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实验问答

23,112,582 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问重叠延伸pcr

loveliufudan

有几个可能导致浓度低的原因和解决办法：1. 模板浓度问题：你在第一步PCR中使用三个片段以相等的摩尔比例作为模板，但没有加入引物。由于没有引物的引导，可能只有部分模板成功扩增。这可能导致模板浓度较低，从而影响下一步PCR的效果。解决办法是在第一步PCR中添加引物，使得每个片段都能够扩增。2. 引物选择和浓度问题：你在第二步PCR中添加了上下游引物，但提到引物含有酶切位点，同时Tm值较高。高Tm值的

2 回答2204 围观

问请教一下大神，最近在养MLE-12细胞，目前传代用的是完全培养基含有2%FBS。准备用LPS干

土井挞克树

建议添加少量血清，可以中和ph提高营养。

3 回答434 围观

问求解～阴性对照组细胞死亡

土井挞克树

可以考虑降低阴性组的细胞密度，考虑是细胞密度太大了

2 回答479 围观

问提取脐带血cd34细胞

土井挞克树

可以用红细胞裂解液把红细胞裂解掉，然后再离心去除

2 回答632 围观

问请问C3H10T1/2小鼠间充质干细胞成骨诱导的茜素红染色这样算成功了嘛？

土井挞克树

是钙结节，但是你染色时间太长了，建议减少染色时间

1 回答458 围观

问求助：TGF-β1刺激巨噬细胞RAW264.7有效浓度

土井挞克树

文献的浓度是参考浓度，建议你提高浓度直到测出阳性

2 回答625 围观

问血细胞形态分析仪与人工镜检的一致性分析

loveliufudan

2 回答448 围观

问请教大神，流式细胞出现相反结果

loveliufudan

以下是可能导致此结果的一些原因：1. 技术问题：在进行流式细胞术时，可能存在实验技术方面的问题。例如，细胞处理、染色、孵育或流式仪设置等方面可能存在误差或操作问题。建议仔细检查实验操作和流程，确保每个步骤都得到正确执行。2. 细胞反应和补偿：敲低目标分子的siRNA可能会导致细胞产生反应或补偿机制。细胞可能通过增加目标分子的表达或激活相关信号通路来对siRNA引起的抑制做出反应。这种反应可能导致目

2 回答611 围观

问为什么软琼脂克隆形成实验的0.3%上层胶融化了

土井挞克树

考虑是上层胶浓度太低了，建议提高上层胶浓度

2 回答886 围观

问镇痛实验动物性别如何选择

loveliufudan

在进行镇痛实验时，动物性别的选择可能会受到多种因素的影响。以下是一些常见的考虑因素：1. 生理差异：雌性和雄性动物在生理上可能存在差异，包括激素水平、免疫系统响应等。这些差异可能会对实验结果产生影响。因此，根据你的研究目的，你可能需要考虑这些生理差异，并选择合适的性别来控制潜在的干扰因素。2. 雌性动物的周期变化：对于某些类型的实验，特别是涉及到激素敏感性的实验，比如疼痛敏感性的研究，雌性动物的生

3 回答1603 围观

问怎样检测受体活性

loveliufudan

确定受体活性的最优剂量通常需要进行一系列实验和测定。以下是一些常见的方法和实验设计，可用于评估受体活性并确定最佳剂量：1. 结合测定法（Binding Assays）： - 结合测定法可用于评估受体与其配体之间的亲和力和结合能力。常用的方法包括放射性配体结合测定（Radioligand Binding Assay）和荧光标记配体结合测定（Fluorescence-labeled Ligand

2 回答1257 围观

问求助，如何向小鼠血管壁注射药物

土井挞克树

可以使用微量注射器向血管壁注射药物

1 回答441 围观

问心肌缺血再灌注

loveliufudan

心肌缺血再灌注大鼠模型通常用于研究心肌缺血再灌注损伤和修复过程。在14天后进行组织染色是评估心肌缺血再灌注损伤的常见做法之一。以下是可能导致你的TTC染色结果不明显或失败的几个可能原因：1. 缺血再灌注模型未成功建立：缺血再灌注模型的成功与否可能是首要的原因。如果缺血再灌注过程没有正确实施或没有达到预期的缺血程度，可能导致心肌缺血再灌注损伤不明显，因此TTC染色结果可能看不到明显的色彩变化。2.

