实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问免疫荧光实验问题求助？

huarenqiang5

你的这个情况建议最好还是重新做为好。

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问请问配置部分培养基时，需要加入氨基酸，但是氨基酸又很难溶解，并且不能高温灭菌，只能用过滤灭菌法，可是没有溶于水的部分过滤不了？

huarenqiang5

可以尝试改变溶液的温度，也可以增加溶剂的浓度来提高溶解度。此外，可以使用助溶剂，如硫酸钠、硼砂等来提高溶解度。

4 回答1541 围观

问求问各位大佬显微镜下这种糊状的东西是什么污染啊，前两天图一已经感觉不对劲了，今天细胞死了，重新换液以后在显微镜下就如图二

huarenqiang5

这个考虑是支原体污染了，建议及时消毒处理。

6 回答381 围观

问研究对象为某植物，但没有全基因组，该植物目前也没有目标基因的序列，请问该如何设计引物呢？

loveliufudan

如果您想验证研究对象中是否存在某个目标基因，您可以尝试使用PCR或其他分子生物学技术来扩增和检测该基因的存在。以下是可能的步骤：从研究对象中提取DNA。设计引物：您可以使用其他已知植物中的该基因序列来设计引物，以便在研究对象中扩增目标基因。您可以使用多序列比对软件来确定引物的特异性。进行PCR反应：使用所设计的引物进行PCR反应，以扩增目标基因。反应条件可以根据引物长度和序列调整。分析PCR产物：

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问如何用长链脂肪酸给小鼠背部皮肤给药造模？用什么试剂？要用多少量？

sswei

步骤:操作前需先对鼠给药部位的皮肤进行脱毛处理，脱毛部位、面积视实验要求而定。一般选取脊柱两侧的躯干中间部分皮肤。脱毛时，可先将鼠给药部位的毛发剃短，再将脱毛药剂涂于其背部两侧 1〜2 min,之后用纱布蘸清水洗净擦干，或可用剃毛刀直接剃毛。脱毛 24 h 后观察脱毛部位有无破损、炎症、过敏等现象，若存在以上症状则不可给药。用綴子夹取酒精棉球于给药部位消毒。将鼠保定，使用棉签蘸取供试品涂抹在裸露

3 回答245 围观

问水合半径用什么仪器检测？

土井挞克树

一般来说，水化半径可以通过测量液滴的表面张力来确定。由于液滴的表面张力和它的表面能有关，所以可以通过测量液滴表面能来估算水化半径。另外，还可以通过电镜观察液滴的外观来估算液滴的水化半径。此外，还可以采用像半径测量仪等仪器来直接测量液滴的半径。

4 回答1059 围观

问提细胞蛋白，裂解离心之后，离心管里的沉淀是什么？

loveliufudan

在细胞裂解和离心的过程中，离心管里的沉淀可能是细胞的细胞器、膜片段、细胞骨架等细胞内结构，以及细胞中的蛋白质、核酸等生物大分子。具体来说，如果你是提取全细胞蛋白，则沉淀中会含有细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器以及膜片段、细胞骨架等细胞内结构。同时，还会含有细胞中的蛋白质、核酸等生物大分子。如果你是提取特定的蛋白质，则沉淀中只会含有该蛋白质所在的细胞器、结构或特定的蛋白质。需要注意的

4 回答1831 围观

问分离病毒WB能够检测到病毒蛋白的条带，但为什么基因组始终检测不到？

土井挞克树

可能是基因含量过小，比如片段kb小就不容易检测到

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问如何查询一个菌属的名称和作用

土井挞克树

1.这里我们需要使用网站https://www.uniprot.org，首先打开网页；2、点击搜索选项，选择生物学分类（taxonomy）；3、输入自己想要查询的菌名称（英文名称），并点击搜索或者按回车；4、查看自己的查询结果，菌群分类从大到小分为“门（(phylum）”、“纲(class)”、“目(order)”、“科(family)”、“属(genes)”、“种(genes)”。

