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实验问答

23,132,963 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问尼可刹米引起小鼠惊厥的原因是什么

土井挞克树

尼克刹米过量具有中枢兴奋作用，增强神经钠离子内流，提高中枢的兴奋性，所以可以引起惊厥。

3 回答10679 围观

问细胞培养液中蛋白提取

sswei

酚抽提法1 在液氮中将 1g 菌体研磨为粉末2 加入 6 ml 水饱和酚（buffer-saturated phenol）和 2 ml提取液（20mMTris-Cl, pH 7.5, 0.5% Triton X-100 (v/v), 0.5M EDTA, pH 7.5, pH 8.0,0.07% β－巯基乙醇, protease inhibitors）。3 在4度混合30分钟。4 12000 rm

3 回答464 围观

问请问一下mkn45这个细胞传代胰酶消化多久合适啊

loveliufudan

一般来说，使用0.05%-0.25%的胰酶在37°C下消化细胞5-15分钟，可以将细胞完全分离。不过，实际消化时间和胰酶浓度需要根据实验者的经验和细胞状态进行调整。

3 回答700 围观

问果蝇中去泛素化酶L5是怎么通过限制Som的泛素化来正向调节Hh信号？

土井挞克树

L5可以通过与染色体中聚合成分结合限制Som泛素化

2 回答542 围观

问比较三组人群的身高、体重不能使用t检验？为啥盲审老师这么说

土井挞克树

两组采用t检验，多组采用方差分析，多组采用t检验会增加1类错误的发生率

3 回答1869 围观

问外泌出细胞的蛋白如何验证

loveliufudan

验证外泌出的蛋白质通常可以通过以下步骤进行：收集上清液：将真菌孢子培养在适当的培养基上，培养至一定时间后，收集上清液。上清液中可能包含孢子释放出的外泌物蛋白质。蛋白质提取：将收集的上清液进行蛋白质提取。通常可以使用酸性异丙醇沉淀法、超声波法、直接浸泡法等方法进行蛋白质提取。蛋白质分离：将提取的蛋白质进行分离。可以使用SDS-PAGE、2D-PAGE等电泳技术进行分离。免疫检测：使用Western

2 回答859 围观

问甲基红实验和伏普实验出现假阳性的原因？反应后颜色为什么不红？

loveliufudan

假阳性通常是由于试剂或样品中存在干扰物质或其他化学反应的影响导致的。例如，甲基红实验中，如果试剂或样品中存在还原剂或其他与甲基红反应的物质，就会出现假阳性的结果。同样地，在伏普实验中，如果存在与酚酞反应的物质或离子，也可能会出现假阳性的结果。此外，如果试剂或样品中的 pH 值超出了检测范围，也可能导致不准确的结果。关于反应后颜色为什么不红，这可能是由于反应条件或试剂浓度不足等因素导致的。例如，如果

4 回答825 围观

问自噬通量检测使用自噬抑制剂，是持续干预还是检测前干预？

loveliufudan

对于体内实验，由于Baf和CQ都具有毒性，因此应尽可能缩短给药时间，以避免不必要的副作用。一些文献报道将Baf或CQ腹腔注射于小鼠体内，并在处死前30分钟进行检测。这种方法可以提高细胞内药物浓度并减少不必要的细胞死亡。但是，如果您的实验需要更长的时间来观察效应，可以根据您的具体实验条件和药物的性质选择合适的时间。对于体外实验，建议在细胞培养期间添加Baf或CQ，并允许药物与细胞进行足够的交互时间。

4 回答661 围观

问大家有没有好的医学影像学方面的书籍推荐一下

loveliufudan

《医学影像学》（第3版） - 主编：刘桂兰、郝均本书详细介绍了医学影像学的基本原理、检查方法以及各种影像学表现。包括X线、CT、MRI、超声和核医学等多种医学影像技术，涵盖了很多临床实用的知识。《实用放射诊断学》（第2版） - 主编：周仲贵、蔡守纲、杨克虎本书全面讲述了放射诊断学的基本理论、基本知识和应用技巧。适用于医学专业的学生和临床工作者。《实用医学影像学》 - 主编：吴杰明、金光勋这本书以实

3 回答689 围观

问细菌制备PID模型大鼠为什么会死亡率很高呀

loveliufudan

在制备PID模型的过程中，如果细菌多次进入大鼠体内，可能会导致严重的感染，从而导致大鼠死亡。此外，如果实验条件不足或不当，例如细菌的清洗、存储和使用不当，或者大鼠体内抵抗力减弱，也可能导致大鼠死亡。因此，制备PID模型时必须严格遵守安全操作规程，以保证大鼠的健康和实验的成功。

