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科研学霸天团,48小时有问必答
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预测靶蛋白的互作蛋白有哪些方法呢?除了打质谱
sswei
Co-IP,GST-Pull down和酵母双杂交是研究蛋白互做最常用的三种方法,一般常用酵母双杂交来筛选,用Co-IP和GST pull down用来验证。
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问
Ly2940022是抑制总pi3k还是p-pi3k呢
huarenqiang5
Ly2940022主要是抑制总pi3k。
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问
结晶条件
huarenqiang5
添加buffer是为了满足结晶的相应条件来完成结晶。
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问
抗菌肽 设计引物
loveliufudan
设计引物时,抗菌肽序列较短(约100 bp)可能会带来一些挑战,因为引物需要足够长以确保特异性和合适的扩增效率。以下是一些建议来设计适合短序列的引物: 1. 引物长度:通常,引物长度应在18到30个碱基对之间。尽量选择长一些的引物,以增加特异性和扩增效率。如果可能,考虑在目标序列的两端选择引物。 2. 引物特异性:确保引物与目标序列的特异性,避免与其他可能存在的相关序列发生非特异性扩增。可以使用引
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问
ATG8引物
loveliufudan
如果在NCBI(National Center for Biotechnology Information)的数据库中无法找到大鼠中ATG8基因的序列信息,那么直接使用大鼠中LC3-B的引物来检测ATG8的表达可能存在一些问题。这是因为LC3-B只是ATG8基因的一个亚型,而ATG8基因可能包含其他亚型或变体。在这种情况下,建议采取以下措施: 1. 更全面的搜索:尽可能尝试使用其他数据库或资源进行
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问
细胞污染危险动作⚠️
土井挞克树
会的,不要继续使用了,污染率非常高
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问
Jurkat细胞正常形态是什么样子的?
sswei
Jurkat细胞正常形态为圆润透亮,似鱼卵。镜下看细胞生长正常。
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问
大鼠主动脉取材WB
huarenqiang5
可以取大鼠腹主动脉做wb,通常用生理盐水进行灌注后进行取材,这样经过灌注后取材就不会影响wb做PI3K-AKT痛路。
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问
T淋巴细胞免疫
huarenqiang5
是的,求助,T细胞消灭一个靶细胞后需要再次被第一第二信号活化才可以继续消灭靶细胞。
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求助|质粒感受态转化不长菌落
dxyc42u
培养皿的材质有时候会影响长菌的
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问
杀伤实验96孔板选择
sswei
V形底某些特殊要求时使用,一般用于细胞杀伤实验,可使效靶细胞紧密接触。也可用U形板替代,加入细胞后,低速离心即可。
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问
CTNT胶体金全血加样跑不上去是什么原因?
sswei
被标记蛋白复溶液中添加的某种成分不合适。
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问
安装miRanda遇到的问题。
dxyc42u
重新下载安装包后再安装一次试试看
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问
Du145的p53是突变型还是野生型
dxyc42u
我也看了Du145的p53确实是突变型
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问
细胞中ROS是否可以释放到组织?
loveliufudan
细胞内的ROS可以在一定条件下释放到组织中。ROS是一类高度活跃的氧化剂,包括超氧阴离子(O2·-)、过氧化氢(H2O2)、羟基自由基(·OH)等。它们在细胞内参与许多生物过程,并且在一定程度上会被细胞内的抗氧化系统清除。当细胞内产生过多的ROS,超过了细胞的抗氧化能力时,ROS可能会逃逸到周围组织中。这可以通过细胞间连接的通道(如细胞间隙连接)或细胞外泌体等方式发生。 1. 细胞间连接:某些细胞
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问
FITC-葡聚糖膜通透性实验
huarenqiang5
两种方法都可以,我们一般FITC用全培溶解加到小室里溶解。
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问
BioGRID数据库中下载的蛋白互作数据可以直接判断它们的关系密切程度吗
dxyc42u
只能参考,无法直接判断,需要实验验证
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问
PCR产物跑胶显示条带大小远低于预测大小是什么情况
dxyc42u
引物特异性不好或者模板不纯都有可能
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问
pcr后跑胶,空白的有条带,但是是暗带,是被污染了吗?
dxyc42u
1) 引物设计不合理。扩增序列与非目的扩增序列有同源性,PCR也可以扩增出非靶序列的序列。(2) 看胶图:空白对照条带的大小是否与目的条带一样,空白对照条带的亮度是否与目的条带一样。若扩增产物条带大小与目的条带一致,说明有污染。更换新的Mix、水或引物重复实验。反应体系在超净工作台内配制,减少气溶胶污染。空白对照条带的亮度比目的条带弱:可通过降低循环数使实验组目的条带扩出,而空白对照扩不出目的条带
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问
原代上皮细胞漂浮聚集
dxyc42u
排查板子材质,有的牌子的板子养细胞细胞就是容易漂浮
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