实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问细胞呈曲线聚集生长

loveliufudan

这种情况可能是由于T25瓶内的细胞受到外界因素的影响，导致细胞生长受限，从而形成了聚集。以下是可能导致细胞聚集的一些原因：过度密集的细胞：如果细胞密度过高，它们可能会聚集在一起，因为它们之间的空间变得越来越小。这可能发生在T25瓶中，因为这种培养瓶的表面积相对较小，容纳的细胞数可能会超过适宜的数量。细胞黏附性差：某些细胞类型可能具有较差的黏附性，因此在培养瓶表面聚集的可能性较大。另一方面，96孔板

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问C57小鼠双结扎法慢性脑缺血模型

balalaLy

有专门的血管夹，时间需要摸索，缺血时间太长肯定会死

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问HE染色步骤

龙大人驾到

如果染色后只进行脱水而不使用二甲苯及中性树胶封固，可能会导致组织样本变形、移位和离散度增加，从而影响结果的准确性和可靠性。此外，染色后未封固可能会导致切片表面有氧化现象发生，使得切片在显微镜下呈现褪色或者发亮的现象。至于冰冻切片的厚度，一般建议在5-10 μm之间，较为适合HE染色。如果切片过薄，可能会导致组织破裂或者缺乏立体感，而过厚的切片则可能会导致染色效果不佳或者观察时不易聚焦。在选择切片厚

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问虾体中肝胰腺重量占百分之多少

huarenqiang5

一般肝胰腺占总体重的2-6%。

3 回答416 围观

问请问dc2.4细胞生长良好的时候是贴壁状态吗

土井挞克树

不是的，正常不是贴壁。类似于悬浮。

3 回答1261 围观

问rDNA介导的整合型载体线性化位点怎么选择？

土井挞克树

选择rDNA上有，而载体上没有的酶切位点

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问提rna测浓度后，260/230显示有杂质污染，这种情况下做荧光定量会有影响吗?

土井挞克树

少量杂质问题不大，荧光定量不会显影

4 回答416 围观

问构建过表达载体菌液测序出现问题

土井挞克树

因为通用性引物的特异性低，所以会出现重叠，更换引物再做

3 回答1324 围观

问除293T以外，其他的膜融合效率较高的细胞，或者转染VSVG效率较高的细胞？

土井挞克树

我用的最多的是hela细胞，这个细胞转染成功率很高

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问请教，STAT3和p-STAT3 Western Blot蛋白检测

loveliufudan

通常情况下， STAT3 Western Blot检测所用的蛋白质提取物是包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。这是因为 STAT3是一种细胞内信号传导蛋白，存在于多种细胞结构中，因此要检测其全局表达水平，需要提取包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。在文献中，通常报道的是磷酸化状态的STAT3(p-STAT3)含量的变化情况，而不是总的STAT3含量。这是因为STAT3的磷酸化状态是其活性的指示

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问有做THP-1巨噬细胞M2极化成功的吗？

huarenqiang5

可以按以下步骤进行： 1、THP-1-M0 巨噬细胞分化将THP-1 细胞按1×106～2×106个/mL 密度接种于完全培养基中，置于37 ℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养，每2～3 d 换液。分别用50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L PMA 刺激THP-1 细胞48 h，诱导转化为M0型巨噬细胞，每组设置3个复孔，倒置相差显微镜下观察THP-1

3 回答1314 围观

问如何从自己筛到的菌中获取一种酶的基因序列？

土井挞克树

先把菌裂解，获取基因序列，然后用已知引物进行配对

3 回答465 围观

问能告诉我在popgene这个软件里把等位基因从上图的数字换成用字母表示嘛

土井挞克树

直接从替换选项把基因的名称替换掉

3 回答500 围观

问4因素3水平正交试验方差分析F值和显著性不显示怎么办。

土井挞克树

有选项的，你需要把这两项勾选上才显示

3 回答2569 围观

问有没有人用DIA-NN搜库的时候一直出现无法识别raw文件的情况啊

土井挞克树

可以下载一个修复的附件，就可以识别了

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问求救，专家说实验动物数量不够，应该怎样回答

土井挞克树

建议增加样本，或者减少说明的结论

3 回答732 围观

问请问20%脱脂奶粉保存菌种的方法具体操作是什么呢

土井挞克树

20%奶粉煮沸，冷却脱脂，分装小试管，每管1ml，8磅15分钟灭菌备用。将纯种菌接种于平板，37℃16小时培养，以接种环刮取菌苔2-3环于牛奶中混匀，试管用硅胶塞，冻存于普通冰箱冷冻室(-12℃-18℃)。使用时取出室温溶解，待部分溶解时即可取一环接种平板，并将试管再迅速冻存，这样可反复使用3-5次。此法一般菌株可存活48个月，少数如奈瑟氏菌、甲链、白喉等可存活14-30个月。

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问酶切只出现一条目的带

汤姆卜丽波

可能是啊，你再用连接酶连一下验证一下

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问用油红O染色小鼠主动脉，为什么脂质都在血管外面呢？

龙大人驾到

在观察主动脉斑块的油红0染色显微镜下，脂质确实应该主要分布在血管内腔中。然而，如果您在观察时看到油红0染色的脂质分布在血管的外面，这可能有几个原因。首先，您可能没有将取材样本处理和切割得很好，这可能导致您在观察时看到的脂质位置不准确。其次，取材样本的油红0染色可能存在假阳性反应，这可能会导致您看到的染色位置不准确。此外，如果取材后处理或染色过程中的操作不规范或不正确，也可能会导致观察结果不准确。因

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问求助贴，WB检测BV2细胞中TLR4的表达一直跑不出来

sswei

无条带的原因很多，要逐一排除哦，比如：抗体用错，转膜出错，抗原无表达，试剂失效等，都会导致空白条带。

4 回答1048 围观

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