实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问请教一下大神，最近在养MLE-12细胞，目前传代用的是完全培养基含有2%FBS。准备用LPS干

土井挞克树

建议添加少量血清，可以中和ph提高营养。

3 回答425 围观

问请问C3H10T1/2小鼠间充质干细胞成骨诱导的茜素红染色这样算成功了嘛？

土井挞克树

是钙结节，但是你染色时间太长了，建议减少染色时间

1 回答438 围观

问为什么软琼脂克隆形成实验的0.3%上层胶融化了

土井挞克树

考虑是上层胶浓度太低了，建议提高上层胶浓度

2 回答862 围观

问显微镜下细胞污染的东西能看清楚结构吗？细胞培养基开封后能保存多久？。

汤姆卜丽波

高倍镜下其实还是可以看到的，培养基开封了之后分装保存能用两三个月

4 回答335 围观

问请问如何构建突变体？

sswei

可采用CRISPR，T-DNA 插入，EMS 诱变等方法可以创造基因缺失突变体。

3 回答1642 围观

问Raw264.7细胞培养过程中很容易分化，该如何解决？

认真搞科研的小王

1.控制细胞密度2.添加抑制分化的试剂3.优化培养条件，如温度、二氧化碳、培养基等4.定期要定期观察细胞形态和生长状态，并记录下来，分析细胞生长规律

3 回答3079 围观

问霉菌污染和真菌污染长啥样啊，怎么区分呐？细菌污染很容易发现，支原体污染也好区分。

认真搞科研的小王

通过显微镜观察受污染的细胞培养物表面，然后根据形态特征来判断其为霉菌还是真菌污染。霉菌菌丝体呈分枝状，而真菌体则呈菌落形态，这些特征可以通过显微镜观察到。培养特征：将受到污染的培养物分别接种到富含糖和氮元素的基础培养基上，让其自然生长，在不同时间段内观察其生长情况。当在培养基上看到颜色深、松软且不透明的毛状结构出现时，则为霉菌污染；当在培养基上看到较为规则的单个或者类似球形的白色或透明菌落时，则为

4 回答465 围观

问细菌污染怎么救呀？不知道怎么就细菌污染了，不是很严重。

认真搞科研的小王

对于已经被细菌污染的细胞培养物，应该及时更换新的培养基，并进行均匀洒落抗生素等药物来杀死残留细菌。同时，观察细胞培养情况，确保培养物恢复正常。为了防止仍然存在污染，您还应该在进行进一步试验前对已经进行救援的细胞培养物进行验证或重新测定。

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问求助加细菌处理的细胞划痕实验操作流程

认真搞科研的小王

1.先培养细胞到合适的细胞密度（80%左右）2.培养细菌到有足够的菌数。3.将细菌菌株制备成适当浓度(106-108 CFU/mL)的菌液，在细胞培养皿上滴加一定的菌液（含菌量可根据个人需求调整）。4.细胞划痕：使用75％的酒精或70％的乙醇用棉球消毒细胞培养皿周围区域，然后使用细胞刮板在细胞层上沿着直线划出一个缺口（痕迹大小可根据个人需求调整）5.检查细胞和菌液：将培养皿放回CO2孵化器中，观察

3 回答994 围观

问染色过后，要将培养皿放入37℃培养箱，但为什么不能放到37℃ CO₂培养箱，可能有什么影响？

认真搞科研的小王

因为二氧化碳培养箱中的高浓度二氧化碳可能会对已染色的样品产生不利影响。高浓度二氧化碳可以导致pH下降，这可能会影响某些细胞的生长和代谢，进而导致细胞死亡。此外，高浓度的二氧化碳也可能会与染料相互作用，导致染色结果的改变。因此，将染色后的培养皿放入普通的37℃培养箱中是更为合适的选择，因为普通的培养箱通常提供较低的二氧化碳浓度和稳定的pH值，这有助于保持样品的稳定状态，最大限度地提高生长效率。只有具

3 回答1099 围观

问菌污染牛奶相关问题

认真搞科研的小王

牛奶中菌的灵敏度检测和回收率实验是两个不同的测试，用于评估不同方面的细菌分析质量。灵敏度检测可以确定试验方法对目标菌株的检测能力，并且通常是在对比不同菌株检测方法的灵敏度时进行的。如果您想确认您的检测方法对该菌株的敏感性，请进行灵敏度检测。而回收率实验通常是在检查您的样本制备和处理技术是否良好时使用的。这种方法可用于确定您的样品处理是否会影响细菌的数量和生长状态。如果您想确认您的样品制备和处理技术

3 回答312 围观

问H₂O₂诱导衰老时，除了设置空白对照以外，还可以怎样设计实验支持衰老现象是 H₂O₂引起的？

loveliufudan

在研究衰老过程中，除了设置空白对照组外，还可以采取以下实验设计来支持衰老现象与H2O2引起的关联：1. H2O2处理组：将细胞或生物体暴露于适当浓度的H2O2处理，以模拟衰老过程中氧化应激的作用。可以在不同时间点或浓度下进行处理，以观察细胞或生物体的衰老现象，如细胞增殖能力下降、DNA损伤、细胞周期改变等。2. 抗氧化剂处理组：在H2O2处理组中加入抗氧化剂，如N-乙酰半胱氨酸（NAC）、谷胱甘肽

3 回答1060 围观

问冻存的肿瘤还可以做流式么

loveliufudan

是的，您可以使用冻存的肿瘤样本进行流式细胞分型的检测。冻存样本在一定条件下可以保存细胞的完整性和免疫表型。以下是一些建议：1. 解冻肿瘤样本：从冻存状态中快速解冻样本，最好在37°C的水浴中进行。避免反复冻融，因为这可能会对细胞造成不利影响。2. 细胞检查：解冻后，检查样本中的细胞完整性。使用显微镜观察细胞的形态，并确保细胞没有明显的损伤或破坏。如果细胞完整性不好，可能需要考虑其他方法或使用新鲜的

7 回答2273 围观

问合理吗？原理和流程都懂，Co-IP做不出来！

是TTT

用好一点的琼脂糖珠子，用ip级的抗体，孵育在4℃，如果这三点都做到了，还做不出来，估计是相互作用是瞬时的，太快了导致co-ip捕捉不到，此时需要换别的手段检测，例如邻位连接

4 回答1066 围观

问LPS刺激raw炎症模型

是TTT

结合阳性药的结果看，考虑没刺激起来的可能性更大，lps刺激时间可以延长到8小时以上，同时多肽浓度也可以降低一些

5 回答2213 围观

问核酸检测前吃糖对结果有影响吗？

是TTT

吃糖对核酸检测是没有什么影响的

8 回答351 围观

问核酸检测试剂常温保存时间是多少？

是TTT

未拆封前是18个月，但是如果天气较热，超过了30℃，保质期会缩短

7 回答2166 围观

问按微生物学控制原理分类的实验动物有哪些？

是TTT

按微生物学控制原理分类的实验动物有无菌、清洁、普通动物三类

9 回答884 围观

问请问从公司买的抗体是不是就不用再透析了

z流沙z

不需要透析了，是可以直接使用的

8 回答464 围观

问southern blot

是TTT

增加上样量、增加探针浓度、如果这两者增加了依然没有条带，那就要换一种探针试试

6 回答758 围观

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