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实验问答

24,990,842 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问0.1mol/l PH=7.0的磷酸缓冲液溶液怎么配置？

土井挞克树

甲液：NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。乙液：Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，Na2HPO4·12H2O：Mr=358.

4 回答7011 围观

问大鼠胶原诱导类风湿关节炎模型如何造？

loveliufudan

首先，胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的，如动物模型的品系和性别，胶原的制备和质量，注射的剂量和方法等。因此，您需要仔细检查实验过程中的每一个步骤，尤其是制备和注射胶原的步骤，确保每一步都符合标准操作规程。其次，您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎，如蛋白质或细胞提取物，或者使用其他的动物模型或品系。此外，您还可以尝试改变注射的剂量和方法，或者采用其他的实验操作，如局部创伤或骨髓刺激等。

4 回答418 围观

问想问一下为什么提的rna跑出来的条带都是这样的。理论值应该是28s:18s为2:1，但是胶图上却不是这样子的。

loveliufudan

可能有以下几个原因：样本不纯：如果你的RNA样本中存在DNA、蛋白质、盐类、酶或其他杂质，可能会影响RNA的电泳结果，导致28S和18S RNA带比例不正确。你可以通过琼脂糖凝胶电泳前对RNA样本进行纯化来解决这个问题。样本降解：如果RNA样本不完整或已经降解，可能会影响28S和18S RNA带的比例。这种情况下，你可能会看到28S RNA带出现双峰，18S RNA带的强度减弱。你可以通过在RNA

3 回答1418 围观

问请问做WB时出现这种情况是什么原因

申东熙老伯

样品浓度过高loading跑不下去，可以多加点loading稀释一下。

4 回答391 围观

问运用Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力时，能否直接大田试验，不用水培法培养水稻？

loveliufudan

Ti离子比色法是一种常用的测定植物根系泌氧能力的方法，通常需要使用水培法培养水稻根系，以获得相对稳定的实验结果。在大田试验中直接进行Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力可能会受到多种因素的干扰，如土壤物理化学性质、微生物群落、根系发育情况等，导致实验结果的可靠性不高。因此，建议您在进行Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力之前，先在室内使用水培法培养水稻，使其形成相对稳定的根系，然后再进行实验。如果您想

3 回答479 围观

问朋友们！我的内参为啥跑成这个鬼样子啊，上样前看见样品孔里有一点凝胶碎屑，跟这个有关系嘛？

土井挞克树

有一定关系，凝胶孔压的杂质会污染内参，影响内参的成像

4 回答397 围观

问体外培养间充质细胞这是什么细胞污染?

loveliufudan

可以考虑这是细菌污染。具体来说，可能是一些革兰氏阴性菌，如肠杆菌等。建议进行以下措施：进行培养液的无菌筛查：可以将培养液分别接种到无菌的富集培养基上（如LB富集培养基），并在适当的温度和时间下培养，观察是否有细菌生长。观察细胞形态：可以进行显微镜观察，观察细胞的形态是否发生了变化。细菌污染会导致细胞形态的改变，如细胞缩小、细胞形态不规则等。采取消除污染的措施：如果确认存在细菌污染，可以尝试使用消毒

5 回答379 围观

问做免疫荧光的玻片怎么处理才比较好呢？为什么放入玻片爬片后就染菌了呢？

申东熙老伯

可以用免洗的细胞爬片做免疫荧光，如果不是免洗的玻片可以在使用之前用镊子夹着过一遍火。

4 回答445 围观

问免疫沉淀实验干扰的排除方法？

loveliufudan

在免疫沉淀实验中，有时候靶蛋白的大小与重链或轻链相近，会影响靶蛋白的检测。针对这种情况，有一些方法可以尝试：使用预先交叉吸附（Pre-Clearing）：在进行免疫沉淀之前，先用抗体（不是用于靶蛋白的抗体）与细胞裂解物进行结合，通过离心将这些抗体结合的蛋白质沉淀掉。这样可以减少重链和轻链的干扰，提高靶蛋白的检测灵敏度。选择性减少重链或轻链的信号：使用特异性抗体或是特异性减少重链或轻链信号的方法。例

4 回答574 围观

问免疫荧光图片拍摄好之后，一般可以保存多长时间呢

sswei

免疫荧光图片拍摄好之后如必须保存时，则应保持干燥，置4℃以下保存。一般细菌涂片或器官组织切片经固定后可保存一个月以上。但病毒和某些组织抗原标本抗原性丧失很快，数天后就失去其抗原性，需在-20℃以下保存。

4 回答7687 围观

问用基因组DNA作为模板，对目的片段进行PCr扩增，pcr结果跑胶图如图。这是什么原因呢？要怎么解决

土井挞克树

引物设计有问题，而且pcr过程中存在降解

3 回答576 围观

问请教一下qPCR报错的问题

loveliufudan

该PCR结果中包含了多种错误提示，每个提示都可能有不同的原因和解决方法。以下是一些常见的问题及其解决方法：PRFDROP - Passive reference signal changes near CT：被标记为PRFDROP的孔的被动参考信号在CT附近发生了显著的变化，可能是由于样品或仪器问题导致的。解决方法是检查仪器和实验操作是否正确，并确保样品中的RNA/DNA质量和浓度正常。NOAMP

2 回答4223 围观

问mtor2信号通路要怎么研究？具体研究哪几个关键蛋白比较好呢？

huarenqiang5

研究DEPTOR，mSLT8（GβL）蛋白比较好。

4 回答441 围观

问求问从成年老鼠提取星形胶质细胞，时候，怎么去除神经元的。有没有不传代，直接分离纯化星形胶质细胞的方法，然后进行WB等测试的。万分

sswei

在没有酶促孵育的情况下，使用机械解离可以更好地得到星形胶质细胞。

3 回答367 围观

问请问我的hepg2怎么和ATCC的不一样？

Luckybabygirl

其实如果都是梭形，没有差的特别多，是勉强说的过去的，因为细胞在每个人手里养出来的不一样，状态和代数都不一样，可能到后期形态就发生改变了，但如果你这是刚买回来不久，就变样子了，就得去咨询下公司了

5 回答311 围观

问请问一下，统计使用自体血细胞分离技术的数据，比较患者术后的凝血功能，使用什么统计方法啊？统计的数据中有

sswei

3 回答901 围观

问看海绵宝宝的眼睛👀，这是什么菌？

土井挞克树

还是像霉菌，丝状霉菌的可能性大

5 回答624 围观

问如何解决合成cDNA第一链合成的引物退火不充分？

cherish1100

可以适当的改变退火温度，高或者低2度

3 回答446 围观

问肌钙蛋白免疫荧光标记中的问题？

晴空a

建议使用 pH 7.0左右的偶联液，选择能够高度特异性结合肌钙蛋白的抗体，并进行充分的荧光微球活化和荧光标记过程控制，包括反应时间、抗体和微球的比例、荧光素的浓度等。

3 回答542 围观

问请问各位大神nrf2 蛋白wb怎么跑？

豆豆是个豆

我是用12%的胶跑的，转膜、封闭、孵二抗都是两个小时，然后洗的时候不要洗那么多次，三次，每次5min就够了，不然会洗掉。nrf2本身蛋白量67，但是做WB通常是检测100KD的条带（此时nrf2可能有和其他蛋白结合），而且同一泳道nrf2通常会分裂好几条条带。

5 回答4472 围观

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