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        用trizol法怎么提取血清中的rna?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        小鱼儿吐泡泡泡


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        2 个回答

        user-title

        Dr_劉医生

        有帮助

        Trizol法是一种常用的RNA提取方法。以下是提取血清中RNA的步骤:

        1. 将血清加入Trizol试剂中。

        2. 加入氯仿,混合并离心。

        3. 收集上层水相,加入异丙醇沉淀RNA。

        4. 洗涤RNA,去除异丙醇。

        5. 重悬RNA。


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        loveliufudan

        有帮助

        Trizol法主要是用于从细胞或组织中提取RNA,而血清中的RNA含量较少,且被其他物质干扰,所以提取血清中的RNA需要特殊处理。以下是一种适用于Trizol法提取血清中RNA的方法:

        准备血清样品:收集血液,用离心将血液分离成血清和红细胞。将血清取出,可以使用超低温冰箱或液氮进行冻存。

        加入Trizol:在提取RNA前,将血清样品从超低温冰箱或液氮中取出,加入适量的Trizol试剂,如10%体积比,然后充分混匀。

        提取RNA:按照Trizol的标准方法,加入氯仿进行沉淀,然后离心分离上清液,加入异丙醇沉淀RNA。沉淀后进行洗涤和溶解RNA的步骤。

        DNase I处理:对于血清样品,其中可能含有较多的DNA,需要使用DNase I对RNA进行处理以去除DNA污染。

        纯化RNA:为了提高RNA的纯度和浓度,可以使用RNA纯化柱进行纯化和富集。

        需要注意的是,在提取血清中的RNA时,需要避免污染和RNA降解,例如避免在操作过程中使用DEPC水以及避免搅拌、震动等过度处理样品。另外,对于血清样品提取RNA时的结果可能会存在一些差异,因此需要进行反复实验并优化实验步骤。

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