实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问植入材料酸蚀以后没有促进细胞增殖

loveliufudan

可能有多种原因： 1. 植入材料的性质：可能植入材料的特性不适合促进细胞增殖，例如表面粗糙度、化学成分等。 2. 酸蚀处理不彻底：酸蚀后可能残留了一些酸性物质或残留物，这可能对细胞产生负面影响，抑制了细胞增殖。 3. 细胞类型和生理状态：不同类型的细胞对酸蚀的反应可能不同，而且细胞可能处于不同的生理状态，从而影响其对酸蚀的响应。 4. 实验设计问题：实验设计、条件或者其他环境因素可能会影响细胞的增

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问包埋在OCT冻上后融了再冻起来还能用吗

loveliufudan

取决于以下几个因素：1. 融化的程度:如果只是部分融化，OCT仍然保持固体状态，那么类器官可能仍然可以用于切片染色。如果完全融化，OCT变成液体状态，那么类器官可能会受到破坏，无法用于切片染色。2. 类器官的类型:不同的类器官对冷冻融化的敏感性不同。一些类器官比较耐受，即使融化后也能恢复原状，而另一些类器官则比较脆弱，融化后可能会受到不可逆的损伤。3. 固定和脱水的程度:充分的固定和脱水可以提高类

1 回答1173 围观

问培养基不变黄，但细胞长不起来，是什么原因

loveliufudan

几个可能的原因：1. 培养基缺乏必需营养成分虽然培养基没有发生明显变化,但可能缺少某些关键的氨基酸、维生素或生长因子等,导致细胞无法正常增殖。2. 细胞接种量不当如果接种的细胞数量过少,细胞分裂繁殖的速率会变慢;如果接种量过多,也会因营养竞争而影响生长。3. 细胞活力下降细胞可能已经老化或在传代过程中发生基因突变,从而降低了活力和增殖能力。4. 培养环境不适尽管培养基未发生明显变化,但温度、pH值

1 回答683 围观

问非双抗铺板时提前水浴加热了（粉色），会有影响吗？

loveliufudan

可能会有影响，主要存在以下几个潜在的问题:1. 蛋白质变性加热可能会导致包被在板底的抗体或其他蛋白质发生变性,使其失去活性和结合能力,影响实验结果的准确性。2. 非特异性吸附增加高温会增加非特异性蛋白吸附到板底或板壁,从而增加实验背景值。3. 板涂层脱落部分涂层在高温下可能会发生剥离,导致目标物质流失。4. 板材变形极端情况下,塑料板材在高温下可能发生变形,影响后续实验操作。因此,对于非双抗实验,

1 回答202 围观

问细胞传代后，第二天没有问题，第三天观察时污染了，并且传代了10瓶细胞用同样的物品。只有4瓶污染了，其他的没有问题，为什么呢？

yxy6316

有的可能污染比较轻，还没显现，先别着急做实验，可以等等看

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问大家来帮我看看错在哪了？有关移液器使用

微露初梅

不知道标准答案的解释，蹲一个，请楼主不要介意。

1 回答398 围观

问细胞裂解液可以裂解细菌吗

凌晨三点Dxy

细胞裂解液可以裂解细菌。细胞裂解液主要用于破碎细胞，释放出细胞内的物质，以便进行后续的分子生物学实验。对于细菌，细胞裂解液同样可以破坏其细胞壁和细胞膜，使细菌内部的物质释放出来。然而，不同的细菌可能对不同的裂解液有不同的反应，因此在使用细胞裂解液裂解细菌时，需要根据具体的细菌种类和实验需求选择合适的裂解液。此外，细胞裂解液的使用也需要遵循一定的操作步骤和注意事项，例如控制裂解时间、温度、pH值等，

1 回答588 围观

问保存一次的菌液还能再加甘油保存吗

凌晨三点Dxy

保存过一次的菌液，如果之前已经使用过甘油进行保存，并且保存条件合适，菌液活性良好，那么理论上是可以再次加入甘油进行保存的。然而，需要注意的是，每次使用甘油保存都会对菌液产生一定的压力，可能会影响菌液的活性。因此，在实际操作中，建议根据菌液的状态和实验需求来决定是否再次使用甘油保存。同时，为了避免菌液在保存过程中失活或污染，建议遵循以下几点：确保保存条件适宜，如温度、湿度、光照等。在加入甘油前，对菌

