目的条带有被拉下来但是重新把膜洗了然后敷另一个对照抗体，ip就没有😭会是什么问题呀

可能是清洗的过程中破坏了膜的结构，导致后面不出结果

可能是洗脱液强度太大或者蛋白本来就不多洗膜把第二个蛋白洗没了

目的条带被拉下来可能是由于膜的处理、处理时间、电泳条件等因素导致的。重新将膜洗一遍可以去除非特异性的结合，但如果之前处理膜的步骤不正确，则可能仍然会影响结果。

对照抗体能够成功进行IP说明IP反应本身没有问题，但仍需要对之前目的抗体的IP反应进行分析，可能的问题包括：

目的抗体的选择是否正确：如果目的抗体不特异，则可能会出现假阳性的结果或者非特异性的结合，导致目的条带的拉下或者不明显。在选择目的抗体时，需要进行充分的验证和筛选，确保其具有特异性。

IP反应条件是否合适：IP反应的条件包括反应时间、温度、缓冲液等，需要根据抗体的特性和实验条件进行优化。如果反应条件不合适，则可能会导致目的抗体结合不稳定或者无法结合到靶蛋白。

目的蛋白的表达水平：目的蛋白的表达水平可能会影响IP反应的结果。如果目的蛋白表达水平太低，则可能无法被目的抗体识别或者结合，导致目的条带不明显。

可能存在抗体有效性，转染试剂和质粒的量等问题。