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实验问答

27,892,297 科研人在看

问基因定位

loveliufudan

病原HK基因与宿主线粒体关联的实验方法通常是通过共培养病原和宿主细胞，然后使用PCR、Western blot、免疫荧光显微镜等技术来检测宿主细胞中是否存在病原HK基因的遗传物质或蛋白质，并进一步确认其与宿主线粒体的关联。以下是可能的实验步骤：1.选择适合的细胞系：选择一种易于培养的宿主细胞系（如人类细胞系），以及包含HK基因的病原细胞系。2.共培养病原和宿主细胞：将病原和宿主细胞一起培养，使它们

2 回答667 围观

问求助怎样确认小鼠肠系膜上动脉阻断成功

土井挞克树

戊巴比妥钠或水合氯醛腹腔注射对肠道影响很小，几乎不影响造模

2 回答869 围观

问请教小鼠脾T细胞培养和测凋亡问题

loveliufudan

1.在体外培养T细胞时，增殖通常伴随着一定数量的细胞死亡。细胞死亡可以是由于培养条件不佳、培养基中某些成分的缺失、过多的细胞密度等多种因素引起的。在增殖时，细胞会逐渐增多，并且可能会部分集中在周边。细胞数量的增加和聚集现象可以通过显微镜观察到。通常，为了避免过度增殖和细胞死亡，建议根据实验需要调整细胞密度和培养条件，比如更换培养基、降低细胞密度等。2.从您提供的图片来看，凋亡图看起来可能存在一些问

3 回答760 围观

问LD和MS分选柱怎么重复利用呢

huarenqiang5

每次分选完用buffer反复冲洗柱子几遍后用无水乙醇冲洗几遍，再放入有无水乙醇容器里完全浸泡(一定要无水，不然就会生锈)，等做完实验再拿出来把柱中的无水乙醇打出，放置到一个小铁饭盒里拿去高压灭菌，在放到干燥箱里干燥就可以了，下次用的时候再拿到超净台里打开铁饭盒，用无菌镊子取出继续利用。

3 回答589 围观

问T细胞增殖是否成团

huarenqiang5

一般正常情况大概20%左右细胞成团，一直会持续到14-16天左右才散开。一定程度影响细胞增殖倍数。

3 回答999 围观

问基质胶3D培养干细胞时，如何提取干细胞外泌体

huarenqiang5

操作步骤：1)采用含血清培养基培养干细胞，培养至一定时间；2)然后提取干细胞，将干细胞放置在不含血清的培养基中，培养至一定时间；3)将步骤2)中的不含血清培养基中的干细胞进行分离，对干细胞进行培养，将细胞培养后的培养基，离心去除杂质；4)将经过步骤3)中提取的外泌体提取液和含血清培养基液混合后进行培育，培育后得第一孵化液，对第一孵化液进行离心浓缩，得到含外泌体的浓缩液；5)通过设置将步骤4)中含外

3 回答858 围观

问免疫实验中的控制实验是什么，它们为什么很重要？例如，如何利用阴性和阳性对照来确定实验结果的可靠性？

土井挞克树

阳性对照实验和阴性对照试验是生物学实验中常用的两种对照方法。其中阳性对照实验是对对照组施以能发生阳性反应的处理，其目的是显示阳性反应结果;而阴性对照实验是对对照组施以发生阴性反应的处理，目的是排除假阳性反应的干扰。阴性对照实验与空白对照试验并不完全相同，阳性对照实验和阴性对照试验是针对“预期结果”而言，其预期结果分别为阳性反应与阴性反应，其中阴性对照实验可采用安慰剂处理，也可采用空白对照处理。而空

3 回答426 围观

问Elisa洗板子的时候如果没有PBST可以用PBS代替么，吐温的作用是什么

土井挞克树

可以用pbs多冲洗几次，吐温主要是表面活性剂

4 回答4920 围观

问请问师兄师姐们，Trizol 法提取 RNA，加入氯仿后白膜糊在ep管上怎么处理。

土井挞克树

静止后再提取，考虑还是有析出。少量析出不影响

4 回答593 围观

问PCR实验研究突变型p53的引物有什么

土井挞克树

去ncbi网站上搜索突变型p53，根据需要可以选择引物。

3 回答709 围观

问这个是什么原因啊？是转膜温度太高了吗？但是并不是特别热啊只是稍微热一点点🤏

秋秋欣欣

也可能是蛋白的问题，有点弥散。

6 回答1019 围观

问想请教一下各位前辈，做癌细胞靶向耐药相关实验，为什么逆转剂用的浓度是IC10呢，可以用IC50吗

土井挞克树

不建议，因为后续计算逆转倍数时，逆转倍数是ic50/ic50，分子为不加逆转剂的浓度。所以在逆转剂的浓度一般用ic10

4 回答1791 围观

问万能的网友们！为啥跑WB的时候，样品会漏到玻璃板之间的空隙内啊😭😭😭😭

秋秋欣欣

这很明显就是胶的问题了，重新配胶看看

5 回答935 围观

问冰冻切片组织脱水方式及时间如何确定

huarenqiang5

脱水：依以下酒精梯度进行脱水，30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇（关键步骤：可当日2H也可过夜）→95%乙醇1→95%乙醇2→无水乙醇。根据不同组织大小和类型调整脱水时间，对于小鼠肝组织95%乙醇控制在30min-1H，100%乙醇5min-30min。

4 回答7351 围观

问如何查找某个基因的基因沉默序列腺病毒？

huarenqiang5

基因沉默分为转录水平的沉默（TGS）和转录后水平的沉默（PTGS）。TGS是指转基因在细胞核内RNA合成受到了阻止而导致基因沉默;对于部分植物来说,转基因引发的基因沉默可能是因为基因特异的甲基化而导致;PTGS则是指转基因能够在细胞核里被稳定地转录,但在细胞质里却无相应的mRNA存在这一现象。RNAi、共抑制、 quelling均属于PTGS。病毒基因、人工转

3 回答803 围观

问DCA曲线问题

sswei

决策曲线分析是一种评估和比较合并临床结果的预测模型的方法，只需要对模型进行测试的数据集，并将其应用于具有连续或二分类结果的模型。因此，从该图形来看，难以做出合理的结论。

3 回答660 围观

问meta分析

sswei

由于分组的差异，导致结果的不确定。建议重新分组。

3 回答252 围观

问spss 多组间不同观察节点的比较

sswei

重复方差分析要求复合对称，该条件往往不能成立，并且求对称检验在小样本是效能低，在大样本又总能得到不对称的结果，因此并不是很好，现在认为该检验比较保守。重复测量方差分析确实简单，所以还是很多人用。但是现在已经不是routine method了。

4 回答873 围观

问小鼠新生24h皮质细胞原代培养，混合胶质细胞第4天，请问这个圆圆的细胞是什么细胞？

牧moon

第二天就贴壁了，应该不是小胶质，但是第四天应该也有小胶质了，在星胶上面

3 回答385 围观

问293T细胞之间出现异常的白色小空泡

惊鸿曾照影

有可能是细胞碎片，不建议使用。

7 回答1112 围观

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