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问酿酒酵母菌得到OD600值后如何得到细菌浓度

huarenqiang5

OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。通过吸光值的定义可以知道，吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度。OD值越高说明发酵液中酵母菌的密度越大，测量细菌培养液在600nm出的吸光值，得到的OD600数值如果在0.6-0.8之间，表明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。

4 回答6353 围观

问免疫组化的问题求助？

sswei

DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗；DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就被覆盖，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间；此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间。

3 回答474 围观

问求小鼠UUO模型制作过程详细过程视频等？

sswei

小鼠的输尿管结扎其实和大鼠差不多，如果比较精细的话，建议在显微镜下操作，不需要分离输尿管，只要找到输尿管，使用带针的显微缝针从输尿管下穿过并用丝线结扎就可以了。单侧输尿管结扎是主要看肾小管间质纤维化的模型。有两种方法；从正中切口进入，然后在左肾下极处的输尿管处结扎或者结扎后剪断该侧输尿管。或者背部进入，在左肾下极处的输尿管处结扎或者结扎后剪断该侧输尿管。比较而言，第二种方法比较好。

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问成骨分化诱导时，间充质细胞长满了可以传代么？

土井挞克树

可以重新稀释培养，这个时候传代有点太早，建议再培养一周

4 回答626 围观

问质粒DNA电泳条带异常是什么原因？

loveliufudan

可能有以下原因：DNA质量不佳：DNA质量不佳是导致电泳条带异常的常见原因。DNA质量不佳可能是由于DNA提取不完整、受到污染或降解等问题导致的。模板DNA浓度过高或过低：如果模板DNA浓度过高或过低，也可能导致电泳条带异常。如果浓度过高，可能会出现过度剪切的现象，导致出现长的拖带；如果浓度过低，则可能出现条带弱或消失的现象。酶切不完全或反应时间不足：如果质粒DNA未完全被酶切，或者酶切反应时间不

4 回答1625 围观

问异质性大怎么自圆其说

土井挞克树

你的说法是可以的，或者说现有样本量尚不能满足异质性要求

3 回答329 围观

问为什么越是我的活性很好的越容易出现高剂量活性下降的趋势？？是类似免疫耐受吗？

sswei

底物浓度的影响是决定酶催化作用的主要因素。酶催化反应速度随底物浓度增加现增加在逐步趋向平衡再反而下降。酶浓度的影响：底物浓度足够高的条件下，酶催化反应速度与酶浓度成正比。温度的影响：适宜温度范围内，酶能进行催化反应，最适温度条件下，酶的催化反应速度达到最大。一般60°C以上易失活，5°C以下活性极低，Taq聚合酶95°C下仍稳定。

3 回答361 围观

问在做一个酶抑制活性的实验。但是目前对加样顺序困住了。有底物，辅酶，抑制剂，酶（依赖辅酶的酶），pbs溶液。

loveliufudan

在进行酶抑制活性实验时，加样的顺序对实验结果可能会产生影响。根据您提供的信息，可以给出以下建议：根据文献中的方法先尝试：抑制剂，酶，PBS先孵育15分钟，再加入底物和NADPH，在37℃下反应10分钟，最后测吸光度。这种方法先将酶和抑制剂孵育一段时间，让它们充分发生反应，再加入底物和辅酶进行反应，这样可以尽可能地减少酶的活性对实验结果的影响，比较可靠。如果第一种方法不能获得满意的结果，可以尝试第二

3 回答967 围观

问流式中单色实验，实验有俩抗体，阻断结果有跳点可能是什么原因导致的，请大神们指导哇

sswei

抗体质量低下，导致抗体特异性差，产生非特异性结合，发生跳点。

3 回答249 围观

问NM23-H1 会同时在肿瘤细胞内起到抑制肿瘤转移的作用，分泌到细胞外促进肿瘤的转移的作用吗？

huarenqiang5

可以在肿瘤细胞内抑制肿瘤转移作用的同时起到分泌到细胞外促进肿瘤的转移作用。

3 回答402 围观

问在进行巨噬细胞诱导后提取外泌体的实验中，有无动物成分的重组蛋白因子对实验的影响是什么。

sswei

如果是异源性蛋白因子的那会对实验结果产生影响。

3 回答530 围观

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