1 回答616 围观

问请问cRNA怎么保存，-80℃？能放多久？

凌晨三点Dxy

cRNA在-80℃的保存时间可以很长，但具体的时间取决于多个因素，包括cRNA的质量、纯度、保存容器的选择等。一般来说，如果cRNA被适当地处理和纯化，并且保存在高质量的容器中，那么在-80℃下，它可以保存数月甚至数年而不失去其活性。然而，为了确保cRNA的质量和稳定性，建议避免反复冻融，因为这可能会导致cRNA的降解。总的来说，cRNA在-80℃下的保存时间相对较长，但为了确保其质量和稳定性，建

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问外周血中嗜酸性粒细胞的分离

凌晨三点Dxy

外周血中嗜酸性粒细胞的分离可以采用磁性细胞分选技术的阴性选择法。以下是具体的步骤：首先，使用3%明胶溶液沉降红细胞，上层液用梯度离心去掉单个核细胞，用低张溶液除去红细胞。接着，通过尼龙毛柱粘附去除中性粒细胞。由于嗜酸性粒细胞与尼龙毛柱的粘附力较弱，因此可以在此过程中被去除。然后，将剩余的细胞与鼠抗人CD16单克隆抗体标记的免疫磁性微球（Immunomagnetic Microbeads，IMB）共

1 回答747 围观

问如何将脑组织的B细胞提取分离，并且进行B细胞培养

凌晨三点Dxy

提取、分离和培养脑组织的B细胞是一个复杂的过程，涉及多个步骤。以下是一个大致的步骤指南：脑组织的获取：首先，需要进行动物实验，如小鼠、大鼠、豚鼠或猫等。在动物手术前，确保进行充分的准备工作，包括消毒、镇痛和麻醉。完成手术后，打开动物的头颅，取出脑组织，并迅速放入冷却的琼脂糖溶液中。脑组织的处理：将脑组织转移到无菌的培养皿中，使用组织培养液去除血液和其他细胞。然后，用小刀将脑组织切成尽可能小的块，以

1 回答723 围观

问银染实验可以用于金属蛋白的染色么

凌晨三点Dxy

银染实验可以用于金属蛋白的染色。在银染实验中，银离子在碱性条件下被还原成金属银，这些金属银会沉淀在蛋白质的表面上并显色。因此，银染实验可以用于检测和可视化蛋白质，包括金属蛋白。以上信息仅供参考，如需更多信息，建议查阅相关文献或咨询相关学者。

2 回答319 围观

问细胞实验，脂多糖LPS的配置

sswei

LPS可溶于水中(5 mg/ml)，或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。细胞培养时，将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液或是细胞培养基的小管中，轻轻摇晃直至其完全溶解。再加入无菌平衡盐溶液或是培养基直至配成工作浓度的母液。1 mg/ml浓度的溶液可在2-8℃中稳定保存1月左右，分装后于-20℃中可

5 回答13765 围观

问小鼠脑立体定位注射损伤（针孔明显及附近有梗死，求解决办法及建议）

土井挞克树

一般来说损伤在所难免，小范围的损伤影响不大

3 回答1163 围观

问log2FoldChange大于多少合适？

dxy_xm5w7hg4

绝对值大于1.5就可以，相当于可信区间增大。

5 回答18300 围观

问求助小鼠滴鼻造模

人间送小温

倾斜 45 度比较好，立位容易呛到，请问友友如何抓取小鼠，我滴鼻过程中药液流到口腔的好多

2 回答583 围观

问细胞转运抑制剂加了以后，摄取量增加了

张奕聪

请问问题解决啦嘛，我也遇到加抑制剂后摄取增加的现象了

2 回答857 围观

问如何稀释已经加入5xloading的蛋白质，如果用1xloading的话，那怎么用那种试剂把5x稀释成1x的

银月Icarus

最好是使用配置loading buffer的溶剂，加入四倍体积就可以

6 回答10728 围观

问WB封闭时间最少要多久

邓豆豆逗

5%脱脂奶粉，封闭至少30min，这个是我们经常做的时间，一般没什么问题。时间不是很赶的话，建议封闭时间1h

6 回答22025 围观

问请问细胞固定时需要注意什么？

dxy_8iaq585q

注意固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。

4 回答1797 围观

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