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实验问答

23,137,490 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问大家EPS的提取方法及操作？

sswei

目前常见的物理提取方法有高速离心、超声波和热提取等,化学方法有NaOH提取、乙二胺四乙酸（EDTA）提取、阳离子交换树脂提取（ＣＥＲ）、甲醛提取、戊二醛提取以及一些不同化学试剂的组合提取甲醛－氢氧化钠法、甲醛－超声等方法。

3 回答4090 围观

问哪一种M2巨噬亚群可以降解胶原？

sswei

纤维化模型中，降解细胞外基质胶原应选M2a。

3 回答451 围观

问wb条带连着怎么回事？用同样的胶跑其他抗体就好着。大佬们，能不能帮我看看啊？

loveliufudan

可能是以下两个原因造成的：过量载入样品：过多的蛋白质样品可能会导致过多的条带出现在同一个区域。可以尝试减少载入量。抗体特异性问题：抗体可能会交叉反应多个蛋白质，导致出现多个条带。可以尝试使用更具特异性的抗体或者对抗体进行再验证。

3 回答884 围观

问如何建立耐药细胞系

sswei

取处于对数生长期的肿瘤细胞（汇合度60%-80%），加入起始浓度为低浓度（建议为亲本细胞株的IC50的1/10-1/5）的药物作用24h，弃去培养液，PBS清洗2遍，更换不含药物培养基，细胞恢复生长后，消化传代复以低浓度作用细胞24h，待细胞增殖至正常形态后，重复上述药物冲击，每种浓度冲击6-8次。待细胞在此浓度稳定生长后，提高药物浓度继续培养，药物依次递增浓度加药。药物诱导历时6-8个月，直到细

3 回答5144 围观

问小鼠注射完水杨酸钠隔两个小时再注射水合氯醛为什么会死？

sswei

可能注射后进入小鼠体内液体量大了所引起。

3 回答468 围观

问frontiers in oncology杂志封面在哪里下载呀？

huarenqiang5

如果在官网找不到，建议联系编辑部比较可靠。

3 回答3174 围观

问Sci论文投稿37天了还是submitted to the journal，怎么办？要撤稿吗？

huarenqiang5

这个情况建议再发个撤稿申请邮件后撤稿，避免引起不必要的麻烦。

3 回答1564 围观

问《消化肿瘤杂志（电子版）》投稿

huarenqiang5

正常情况，才10几天，建议耐心等待一下，如果超过一个月可以发邮件或打电话咨询。

3 回答390 围观

问求助：中华护理教育投稿专家定稿会决审要多久啊

huarenqiang5

这个情况建议发邮件或打电话咨询一下编辑，是否退稿主要看你的文章质量。

3 回答896 围观

问有人投过中国心血管杂志吗？

huarenqiang5

这个杂志一般初审是一个月左右，费用约2000左右。

3 回答454 围观

问少突前体胶质细胞提纯

土井挞克树

振荡器和摇床的区别在于振荡器的频率一般比较高，如果买振荡器要注意一下频率

2 回答322 围观

问帮我看看这是细胞污染吗

huarenqiang5

这是细菌污染了，建议及时处理一下。

4 回答288 围观

问急急急！！透射电镜取完材忘记放4度了，还能用吗？

sswei

温度太高镜筒里的碳氢化合物将易挥发影响真空度,同时也容易污染样品。

3 回答1337 围观

问人源对应的与大鼠环状RNA怎么找

loveliufudan

要找到人和大鼠之间的cirRNA的同源性，可以采用比对序列的方法。首先需要获取人和大鼠的cirRNA序列，可以通过NCBI等数据库查询得到。然后，可以使用基因组比对软件（如BLAST，Bowtie等）将人的cirRNA序列比对到大鼠基因组上，找到大鼠中与之相似的cirRNA序列。此外，还可以通过RNA序列比对软件（如STAR，HISAT2等）比对转录组数据，找到人和大鼠中差异表达的cirRNA序列

2 回答1539 围观

问中华糖尿病杂志

sswei

审稿三个月内定初步录用后，一般再三个月定稿。

3 回答341 围观

问荧光免疫层析湿法和干法差异大

loveliufudan

建议考虑以下措施来降低干法的非特异性：优化洗涤步骤：在洗涤缓冲液中加入一定量的表面活性剂，如Tween-20或NP-40，可以帮助清除非特异性结合的物质，降低背景荧光信号。加入防污染剂：将一定量的防污染剂（如BSA或casein）加入干法试剂中，可以降低试剂对背景的非特异性结合。优化反应条件：对于干法试剂，可以调整反应温度和反应时间来优化试剂的特异性和灵敏性。减少样品中非特异性结合：优化样品预处理

2 回答1525 围观

问黄牛肌肉干细胞后代AKT总蛋白显著下调

z流沙z

细胞培养比较久以后出现老化了，建议还是使用传代次数少的进行实验

3 回答344 围观

问bv2小胶染色

loveliufudan

如果您在BV2细胞中使用对照染色法进行iNOS和Arg-1染色，并且两者都出现染色阳性的结果，这是符合预期的。iNOS和Arg-1是两个互补的酶，在不同类型的细胞中表达方式也不同。在BV2细胞中，iNOS主要参与一氧化氮（NO）的合成，而Arg-1则参与细胞色氨酸代谢和精氨酸代谢。因此，在炎症反应过程中，BV2细胞中同时表达iNOS和Arg-1也是可能的。总之，如果您的对照染色法显示BV2细胞中i

3 回答478 围观

问注射昆虫卵漏液不知道原因

loveliufudan

卵注射时漏出来有多种可能性，以下是可能导致卵注射漏出来的一些原因：针头选择不当：针头直径太大或者太小，都会影响注射的效果，太大的针头容易损伤卵细胞或者注入过多的液体，太小的针头则不容易将液体注入到卵内。注射液浓度不合适：如果注射液太浓稠，会导致注射液在注射时黏稠度过高，不容易进入卵内，从而导致漏出来。卵表面处理不当：在卵表面加入一定的粘附剂可以增加卵的黏性，从而提高注射液在卵内的粘附性。技术操作不

3 回答437 围观

问求助，小鼠脾脏淋巴细胞的培养

loveliufudan

小鼠脾脏淋巴细胞分离后，需要在含有一定浓度的细胞因子的培养基中培养，以刺激细胞增殖和活化。其中，IL-2是一种重要的细胞因子，它可以促进T淋巴细胞（包括调节性T细胞和效应T细胞）的增殖和存活。因此，你可以在你的培养基中加入适量的IL-2（例如10 ng/mL），并在37°C下5% CO2条件下培养24小时或更长时间。另外，你还可以考虑加入其他一些细胞因子，如IL-4、IL-7、IL-15等，以增强

5 回答926 围观

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