氧气亲和力，因为它可以与氧气分子竞争与血红蛋白分子上的结合位点，从而导致氧气释放到组织中。这个过程发生在红细胞内部。

4 回答2460 围观

问请问配置1mmol/l的NaF培养基怎么配置？怎样保证加入的NaF是无菌的(因为称重的称还有一些东西不是无菌的。)

努力搬砖的小凡

可以使用DMSO将NaF配置成母液为1 M的，然后根据实验所需向培养基当中加入一定量的1 M的NaF,使得NaF在培养基当中的终浓度为1 mM,此时在培养基当中的DMSO不超过千分之一，理论上对细胞的生长不会出现显著性的影响，希望对你有所帮助。

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问WB同一样本，相同上样量，检测同一分子但条带深浅相反的问题？

NatureBios

可能ecl曝光液在膜上不均匀（将印迹膜泡在曝光液中显影），也可能是点样的时候上样量误差（振荡混匀然后离心加样），

5 回答3385 围观

问同样的方法文件，同样的柱子，之前能出峰，现在不出峰，这是为什么? 柱子洗脱的时候有两个小峰

土井挞克树

可能与样本有关，检测一下样本是否有降解

3 回答334 围观

问BT-549细胞刚开始养长的挺快状态也可以，传了几代之后就长慢了，为什么？

土井挞克树

可能是营养消耗殆尽了，需要增加营养血清。

5 回答410 围观

问三阴性乳腺癌细胞株有哪几种？

loveliufudan

三阴性乳腺癌是一种不表达雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2（HER2）的乳腺癌。目前已知的三阴性乳腺癌细胞株包括但不限于以下几种：MDA-MB-231：这是最常用的三阴性乳腺癌细胞株之一，具有高度侵袭性和转移性，用于研究乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移机制。MDA-MB-468：这是另一种常用的三阴性乳腺癌细胞株，表现出较强的浸润和侵袭能力。BT-20：这是来源于乳腺癌患者的三阴性乳腺癌细胞

3 回答16840 围观

问麻醉科能做什么和细胞培养的课题吗？

上山打老虎11111

麻醉科还是建议结合麻醉药物，可以做下对细胞生长、细胞生物学行为的影响，建议结合上动物实验

4 回答318 围观

问各位前辈，想请教下，豚鼠皮肤组织10%中性甲醛固定2个月后，脱水时常该怎么调整呢，谢谢各位

土井挞克树

脱水一半都用乙醇，建议脱水前用pbs漂洗，效果好一些。

3 回答299 围观

问如何鉴别蛋白质溶液中是否含有某种特定的蛋白质

loveliufudan

有多种方法可以鉴别蛋白质溶液中是否含有某种特定的蛋白质。以下是其中的一些方法：SDS-PAGE：通过将蛋白质进行电泳分离，然后用特异性的抗体探测目标蛋白质。如果特异性的抗体与目标蛋白质结合，则可以在蛋白质条带上观察到信号。免疫沉淀：将蛋白质溶液加入到特异性抗体柱中，如果目标蛋白质与抗体结合，它将被沉淀下来，然后可以用Western blot或其他方法检测到目标蛋白质。ELISA：酶联免疫吸附检测法

4 回答425 围观

问肠道菌群研究中16srna与16sdna有什么区别？

dxyc42u

16sdna比16srna稳定，不易分解，检测相对简单些

3 回答3060 围观

问求助，三组不同治疗的疗效对比的统计方法？

上山打老虎11111

如果治疗前有方差齐性，治疗后没有了，建议保险起见选择秩和检验

3 回答2825 围观

问ls8细胞用氟化钠处理，这个氟化钠是自己配置的还是找厂商买？如果配置用的水是单蒸水还是双蒸水？

dxyc42u

我们实验室都是找厂商买的，自己配置有点麻烦

3 回答259 围观

问请问胶乳包被两步法怎么更好的重复出来？

土井挞克树

进行第二步之前建议检测一下ph，进行ph滴定。

3 回答367 围观

问做一次MST一般需要准备多少蛋白，几微克？

dxyc42u

在蛋白纯度非常高的情况下，用5-12um。

3 回答593 围观

问请问，phostag检测蛋白磷酸化，该怎么对磷酸化的蛋白水平进行定量呢？是用磷酸化条带/总蛋白条带，还是用磷酸化条带/非磷酸化条？

土井挞克树

都可以，但是实际应用中还是磷酸化/总蛋白条带好一些。

3 回答733 围观

问包埋之前的板子有必要洗一下再开始加试剂吗？

土井挞克树

最好洗一下，因为洗一下可以把杂质和污染洗掉

4 回答159 围观

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