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间接免疫荧光
土井挞克树
考虑非特异性染色的原因,建议更换抗体
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问
F11神经元细胞培养
土井挞克树
考虑黑胶虫污染,建议消毒灭菌。
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问
【请教】双抗夹心层析,阴性阳性区分不开
土井挞克树
考虑是包被的问题,夹心包被的程度不够所以分不开
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问
求胶原蛋白免疫荧光染色方法
土井挞克树
胶原蛋白免疫荧光染色方法:1.天青石蓝液的配制:天青石蓝(Celestin blue B) 1.25g 硫酸铁铵(ferric ammonium sulfate)1.25g蒸馏水 200ml甘油(glycerin) 30ml将前两者溶于蒸馏水中,然后煮沸,冷却后过滤,再加入甘油和麝香草酚。Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g 蒸馏水 100ml钾明矾(Potassium alum) 5g柠檬酸
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问
四条染色体平衡易位是不是很罕见,还有什么办法吗,三代是不是可能性也不大?
sswei
复杂易位指三条或者三条以上染色体发生断裂,断裂染色体断片发生易位和重接,从而形成多条衍生染色体即染色体易位。很罕见。这种情况本人一般没有异常的疾病表现,但会导致不孕不育,这种核型的人产生的大部分生殖细胞都是有染色体异常的,一般无法怀孕或者怀孕了也会流产,就算生了孩子大概率也是有一些异常的,比如发育迟缓和智力障碍等。但也不是完全没有希望,只是希望很小。可以三代试管婴儿尝试一下,找一个染色体正常的胚胎
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问
5mol/L氯化钠溶液配制
土井挞克树
配制时加热或者适当加压可以助溶。
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问
请问Slc7a5 fl/fl 与Col2a-Cre;Slc7a5fl/fl有什么区别,谢谢🙏
土井挞克树
SLC7A5fl是一种能将胺基酸运送入细胞内的细胞表面蛋白,而col2a-cre是介导表达的基因。
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问
miRNA靶向mRNA的3’-UTR,可以用FISH来证明两者的靶向关系吗?
土井挞克树
可以做FISH来验证靶向关系,先验证关系再验证通路。
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问
WB电泳-溴芬兰跑出3条带
土井挞克树
样本考虑有降解,重新纯化样本再跑
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问
基因敲除,需要知道菌株的全基因组信息吗
土井挞克树
最好是知道全基因组的信息,至少是功能区的。有全基因组信息可以避免勿敲,提高精确性
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问
共聚焦皿里细胞成团块的原因
土井挞克树
再观察三天,有些细胞需要时间适应。
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问
请问细胞迁移不均匀是怎么回事呢?
土井挞克树
细胞数量有点多,迁移不均匀首先考虑迁移胶不均质的问题
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问
胶原蛋白提取盐析蛋白越来越少
土井挞克树
复溶时间延长一些,然后可以多次复溶离心。
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问
我想用DNMT1抑制剂DAC处理细胞观察细胞甲基化变化以及下游基因表达变化,大概用什么浓度合适?
土井挞克树
一般0.1-0.5mmol/l的浓度处理就够了
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问
免疫吞噬实验观察不到鸡红细胞
土井挞克树
把样本浓缩后再观察,你现在样本太稀了
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问
怎么设计呼吸道黏膜上皮的免疫实验
土井挞克树
对照组采用生理盐水,观察二者接触时呼吸道黏膜炎性细胞的变化
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问
免疫组化图片明明肉眼可见是增强的,但是Image J分析mean值却反而下降,这是为什么呀
土井挞克树
有可能是image的灰度值没有设置正确,image的参数设置错误就会出现相反的结果
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问
目的基因克隆发生同义突变,使用他构建过表达载体是否会有影响
土井挞克树
同义突变如果是长片段的话不建议用,会降低体系稳定性
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问
想用受体拮抗剂处理细胞,如何证明受体拮抗剂使受体是去了活性?
loveliufudan
为了证明受体拮抗剂使受体失去活性,您可以使用以下方法:放射性配体结合实验(Radioligand binding assay):该方法可用于测量细胞膜受体的结合活性,利用放射性标记的配体与受体结合,通过测量剩余的未结合的配体来确定受体活性是否被抑制。使用受体拮抗剂处理细胞,如果受体失去活性,则绑定配体的数量会减少。細胞酶連結免疫吸附分析(Cell-based ELISA):该方法利用受体特异性抗体
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问
求助 请问癌细胞分裂期有多长时间啊?0.5-2h?
loveliufudan
癌细胞分裂期的时间可以因细胞类型和生长条件而异。一般来说,癌细胞的有丝分裂周期约为 18-24 小时,其中 G2/M 期为 4-6 小时,M 期为 1-2 小时。对于您所做的 H1299 细胞,nocodazole 可以阻止细胞有丝分裂,使大部分细胞停滞在 G2/M 期。如果您想要得到分裂期的细胞,您可以在 nocodazole 处理后等待 1-2 小时,这样细胞应该已经进入 M 期。接着您可以用
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