实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问HE染色模糊不清，在显微镜下观察这样是什么原因呢？

秋秋欣欣

细胞都看不太清楚，是不是脱腊没脱好

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问免疫组化Image J分析

sswei

平均荧光强度(Mean) = 该区域荧光强度总和(IntDen) / 该区域面积。测量参数设置错误所致。

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问nissl染色，海马一直裂口

loveliufudan

出现裂口、断裂的可能原因如下：组织处理过程中损伤导致。如固定不足、处理时间过长、处理过程中机械振荡等都可能导致组织细胞裂口。切片过程中操作不当，如切片厚度不均、切片时候挤压组织等。石蜡切片加热时间过长或过高，导致组织脱水过度。针对以上可能原因，可以采取以下措施避免裂口的产生：在处理组织时，注意固定充分、处理时间控制、避免机械损伤等。切片前要进行组织的均匀包埋和切片厚度的控制，切片时不要挤压组织。石

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问弗氏佐剂正式免疫能打入大鼠静脉么

天一湖医者

不能打入静脉，只能皮下注射或肌肉注射。

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问求助 SD大鼠高脂诱导胰岛素抵抗

loveliufudan

SD大鼠60%高脂饲料诱导可以导致胰岛素抵抗和糖代谢异常，而OGTT测试可以用来评估机体的葡萄糖耐受性。如果在第6周的OGTT测试中发现异常，这意味着这些SD大鼠可能已经出现了胰岛素抵抗和/或糖代谢异常的迹象。但在第17周再次进行OGTT测试时，如果没有发现异常，这可能是由于以下原因：大鼠的身体已经适应了高脂饲料，改变了其代谢途径，使其在更长的时间内维持了较好的糖代谢能力。大鼠可能已经发展出代偿性

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问电位差驱动力的形成原因及影响因素是什么？

sswei

静息电位不是任何一种离子的平衡电位，而是所有离子电流的净电流之和为零的平衡电位。静息电位的影响因素有很多，但主要是两个：一是各种离子在细胞内外的浓度梯度，二是各种离子的相对膜电导（膜通透性）。

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问睾丸HE染色

loveliufudan

组织破碎可能是由于样品在脱水、清洗或包埋过程中受到机械性创伤或化学物质影响造成的。以下是一些可能的问题和建议：多聚甲醛固定时间过长：固定时间过长可能导致交联度增加，使得细胞和组织变得更加脆弱易碎。建议固定时间缩短到适当的时间。乙醇梯度脱水过快：脱水过程中，乙醇的逐渐浓度变化有利于渐进性地去除水分。但是脱水时间过短可能导致组织内水分过多，脱水时间过长可能导致组织变得脆弱。建议根据组织类型和大小适当调

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问脑组织He病理

loveliufudan

正常大鼠皮质中存在神经元变性的情况比较罕见，但是在老龄化大鼠中神经元变性和神经元丢失是比较普遍的现象。这些变化可能是与年龄相关的自然退化过程的一部分，与神经元的生命周期有关。此外，胼胝体疏松也是正常的老化过程之一。胼胝体是大脑中的一个白质结构，它主要由神经纤维和胶质细胞组成。随着年龄的增长，胼胝体中的神经纤维数量可能会减少，这可能导致胼胝体的疏松和萎缩。虽然神经元变性和胼胝体疏松都是正常的老化过程

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问亚胺培南平板配制及储存问题

loveliufudan

1.自制亚胺培南LB平板在4℃下可保存3-4周左右，但是抗生素的有效性会随着时间的延长而降低，因此建议在使用前进行检测，确保抗生素的有效性。2.自制亚胺培南LB平板接种细菌后，在37℃下培养一般需要24-48小时左右才能观察到结果。过长时间的培养可能会导致抗生素的失效，使得对亚胺培南敏感的J53也能生长出菌落。通常情况下，如果细菌在24小时内没有生长，就可以认为该菌株对亚胺培南敏感。但具体时间的判

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问求助！关于肠道菌群课题的样本量计算

土井挞克树

样本至少30个，有专门计算样本量的公式。

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问淋巴细胞分离计数实验计数偏低的原因！！

天一湖医者

可能原因，温度是否没有调好，温度直接影响到Ficoll的比重和分离效果。在Ficoll上加入稀释外周血时，应缓慢加，以免冲散界面。Ficoll应适量，外周血应充分稀释。

