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        pcr的时候目的基因比内参表达还高的原因是什么

        相关实验:PCR 产物的 TA 克隆

        user-title

        saberynn

        pcr的时候目的基因比内参表达还高的原因是什么

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        4 个回答

        user-title

        小葡萄1

        有帮助


        1.如果同管扩增,引物之间是否有竞争存在
        2.操作加样时是否有失误
        3.还有循环次数因素
        4.一次的现象不能下这样的结论,建议再重复几次。

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        可能操作不当问题,再做一次看看啥情况

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        主要考虑是RNA存在降解或引物问题导致。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果在PCR实验中,目的基因的表达量比内参基因的表达量高,可能是由于以下原因之一:

        实验操作问题:可能在RNA的提取、反转录、PCR扩增过程中出现误差,例如RNA提取量不足、反转录反应不完全、PCR扩增的循环数过多等,导致测量结果出现偏差。

        生物学变异:不同基因在细胞、组织或病理状态下表达水平可能存在显著差异。如果目的基因是一个高表达的基因,而内参基因是一个低表达的基因,那么这种差异就可能会在实验结果中得到体现。

        PCR扩增效率问题:PCR扩增反应中,不同基因的扩增效率可能会有所不同,因此在扩增中可能会出现假阳性或假阴性的结果。

        针对以上可能的原因,需要认真检查实验操作的每一个步骤,排除实验误差,并使用更合适的内参基因或标准化方法,确保PCR扩增反应的可靠性和准确性

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