实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问热痛测痛

loveliufudan

热板测痛是一种常用的疼痛敏感性测量方法，但确实存在一些可变性和技术挑战。对于热板测痛的数据分析，可以考虑以下两种方法：1. 重复测量分析：对于每个被试者，进行多次测量，比如三次，然后计算这三次测量的平均值。接下来，可以使用方差分析（ANOVA）来比较不同组别（例如治疗组和对照组）之间的平均值差异是否具有统计学意义。这种方法考虑了重复测量的可变性，并将多次测量纳入统计分析中。2. 单次测量分析：另一

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问皮下局部积液的体积测量

loveliufudan

测量大鼠皮下局部积液的体积可以使用一些常见的方法，以下是几种常用的测量方法：1. 针筒抽吸法：使用一根细长的针和注射器，将积液抽吸出来，并将其注入已知体积的容器中，例如计量瓶。通过测量注射器中液体的体积差异，即可得到积液的体积。2. 位移法：将一个已知体积的容器（例如注射器）部分浸入积液中，使积液进入容器内，然后通过测量容器内液体的体积变化，即可得到积液的体积。3. 直接测量法：在动物解剖时，可以

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问2型糖尿病和肠道菌群

huarenqiang5

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问斯皮尔曼分析

huarenqiang5

这个一般还是需要做宏基因组而得到。

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问有玩转铁死亡的高手吗？

loveliufudan

虽然细胞发生铁死亡时铁代谢异常，但SIC7a11的表达下调并不是一定发生的情况。实际上，SIC7a11的表达可能会受到多种因素的调节，包括细胞类型、环境条件、氧化应激等。在某些情况下，细胞发生铁死亡可能导致SIC7a11的下调，因为氧化应激和细胞损伤可能干扰细胞的正常代谢和转运过程。然而，并非所有情况下都会发生这种下调。因此，无法简单地确定在细胞发生铁死亡时SIC7a11的表达是否一定下调。具体情

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问高糖诱导细胞损伤，如何设置等渗对照组

loveliufudan

确定甘露醇添加量的一种常用方法是根据渗透压平衡原理来计算。在这种情况下，你希望甘露醇与高糖组具有相同的渗透压，以便能够作为等渗对照组。渗透压可以通过浓度来近似计算，使用Van't Hoff公式：渗透压 = 浓度 × 体积 × 摩尔折射系数（常数）。具体计算甘露醇添加量的步骤如下：1. 确定高糖组的浓度，如35 mM。2. 找到甘露醇的摩尔折射系数。可以在相关文献、化学手册或实验室常用的数据库中查找

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问请问有用bEnd.3做过Transwell小室跨膜电阻（TEER）的吗

loveliufudan

以下是一些可能导致你的实验中电阻值不上升的因素和处理建议：细胞状态和成熟度：bEnd.3细胞需要达到一定的成熟程度才能形成功能完整的BBB模型。确保细胞达到适当的分化状态和成熟度，可能需要进行更长时间的培养或使用特定的培养条件和培养基。细胞-基质相互作用：细胞与PET膜表面的相互作用可能影响TEER测量。确保细胞与PET膜表面有良好的附着和相互作用，可以尝试预涂层PET膜，如使用胶原蛋白或胶原蛋白

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问LPS刺激THP-1

土井挞克树

可以直接用lps刺激thp-1，成功后看多肽的抑炎效果

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问我只上了两个maker，这其他的是咋来的啊

汤姆卜丽波

拔梳子的时候可能太用力了，你的胶孔在漏

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问请问怎么计算混合菌落的数量呢？

相信光的人

1、菌落总数的计算方法若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d 式中： N —样品中菌落数 ΣC —平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和 n1 —第一稀释度（低稀释倍数）平板个数 n2 —第二

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问细胞传代1天，请问这种现象是什么？

相信光的人

可能是细胞碎片或者杂质，密切观察活动度，以鉴别。

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问组织透明化方案很多，如何选择

汤姆卜丽波

组织透明化方法主要分为三类：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型，需要快速出结果一般选有机

3 回答1134 围观

问PBS冻存组织可以做PCR吗？

汤姆卜丽波

可以啊，一般-80不会降解的。

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问请问怎么在体外模拟运动环境？

dxy_sqe104z1

1. 利用微流控技术：可以通过微流控芯片将细胞置于微型通道中，控制液流并模拟不同的环境，如流速、化学梯度等，以模拟细胞在体内的运动环境。2. 利用微球技术：可以利用特定直径的微球，如聚苯乙烯微球，制作不同大小的孔洞，与细胞表面的黏附分子相互作用，模拟细胞在组织中的二维运动。3. 利用组织工程技术：可以制作三维的组织工程支架，在其中培养细胞，模拟细胞在组织内的运动情况。4. 利用生物印迹技术：可以通

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问第一次复苏细胞这种培养液咋计算配置？

z流沙z

主要是MEM和10%FBS，其他试剂要看购买的储存液浓度，基本上是采用1%来配制使用，最后加MEM到100%

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问小鼠组织样本做荧光定量pcr可以用人源引物吗？

loveliufudan

对于小鼠组织样本进行荧光定量PCR（qPCR），一般情况下不推荐直接使用人源引物。这是因为小鼠和人之间存在基因序列的差异，包括引物结合位点的差异，这可能会导致PCR的特异性和准确性受到影响。为了进行准确的荧光定量PCR分析，最好设计针对小鼠基因的特异引物。可以通过以下几种方式获得适用于小鼠的引物：文献研究：查阅相关文献，寻找已经经过验证适用于小鼠的引物。许多研究人员已经开发了广泛使用的小鼠引物，这

9 回答1387 围观

问DNA环化后连接液为什么要经过回收后再进行PCR反应

沫子大大

可能会残留一些未被连接的接头，缓冲液和酶等物质。这些会影响pcr产物质量和数量。

7 回答761 围观

问细胞污染了吗，请问是什么污染

z流沙z

这个不是污染，就是一些衰老或者死亡的细胞，变圆了

5 回答263 围观

问含有目的基因的质粒转入大肠杆菌感受态后涂平板，培养12个小时不长，24小时才长，菌落少且小为什么？

憨欢仔

原因可能是：质粒过大？平板不新鲜？平板抗生素浓度高？建议老师：1. 可以挑取菌落，同时划线培养，做个菌落PCR反应，跑胶看是否有目的条带；2. PCR有目的条带的话，提取质粒，进行酶切鉴定，跑胶看目的条带是否和预期一样；3. 上面都没问题后，测序看目的基因序列；4. 没问题后，大提质粒，保存。

9 回答8700 围观

问最近要用EGFR抑制剂，大鼠足细胞，体外实验，EGFR有好多抑制剂，请问大家应该怎么选?

是TTT

科研用途的EGFR抑制剂有BIBX1382，ic50为3nm，效果较好，许多文献中用了它。

5 回答347 围观

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