2 回答822 围观

问请问要做肝脏脂代谢基因表达测定，需要送多少肝脏样本？

loveliufudan

对于肝脏脂代谢基因表达测定，所需的肝脏样本量可以因研究目的、实验设计和所选的实验方法而有所不同。以下是一些一般的指导原则：1. 根据实验方法选择样本量：不同的实验方法可能需要不同的肝脏样本量。例如，如果你计划使用实时定量聚合酶链反应（qPCR）来测定特定脂代谢基因的表达水平，通常每个基因至少需要约100毫克的组织样本。但具体所需样本量可能因所选的基因数目、检测灵敏度和实验技术要求而有所变化。2.

2 回答365 围观

问创面感染呈绿色，除了绿脓杆菌，还可能是什么菌？

loveliufudan

除了绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa），还有几种细菌可能导致创面感染并呈现翠绿色：1. 嗜酸乳杆菌（Streptococcus pyogenes）：有时可以引起翠绿色的脓液。2. 嗜麦芽芽孢杆菌（Bacillus cereus）：这种细菌可以引起多种创伤感染，有时导致绿色分泌物。3. 肠杆菌属细菌（Escherichia coli）：某些株型的大肠杆菌可能会引起创面感染，并产

2 回答490 围观

问H₂O₂诱导衰老时，除了设置空白对照以外，还可以怎样设计实验支持衰老现象是 H₂O₂引起的？

loveliufudan

在研究衰老过程中，除了设置空白对照组外，还可以采取以下实验设计来支持衰老现象与H2O2引起的关联：1. H2O2处理组：将细胞或生物体暴露于适当浓度的H2O2处理，以模拟衰老过程中氧化应激的作用。可以在不同时间点或浓度下进行处理，以观察细胞或生物体的衰老现象，如细胞增殖能力下降、DNA损伤、细胞周期改变等。2. 抗氧化剂处理组：在H2O2处理组中加入抗氧化剂，如N-乙酰半胱氨酸（NAC）、谷胱甘肽

3 回答1106 围观

问如果用小鼠的不同组织进行切片和X-gal染色，观察到的蓝色细胞一定是衰老细胞吗？为什么？

sswei

常常检测SA-β-gal的活性将衰老的细胞和处于分裂静息期或者是终末分化状态的细胞区分开来，是目前应用最为广泛的细胞衰老的标志物之一。SA-β-gal检测方法主要分为细胞化学染色法和荧光法，人为给予β-gal作用底物X-gal和pH6的环境，衰老细胞可以在β-gal的作用下，将底物转变为深蓝色，使得发生衰老的细胞在普通光学显微镜下即可观察到。这种方法也具有一定的局限性。首先，SA-β-gal在正常

4 回答1350 围观

问降解酶的选择该怎么进行实验

loveliufudan

设计一个实验方案来比较不同种类和酶活的酶对同一底物的降解效率是可行的。下面是一个可能的实验设计：1. 选择底物：确定您要测试的底物，这是酶反应的目标物质。确保底物选择合适，能够被待测试酶降解，并且可以在实验条件下进行检测。2. 选择酶：选择一组具有不同种类和酶活的酶。可以通过文献调研或者专业知识来选择这些酶。确保这些酶能够催化底物的降解，并且在实验条件下稳定活性。3. 设计酶反应实验：为每个酶准备

3 回答621 围观

问冻存的肿瘤还可以做流式么

loveliufudan

是的，您可以使用冻存的肿瘤样本进行流式细胞分型的检测。冻存样本在一定条件下可以保存细胞的完整性和免疫表型。以下是一些建议：1. 解冻肿瘤样本：从冻存状态中快速解冻样本，最好在37°C的水浴中进行。避免反复冻融，因为这可能会对细胞造成不利影响。2. 细胞检查：解冻后，检查样本中的细胞完整性。使用显微镜观察细胞的形态，并确保细胞没有明显的损伤或破坏。如果细胞完整性不好，可能需要考虑其他方法或使用新鲜的

7 回答2330 围观

问SPR实验，蛋白相互作用

是TTT

含量比较多的话透析的话比较好，以免影响最终结果

3 回答1415 围观

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