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问裂解BL21(DE3)plSs感受态细胞细菌蛋白方法

loveliufudan

反复冻融可能会导致细菌膜破裂，释放出溶菌酶等细胞内容物，但这种方法并不可靠，同时也会破坏细胞内的其他蛋白质、DNA等分子。而且这种方法通常适用于某些特定的菌株和特定的表达质粒，不是所有的菌株和质粒都适用。如果您的菌体像果冻一样，可能是因为在冻融的过程中，细胞壁或细胞膜已经被破坏了，导致整个细胞变得脆弱，甚至发生了溶解。这时候再进行离心操作，会发现细胞碎片难以分离。如果您需要裂解BL21(DE3)p

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问谁知道这个怎么cfu计数呀

loveliufudan

以下是一些基本的CFU计数步骤：取一定量的细菌培养物，通常是通过吸液器或针头来定量取样。使用万能试剂或其他方法将细菌稀释到适当的浓度，使其易于计数（一般是1:10到1:1000的稀释比）。取适量的细菌稀释液，在无菌平板上均匀涂布，然后在37℃下培养一定时间（一般为16-24小时）。计数菌落，将菌落数乘以稀释倍数，得到原始细菌数量。注意事项：在进行CFU计数前，需要确保培养物已经均匀混合，否则会影响

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问THP-1构造炎症模型

loveliufudan

THP-1是一种单核细胞白血球系的人类细胞系，通常用于构建体外的炎症模型。构建THP-1细胞的炎症模型通常需要刺激细胞以诱导炎症反应。其中，PMA是一种受体激活剂，能够激活THP-1细胞并促进细胞分化成具有巨噬细胞样特征的细胞。因此，加入PMA可使THP-1细胞的粘附性和吞噬能力增强，增加细胞对LPS等其他炎症刺激物的敏感性。当THP-1细胞处理PMA后，可使其表达CD14和Toll样受体（TLR

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问导师放养，想问下大佬关于中药相关问题。

loveliufudan

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问幽门螺旋杆菌和其他普通的细菌的慢冻快融的步骤一样吗？

sswei

幽门螺旋杆菌和其他普通细菌的慢冻快融步骤一样的。

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问阿米巴在肠道以外组织一般不形成包囊体的原因是什么

loveliufudan

这是因为在肠道以外的环境中，阿米巴原虫没有必要形成包囊体来抵御环境压力和营养不足的情况。在肠道内，阿米巴原虫通常会遇到环境压力和营养不足等不利条件。在这些情况下，阿米巴原虫会形成包囊体，以保护自己并保持生存。包囊体是一种耐久结构，可以在不良环境中存活数年，同时也是传播病原体的重要手段。然而，在肠道以外的环境中，阿米巴原虫通常可以通过吞噬细菌和其他微生物来获取充足的营养，并且不需要面临如此强烈的环境

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问有人知道end over end rotator是什么仪器吗

sswei

end over end rotator是端对端旋转器。

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问求助：小鼠粪便混合菌培养，可以用PCR检测属水平目标菌丰度吗？引物怎么设计呢？

loveliufudan

针对你的目标菌属，你可以根据已知的序列信息，设计一对特异性引物进行PCR扩增，然后使用定量PCR技术来定量目标菌丰度。在设计引物时，可以使用专业的引物设计软件进行设计，如Primer3等。在选择引物时，需要考虑引物的特异性、长度、GC含量、互补性等因素，以确保引物能够特异性地扩增目标菌属的DNA序列。如果你在查阅文献时没有找到与你目标菌属完全一致的序列信息，你可以尝试设计一对degenerate

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问这是成骨矿化结节吗

残容美

请问你这个图是什么情况下拍的，是什么细胞，干细胞还是成骨细胞前体细胞，有没有进行诱导，有的话，诱导多久了？建议作者进行染色后拍图大家再进行讨论。前段时间我用MC3T3-E1细胞成骨诱导21天后进行茜素红染色，结果还是挺明显的。

3 回答615 围观

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