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实验问答

25,212,336 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问重组质粒构建好了就是表达不出蛋白

CotyledonIXD6

你蛋白需要什么表达条件？用的什么载体？可以看看载体对应的说明书，用说明书上推荐的条件试一试，最好把重要的试剂重新配一下。

1 回答326 围观

问干细胞原代培养换完液后杂质依然很多正常吗

loveliufudan

在干细胞原代培养过程中，杂质的出现可能是由于以下原因：1. 细胞本身：某些干细胞类型可能会产生较多的杂质，这可能是其自然特性的一部分。2. 培养液：培养液的配方或质量可能会影响杂质的产生。不合适的培养液成分或污染可能导致杂质增多。3. 细胞分离和纯化：在原代培养的细胞分离和纯化过程中，可能无法完全去除杂质，导致其在培养中继续存在。4. 培养条件：例如温度、酸碱度、氧气浓度等培养条件的不合适可能会影

1 回答502 围观

问wb跑蛋白条带糊了是什么原因呢？

dxy_a3w222q8

换个封闭液吧，这背景这么脏，不知道蛋白有没有降解

1 回答328 围观

问试验结束后对伤口进行消毒粘合这步如何操作主要在粘合这步

fasfsaga123

医用胶水或皮肤粘合剂吧，都有专门提供的

1 回答299 围观

问WB目标蛋白位置偏下而内参蛋白位置基本正确是为什么呀

dxy_gp0fsbmr

可能是杂带建议把杂带切了再显影试试

1 回答374 围观

问想请问一下，重组质粒做PCR目的条带很清晰，但是做双酶切结果显示只有目的条带，但没有载体片段是为什么

sw279

双酶切后你这两段几乎就一样长诶，是不是这个原因导致只看到一条带

1 回答451 围观

问过表达稳转已验证，但标签抗体做IP杂不出标签本身的原因是什么

sw279

换抗体，或者直接用标签磁珠Anti-flag，Anti-myc磁珠这种

1 回答376 围观

问从公司买了过表达质粒，293-t能显示出flag，我的癌细胞pcr过表达趋势明显，但是wbflag死活跑不出来。求教！

sw279

用买的质粒做的转染吗？还是自己转化过的呢？我也有这个情况

1 回答336 围观

问请问有没有会取小鼠背根神经节的大佬！求指导，求发视频啊😭😭😭😭😭😭😭

dxy_a3w222q8

你把脊柱旁边的肉弄干净，脊髓抽离，用剪刀沿中部剪开脊柱就可以看到背根神经节了。

1 回答366 围观

问Dot Blot实验求助

dxy_l8ybxso6

请问你这个问题解决了吗？我也遇到这个问题了

1 回答498 围观

问flox小鼠与cko小鼠的区别？

凌晨三点Dxy

Flox和cko小鼠是两种基因敲除技术的载体，它们的主要区别在于目标基因、激活方式以及应用范围。1. **目标基因*：Flox小鼠是指在目标基因两侧各放置一个loxP位点的小鼠。当这些小鼠与表达Cre重组酶的小鼠交配时，Cre酶会识别并切除两个loxP位点之间的基因序列，从而实现特定基因的敲除。而cko通常指的是条件性基因敲除（conditional knockout），它侧重于在特定的组织或发

6 回答11462 围观

问ZDOCK搞好的蛋白对接用pymol打开后怎么显示有问题？请问一下各位大佬，该怎么解决呢？

dxy_y6nyvy78

因为两个链都是A，需要把另一条链改成Bpymol中选择乱码的那条链然后输入命令alter sele, chain=‘B’

5 回答3896 围观

问流式细胞术检测cy5

吴U4GF

请问cy5.5怎么标记纳米粒啊

4 回答1951 围观

问外泌体提取（raw264.7细胞）

天花病毒

RAW264.7本身的培养也是一种原因，培养基里不加谷氨酰胺可以增加外泌体的分泌量。细胞状态好一点，外泌体含量也会多一些

4 回答1345 围观

问网状meta分析闭合环检验

loveliufudan

如果你的网状meta分析形成了一个闭合环，并且一致性检验的P值小于0.05，这意味着存在潜在的一致性问题。这时你可以考虑使用几种方法来解决这个问题：排除不符合标准的研究：你可以重新审查研究的纳入标准，排除那些可能导致异质性的研究，从而提高一致性。拆分成多个子组分析：如果可能，你可以根据相关因素将研究分成不同的子组，进行分析，从而减少异质性。使用随机效应模型：相对于固定效应模型，随机效应模型更能够容

3 回答1423 围观

问[求助]小鼠肝脏缺血再灌注模型

alimGYR

你好，你的模型怎么样了，我的模型生化指标很理想，但是he染色he免疫组化感觉没有损伤和凋亡

3 回答732 围观

问raw264.7炎症因子

happymaker

请问您刺激条件是什么呢刺激浓度和刺激时间我一直造模不成功想请教一下

6 回答1022 围观

问求助 4T1细胞质粒转染有朋友用质粒和PEI转染过4T1吗？效果怎么样呢？

huarenqiang5

1.感染前一天，消化4T1细胞并计数，将细胞铺于24孔板中（以便在感染前细胞达30%-50%的汇合度，37°C过夜孵化细胞。2. 解冻低温保存的慢病毒液，并且制备1：2病毒稀释液200µl加入细胞中。3.向每孔加入Polybrene达到终浓度6ug/ml，晃匀孔板，37度孵化过夜。4.移去含有慢病毒的培养基，加入500µundefined培养基。5.换液，加入300µg/ml Hygromycin（Sigma

4 回答1665 围观

问从ATCC购得的HK-2细胞，传2~3代就是状态不好，细胞形态像碎了一样，用的是DMEM/F12培养基和10%血清。请问怎么办

dxy_kza87kz2

请问现在细胞状态怎么样了？使用K-SFM试试了吗？

6 回答465 围观

问有做适配体连接细菌的友友吗？

dxy_kd3ees49

我也在做这方面，试了很久还是连不上，您现在有解决方案了吗

4 回答569 围观

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