3 回答272 围观

问脂肪细胞诱导分化时IBMX和地塞米松的浓度可以改变吗？有没有大佬做诱导分化效果比较好，分化速度适中的配方，求求

土井挞克树

首先让细胞长满以后，接触抑制2天(是细胞退出生长周期)，加入含有IBMX(一般使用浓度0.5mmol/L)，DEX(地塞米松，一般使用浓度是 1umol/L)和insulin(胰岛素，一般使用浓度1-10ug/ml)的培基2天，再换成只含胰岛素的培基2天，然后每两天换液(普通培基)。这是分化的步骤，但是最关键的是细胞的传代次数，细胞传代次数较多，分化率很低。一般说不能超过20代，最好在10代以内

3 回答843 围观

问请问这几种蛋白有什么区别呢？

loveliufudan

Recombinant Human TNF-α/TNFSF2：这是基本形式的重组人类TNF-α蛋白质，没有标签或特殊结构。Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)：这是人类TNF-α蛋白质的可溶性形式，呈现为三聚体结构。这种形式的TNF-α在生物活性方面可能与天然形式更接近，因为TNF-α在体内通常以三聚体形式存在。Recombinant Hu

3 回答509 围观

问请问有造出成功cums抑郁小鼠模型的大牛吗？？？

loveliufudan

为了提高模型的成功率，可以尝试以下方法：模型标准化：确保每次实验的实施方案一致，减少实验操作中的偏差。确保实验材料、动物来源和实验条件（例如温度、湿度、光照周期）保持一致。提高应激强度：在CUMS实验中，可以尝试增加应激刺激的强度或频率。例如，可以增加应激持续的天数、每天的应激次数或更频繁地更换应激刺激类型。同时，保持刺激类型的多样性，以避免动物适应特定刺激。合适的动物选择：选择合适的品系、性别和

2 回答892 围观

问明胶酶谱最后拿什么拍照呢

loveliufudan

在拍摄明胶酶谱（明胶酶切割后的凝胶）时，确实可以使用凝胶成像仪。通常凝胶成像仪分为紫外（UV）成像仪和白光（WL）成像仪两种。对于明胶酶谱，我们通常使用白光成像仪。在拍摄明胶酶谱时，凝胶成像仪可以提供均匀的背景光，从而获得更好的图像。成像仪通常配备专业相机和镜头，可以捕捉到高分辨率和高对比度的图像。如果您没有凝胶成像仪，也可以尝试以下方法来改善手机拍摄效果：使用白光背景：在拍摄时，将凝胶放置在一个

1 回答546 围观

问coip的对照IP样品也有比较弱的目的条带怎么办？

loveliufudan

Co-IP实验中，对照IP样品（通常为非免疫（IgG）对照或不添加抗体对照）出现较弱的目的条带可能是非特异性结合或背景信号。为减少这种非特异性结合并改善实验结果，请尝试以下方法：清洗和预处理：确保充分清洗细胞裂解液和磁珠，以减少非特异性蛋白结合。预先用含有BSA或无抗原同源蛋白的缓冲液处理磁珠，以阻止非特异性结合位点。使用高质量抗体：确保使用特异性高且经过验证的抗体。低质量抗体可能导致非特异性结合

2 回答832 围观

问trizol法怎么提取血中rna？

Dr_劉医生

以下是Trizol法提取血液RNA的步骤：提取血液细胞2. 加入0.2ml氯仿，振荡15s，静置2min。3. 4℃离心，12000g×15min，取上清。4. 加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10min。5. 4℃离心，12000g×10min，弃上清。6. 加入1ml 75%乙醇，轻轻洗涤沉淀。4℃，7500g×5min，弃上清。7. 晾干，加入适量的DEPC H2O溶解（6

3 回答4032 围观

问wb条带灰度值分析数据处理？

AnythingGoes

可以考虑，将CT组三次的结果求一个平均值，使用ct1、ct2、ct3分别除以这个平均值得到一组带有bar值的ct组数据

1 回答1104 围观

问师哥师姐们，求教有关鱼类注射问题

huarenqiang5

注射时突然注射器助力消失有落空感，然后回抽注射器没有血液，注射器自动回复至底部就说明成功。

3 回答542 围观

问神经原代细胞凋亡检测都有信号，为什么没有特异性？

晴空a

因为神经细胞的凋亡时有基因的选择性，所以无特异性。

2 回答467 围观

问细胞培养问题求助？？

AnythingGoes

大概率是黑胶虫污染，看培养基是否浑浊，如果浑浊可能是细菌污染

5 回答441 围观

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