实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问免疫细胞表面分子的连接结合和作用过程

土井挞克树

通过物理相互作用将细胞连接起来，这些相互作用既可用于信号通信，也可用于结构粘附。具体可参考文献：A physical wiring diagram for the human immune system

1 回答312 围观

问荧光免疫层析

土井挞克树

没有偶联成功，偶联成功的话在测试的时候就会有条带，不需要等太久。

1 回答580 围观

问生长曲线

loveliufudan

测绘肠道菌群的生长曲线通常使用的是菌落计数法（CFU）或者荧光定量PCR（qPCR）等方法，而不是常规的OD600测量法。这是因为肠道菌群包括很多种微生物，不同种类的细菌对光的散射和吸收能力不同，导致在OD600值上的差异很大，因此用OD600值测量肠道菌群的生长曲线会产生很大误差。如果您要进行肠道菌群的生长曲线测量，建议使用菌落计数法或者荧光定量PCR等方法。

3 回答1082 围观

问分析巨噬细胞的流式，必须低温吗？有替代方法吗

loveliufudan

一般而言，细胞的黏附能力会影响细胞染色后的流式细胞术分析结果。黏附能力较强的细胞在染色前可能需要额外的步骤来解除细胞的黏附，以免影响染色结果。对于巨噬细胞的流式细胞术分析，您可以尝试以下方法来减少黏附的影响：使用无血清培养基培养巨噬细胞，以减少黏附能力。采用不同的细胞解离液，例如含有EDTA的PBS溶液，以解除巨噬细胞的黏附。在染色前将细胞进行冷冻解冻，以减少黏附能力。在流式细胞术前将细胞处理成单

2 回答614 围观

问组织用戊二醛固定后还能做组化和免疫荧光吗？

土井挞克树

如果是研究细胞表面抗原或不稳定抗原固定后是不可以用的，其余的是可以固定的

4 回答690 围观

问RDP4

土井挞克树

可能你下载的版本与你设备不兼容，更换版本再下载

3 回答617 围观

问除了观察阴道栓外如何确定E14.5天小鼠？

土井挞克树

除了阴道栓还可以通过观察牙齿，E14.5天,小鼠牙胚进入帽状期,可见成釉器分化为内釉上皮、外釉上皮和星网状层,釉结结构明显

2 回答536 围观

问尼可刹米引起小鼠惊厥的原因是什么

土井挞克树

尼克刹米过量具有中枢兴奋作用，增强神经钠离子内流，提高中枢的兴奋性，所以可以引起惊厥。

3 回答10382 围观

问细胞培养液中蛋白提取

sswei

酚抽提法1 在液氮中将 1g 菌体研磨为粉末2 加入 6 ml 水饱和酚（buffer-saturated phenol）和 2 ml提取液（20mMTris-Cl, pH 7.5, 0.5% Triton X-100 (v/v), 0.5M EDTA, pH 7.5, pH 8.0,0.07% β－巯基乙醇, protease inhibitors）。3 在4度混合30分钟。4 12000 rm

3 回答451 围观

问果蝇中去泛素化酶L5是怎么通过限制Som的泛素化来正向调节Hh信号？

土井挞克树

L5可以通过与染色体中聚合成分结合限制Som泛素化

2 回答533 围观

问比较三组人群的身高、体重不能使用t检验？为啥盲审老师这么说

土井挞克树

两组采用t检验，多组采用方差分析，多组采用t检验会增加1类错误的发生率

3 回答1838 围观

问外泌出细胞的蛋白如何验证

loveliufudan

验证外泌出的蛋白质通常可以通过以下步骤进行：收集上清液：将真菌孢子培养在适当的培养基上，培养至一定时间后，收集上清液。上清液中可能包含孢子释放出的外泌物蛋白质。蛋白质提取：将收集的上清液进行蛋白质提取。通常可以使用酸性异丙醇沉淀法、超声波法、直接浸泡法等方法进行蛋白质提取。蛋白质分离：将提取的蛋白质进行分离。可以使用SDS-PAGE、2D-PAGE等电泳技术进行分离。免疫检测：使用Western

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问脂肪细胞诱导分化时IBMX和地塞米松的浓度可以改变吗？有没有大佬做诱导分化效果比较好，分化速度适中的配方，求求

土井挞克树

首先让细胞长满以后，接触抑制2天(是细胞退出生长周期)，加入含有IBMX(一般使用浓度0.5mmol/L)，DEX(地塞米松，一般使用浓度是 1umol/L)和insulin(胰岛素，一般使用浓度1-10ug/ml)的培基2天，再换成只含胰岛素的培基2天，然后每两天换液(普通培基)。这是分化的步骤，但是最关键的是细胞的传代次数，细胞传代次数较多，分化率很低。一般说不能超过20代，最好在10代以内

3 回答807 围观

问coip的对照IP样品也有比较弱的目的条带怎么办？

loveliufudan

Co-IP实验中，对照IP样品（通常为非免疫（IgG）对照或不添加抗体对照）出现较弱的目的条带可能是非特异性结合或背景信号。为减少这种非特异性结合并改善实验结果，请尝试以下方法：清洗和预处理：确保充分清洗细胞裂解液和磁珠，以减少非特异性蛋白结合。预先用含有BSA或无抗原同源蛋白的缓冲液处理磁珠，以阻止非特异性结合位点。使用高质量抗体：确保使用特异性高且经过验证的抗体。低质量抗体可能导致非特异性结合

2 回答807 围观

问trizol法怎么提取血中rna？

Dr_劉医生

以下是Trizol法提取血液RNA的步骤：提取血液细胞2. 加入0.2ml氯仿，振荡15s，静置2min。3. 4℃离心，12000g×15min，取上清。4. 加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10min。5. 4℃离心，12000g×10min，弃上清。6. 加入1ml 75%乙醇，轻轻洗涤沉淀。4℃，7500g×5min，弃上清。7. 晾干，加入适量的DEPC H2O溶解（6

3 回答3939 围观

问wb条带灰度值分析数据处理？

AnythingGoes

可以考虑，将CT组三次的结果求一个平均值，使用ct1、ct2、ct3分别除以这个平均值得到一组带有bar值的ct组数据

1 回答1074 围观

问各位大佬们，能帮忙看看是什么原因吗？是不是转膜时间长了？本来有两个条带，现在也只出来了一条

相似又互补

你可以选择400ma转60分钟的

2 回答267 围观

问师哥师姐们，求教有关鱼类注射问题

huarenqiang5

注射时突然注射器助力消失有落空感，然后回抽注射器没有血液，注射器自动回复至底部就说明成功。

3 回答530 围观

问细胞培养问题求助？？

AnythingGoes

大概率是黑胶虫污染，看培养基是否浑浊，如果浑浊可能是细菌污染

5 回答434 围观

问关于配置20%乌拉坦

秦了了

这个20%得看是w/w还是w/v。如果是w/v就用20g溶于100ml水，若是w/w则是25g/125g溶液。

4 回答10482 围观

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