实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问基因在细胞表达的位置如何确定？

huarenqiang5

如果你有这个基因序列，就可以直接ncbi里面blast比对，有匹配的基因。如果只有基因名称，那么基因出处应该有。基因在哪个部位表达，如果是亚细胞定位，可以使用预测软件，输入蛋白序列就可以进行预测，一般用的wolf-sport。其他的在线预测软件网上搜一下也可以找到。

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问热蛋白组学TPP/CETSA方法，在提取细胞裂解物的时候，为什么用的是冻融法，而不是用表面活性剂

loveliufudan

这是因为在热蛋白组学实验中，使用表面活性剂（如Triton X-100）会破坏细胞膜，导致蛋白质的热稳定性发生改变，进而影响实验结果的准确性。此外，表面活性剂还可能影响到蛋白质与小分子药物的相互作用。相比之下，冻融法可以在不破坏细胞膜的情况下释放细胞内的蛋白质，并且有助于保持蛋白质的天然构象。因此，冻融法在热蛋白组学TPP/CETSA方法中被广泛采用。

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问油红O染色的阳标怎么加到培养基里

sswei

油酸不溶于水，要先跟NaOH反应生成油酸钠，然后加入到培养基中。也可以用乙醇之类的有机溶剂溶解油酸，然后加入到培养基中，但是一般乙醇等有机溶剂的终浓度要小于1％，甚至0.1％，所以要配置成高浓度的有机溶液。

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问硫酸铵沉淀蛋白是加配制好相应饱和度的溶液还是直接直接加固体

loveliufudan

如果你想沉淀蛋白质，你需要先配制好相应饱和度的硫酸铵溶液，然后慢慢加入到蛋白质溶液中，并不断搅拌均匀。直接加固体硫酸铵可能会导致局部过饱和或者不均匀，影响沉淀效果。

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问农杆菌摇菌需要多久，谢谢

huarenqiang5

150-200都可以时间大概是12-18小时就可以达到OD600=1.0，如果用于转化建议OD在0.8以下。

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问质粒双酶切后无条带，目的基因有条带

loveliufudan

过夜12小时后双酶切后质粒DNA没有条带，但是目的基因有条带，这说明质粒DNA在双酶切过程中被消化掉了，而目的基因片段受到保护没有被消化掉。这可能是因为双酶切的条件不适宜导致的，比如酶切反应的时间太长、酶切缓冲液配制不正确、酶的浓度过高或过低等因素都可能影响酶切效率。建议重新评估酶切条件，例如缩短酶切反应时间、尝试调整酶切缓冲液浓度或酶的浓度等，以提高酶切效率。

3 回答3224 围观

问磁珠分选可以分选死活的红细胞吗？

dxyc42u

磁珠分选不可以分选死活的红细胞

3 回答395 围观

问COX回归列线图绘制时出现错误

土井挞克树

更改一下列线图的设置参数再绘制。

2 回答455 围观

问meta分析数据提取

土井挞克树

可以选择95%置信区间的数值纳入。

2 回答426 围观

问springer nature投稿求助，急求帮助

dxyc42u

不会的，之前投稿也遇到过这种情况

4 回答835 围观

问投稿求助急！

dxyc42u

这种情况的话不需要重新提交的。

4 回答313 围观

问请问投过Experimental Biology and Medicine 的前辈！

dxyc42u

分时间，你这才一个月不算长，继续等待

4 回答366 围观

问求推荐sci

dxyc42u

frontiers系列期刊可以

4 回答225 围观

问DRG细胞，请教一下这一坨是啥啊，是污染了吗

dxyc42u

像是污染了，先加点药试试看效果咋样

3 回答373 围观

问【求助】液氮速冻后的组织可以直接脱水制片吗！！！

huarenqiang5

需要在冰冻切片机中平衡温度大概20-30分钟，再在-20摄氏度下进行冰冻切片。对于脂肪组织需要更低一些的温度，一般在-25摄氏度左右切片。

3 回答912 围观

问中位随访时间和中位生存时间问题

huarenqiang5

这个肯定不正常了，是因为你的随访时间过短的原因。

4 回答2703 围观

问研究是病例对照，还是横断面分析性研究呢

huarenqiang5

你的这个研究是病例对照研究，写文章也得按病例对照研究来写。

3 回答395 围观

问单基因综述，相关文献太少该怎么写啊

土井挞克树

可以添加一些相关基因的文章，对于综述来说15篇还是太少了

3 回答346 围观

问紧急求助四环素诱导系统

loveliufudan

四环素诱导系统一般使用四环素或其衍生物，如强力霉素（Dox）作为诱导剂。脱水四环素盐酸盐也是一种四环素类似物，可以用于诱导基因表达。但是，不同的四环素类似物对tTA或rtTA的亲和力不同，可能影响诱导效果。此外，还要注意细胞培养血清中是否含有四环素或其衍生物，以免干扰系统的调控。

3 回答896 围观

问Qpcr求助，求问老师，有遇到过这种大部分ct值 undete的情况吗？

dxyc42u

你这溶解曲线有非特异性扩增，好好排查下

3 回答710 围观

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