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问
abcam的抗体说明书上观察到的分子量是33,我跑的都在42,文献里别人用sigma或者其他抗体条带也在42,我跑的能不能用啊?呢
loveliufudan
抗体说明书中提到的分子量是供参考的,它是由厂家或供应商提供的建议值,可能会因为生产批次或其他因素而略有不同。因此,在实验中,您应该以您的实验结果为准,而不是仅依赖于说明书提供的参考值。在您的实验中,您得到的蛋白质大小为42 kDa,而在其他人的实验中,他们使用的抗体或其他试剂得到的蛋白质大小也为42 kDa。这表明您的实验结果与其他人的实验结果一致,并且与文献报道的结果相符合。因此,您可以使用您的
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问
请问牙龈卟啉单胞菌的浓度与od值关系?
sswei
一般OD600=1时对应的细菌浓度为undefined10^9cfu/ml。
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问
多重免疫荧光为什么会飞片?
loveliufudan
造成多重免疫荧光飞片的原因有以下几个方面:治疗组织不当:在制备组织样本时,固定和处理组织的方法和条件可能会影响组织的完整性。如果组织未能充分固定或处理不当,组织结构会受到破坏,导致组织容易脱落。贴片不当:在贴片时,如果载玻片上的组织样本未能均匀涂布或压实,样本就会容易脱落。此外,如果载玻片表面存在污染或未经适当处理,组织样本的附着力也会受到影响。洗涤和染色条件不当:在染色和洗涤过程中,如果使用过于
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问
实验中用到的buffer的配置详细是什么试剂进行配置,以及蛋白含量和对应磁珠用量的具体比例是什么?
土井挞克树
buffer的配置有很多种方法,可以参考下表
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问
WB实验转膜过程中出现以下这种问题?
土井挞克树
可能是存在移位或者重叠,建议不要一起转,分开转就不会这样了。
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问
用transwell对巨噬细胞和肺成纤维细胞共培养?
sswei
实验步骤:1、效应细胞接种到transwell小室中,培养24小时。2、靶细胞接种到细胞培养板中,培养24小时。3、过夜培养后,将transwell小室和培养板中的培养液除去,下室加入新的培养液。4、将transwell小室放入细胞培养板中并加入新的培养液,培养48-72小时后进行检测。5、取出transwell小室,吸出细胞培养板中的培养液。6、PBS洗涤细胞培养板两次,4%多聚甲醛固定细胞。7
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问
关于荧光定量PCR的Ct值的
huarenqiang5
主要考虑以下几点原因:(1)反应的循环数不够:一般要在35个循环以上,但是过多的循环次数可增加背景值。(2)检测荧光信号的步骤有误:SYB-Rgreen法(SG法)采用的是72延伸时采集荧光信号,Taman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。(3)引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性,若是电泳条带呈弥散状,可考虑重新合成引物或探针。(4)模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释
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问
FITC-Dextran做抗原吞噬细胞的原理是什么呀
土井挞克树
FITC-Dextran具有抗原呈递功能,还可以被特异性识别。
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问
有哪些数据库记载了IG基因家族的详细分类分类与功能?
土井挞克树
IMGT,国际免疫遗传学数据库,这个数据库可以查询
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问
病毒与含有抗体的血清孵育后病毒浓度增高是为什么?
sswei
该病毒抗体的对病毒效力低下或无效,可能抗体失效或抗体效力减弱。
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397 围观
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问
正常C57小鼠的子宫重量是多少呢?
huarenqiang5
5周龄约重10-20mg,10周龄的约重23-30mg。
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问
免疫组化标本突然大量脱片
沫子大大
大量脱片问题考虑你的试剂浓度是否合适,同时你的载玻片有没有问题,普通的载玻片需要度明胶,也可以直接买黏附性的载玻片,贴的时候不要弄反。
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问
WB条带中间空白,两边有信号,是什么原因呢
huarenqiang5
wb条带中间有空白的原因是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快的消耗导致。
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问
薄膜水化法制备聚合物囊泡,在水化过程有絮状物析出,有什么解决办法吗?
sswei
生成成沉淀原因大约是因为甲醛与聚乙烯醇发生分子间的缩醛反应,使原本线性的聚乙烯醇变成T型交联,分子量变大而沉淀出来,而缩醛,办缩醛的反应是可逆的,并不稳定。只有相邻的两个羟基与甲醛形成的五元环状缩醛才稳定,而这样的产物是线性的,加上众多的羟基,醚键都是亲水基,溶水性好。因此,析出的沉淀会逐渐解去不稳定的T型交联,变成线性的,相邻五元环的可溶性聚合物,又会溶解。
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问
求问大鼠CD4+T细胞体外培养必须用人白介素2吗,大鼠白介素2行不行,一般具体加多少呢?
sswei
人和鼠的白介素2没有差别。根据查询相关公开资料显示,人和鼠的白介素2分子量为1.5万的糖蛋白,对T细胞激活及生长有作用。IL-2主要由CD4+和CD8+T细胞产生,IL-2主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。因此两者选其一即可。
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问
请问在免疫组化中,如何避免或减少内源性过氧化物酶或生物素造成的非特异性染色?
晴空a
将切片移入湿盒中加入新鲜配制的3%双氧水,以去除内源性过氧化物酶封闭液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
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问
免疫荧光实验,ubiquitin 显现不是很明显,是什么原因呢?
dxyc42u
与抗体孵育时间有很大关系,可以尝试晚点看荧光
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问
如何使用细胞回收液从基质胶上提取细胞
土井挞克树
把细胞回收液收取后先分离纯化后再放到基质胶提取。
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问
说明书上说一抗孵育可以是37度2小时,也可以采用4度过夜,那我到底应该采用哪种方法呢?
沫子大大
其实这两种方案我都试过,差异性不是很大。但我染的是小胶质细胞,你的具体情况不了解,你可以根据你的时间安排,算是当做摸条件,但结果差异性应该不是很大。
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问
求助:丽春红染色结果一片红 没有条带
松鼠的果仁
背景太红了,在去离子水里涮几下
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