实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问96孔板换液后孔边缘细胞被吹掉了怎么回事？突然就发生了这种情况，之前从来不会这样子，求助？

18012482706xf

可能是弃液的时候枪头吸力导致的，可以采用直接甩或拍打的方式弃液

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问提取干细胞过程中什么原因会导致细胞没有了

安德罗妮丶UO6A

对酶消法的酶浓度把握不准建议用组织块贴壁法

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问请问hepg2细胞正常形态应该是什么样的，我的细胞传完代就变成这样了

都一幅画股份

你喜欢就喜欢你你喜欢就吵架坚持呢警察呢你吃技能加纯牛奶进行一呢想你喜欢你你喜欢你n x j就喜欢接电话接电话吗觉得很难拿出吃奶每次见面

1 回答172 围观

问求问在WB实验中，蛋白分子量有57kDa，73kDa，42kDa，25kDa,13kDa，转膜时各分子量蛋白时间如何控制？

科研实验ing

有需要外包的+v ZKSK567

2 回答208 围观

问求助！同源重组构建质粒连不上，求助各位大佬帮忙分析改进一下！！！

dxy_mr5l599

1、确定一下同源重组酶要求的最小同源重组碱基数是否符合要求2、确定一下同源重组部位的退火温度是否高于同源重组时所需要的温度3、确定酶切的载体片段大小是否正确，以及最好需要单独把载体片段回收（使用NEB重组酶时，此酶还具有连接酶功能）4、确定目的片段大小是否正确5、根据说明书要求的比例使用相应量的载体和目的片段6、同源重组后尽量短时间内进行转化，避免同源重组产物反复冻融7、检查抗性基因与平板的抗生素

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问THP1慢病毒感染细胞总是贴壁分化

dxy_giwowhk7

同学，你现在这个问题解决了吗？怎么解决的啊？我现在也遇到了这个问题，好头疼啊

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问重组质粒测序成功，但是表达蛋白条带只有载体大小

dxy_20f4mou5

请问知道什么原因了嘛，我的也是这样，但是通用引物测序是连上了的

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问比浊记数法OD值是什么？

dxy_s1v2ced7

“比浊计数法的OD值，是通过检测菌悬液对光的吸收/散射，反映微生物浓度~ 这类检测常用光电比浊仪，其核心的光电倍增管（PMT）负责把光信号转化、放大，像滨松的PMT，在低光强下也能精准捕捉信号，让OD值检测更稳定。要是你在实验里遇到光信号弱、检测不准的情况，滨松PMT的高灵敏度、低噪声特性，或许能帮上忙，欢迎聊聊你的具体需求呀～”

1 回答216 围观

问WB检测膜蛋白无条带？

科研实验ing

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问为什么血球计数板在光学显微镜下这么不明显有什么好的办法么

dxy_s1v2ced7

“血球计数板显影不清，除了调节物镜、滤光片，光电探测组件的性能也关键！比如显微镜成像系统里，光电倍增管（PMT）负责把光信号转化、放大，像滨松PMT，低光环境下也能精准捕捉微弱信号，让网格、细胞轮廓更清晰～要是你在显微计数时总被‘看不清’困扰，或者想升级设备光电探测能力，滨松PMT的高灵敏度特性，说不定能解决问题，欢迎聊聊你的实验细节呀～”

6 回答2655 围观

问求助怎么看HE染色炎性浸润

静心观照

HE 染色，即苏木精一伊红染色法，苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 HE 染色后是可以观察炎症细胞及其他细胞的存在情况，因为炎症细胞有自身的特点，通常细胞核较大，核质比大， H & E 染色后，细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。因

7 回答46120 围观

问天狼星红染色和massion染色的区别是什么？在用途上

dxy_sjt7bpgr

一、染色原理与显色效果天狼星红染色原理：天狼星红是一种强酸性染料，通过静电作用与胶原纤维中的碱性基团（如赖氨酸、羟脯氨酸）结合。染色后，胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色，细胞核通常用苏木素复染呈蓝色715。显色特点：在偏光显微镜下，胶原纤维可呈现双折光现象（Ⅰ型胶原呈黄色或红色，Ⅲ型胶原呈绿色），从而区分胶原类型1015。Masson三色染色原理：通过多种染料组合（如酸性品红、苯胺蓝）对不同组织成分进

12 回答51133 围观

问被盛有完全弗式佐剂的注射器扎出血了有影响吗？需要做什么处理

小白在行动

我朋友（女，已婚，35）被扎了，简单挤了一下，没做别的处理。被扎部分一直轻微疼痛，两周后手指碰到粘合剂（某种胶），逐渐出点掉皮，瘙痒，红肿，疼痛现象。看过外科和皮肤科，只给了药膏涂抹处理，只能缓解疼痛，现在一个月了，还没好。请问各位老师有好的处理方式么，或者挂哪个科室较合适。

4 回答484 围观

问自己做CRISPR-Cas9的话是不是很困难？

sswei

做CRISPR-Cas9学校没只能外包，敲除一个基因对有这技术的公司不是个难题。

5 回答519 围观

问WB上样量从18-60ug内参都非常浅（中性粒细胞）？

bamboopiggy

感觉还是你中性粒细胞裂解不够的问题，你增大一下裂解液的体积看看，尽量减少沉淀，然后再做wb

4 回答381 围观

问［求助］电转化感受态细胞的制备

dxy_2m9ohu3

你好，请问你后面解决电转的问题了吗？

5 回答1883 围观

问S1-PFGE 哪位大神可以告诉我是什么原因导致条带这个样子吗？

无所不至

我现在做实验也是marker有条带，S1酶切没有条带

4 回答461 围观

问WB的上样质量一般是多少

Gx41

30-60ug，根据目标蛋白量调节

13 回答13450 围观

问以质粒为模板的pcr克隆线性化载体pcr不出来怎么办

天一湖医者

如果你以质粒为模版扩pcr,然后跑胶时还能看到质粒的条带，那说明你的模版量太大了。降低模版量至最多20ng应该可以了，一般我实验中都用1－10ng就够了，而且这还是50ul体系，如果你的体系更小，我想最多1ng就够了

4 回答5345 围观

问慢病毒感染THP-1后，细胞贴壁严重

dxy_giwowhk7

同学您好，我想问问你们现在这个问题解决了嘛？怎么解决的呀？我们现在也出现了这个问题？THP1一感染慢病毒就贴壁

4 回答2355 围观

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