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孵育后是否换液?学弱很急
feixue7758527w
一般预处理后就要把药物去掉的,就是把含药的液体吸掉,然后进行下一步处理的。
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问
细胞实验如MTT.WB.pcr 实验如何设置复孔?测几次?同一天测吗?组织中的染色实验,重复有没好建议
sswei
96孔板的实验,比如MTT,luciferase reporter等实验室,单次至少3个复孔,需要至少3次独立重复实验(肯定不是一天做的)。WB实验,收样的时候可以不用做复孔,分装蛋白的时候可以分几份跑胶,也可以就跑一次。但是结果至少重复3次(三批的样本)保证重现性。PCR实验,收样的时候不需要复孔,但是p的时候至少设置3个复孔,且至少3次独立重复实验,也就是说等收三批以上的RNA样本。
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问
这里的等量是指什么?等体积?还是等浓度。等质量?
feixue7758527w
之前描述已经说了,每次0.2ml,所以这里的等量就是等体积的,也就是0.2ml的。
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问
红色和绿色处什么意思?
feixue7758527w
我觉得这个可能尽量减少H2O的用量,因为标准是小于0.1的。你说的对的,每毫升里面加12.5mg该药品的。
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问
一般细胞冻存冻存液只用胎牛血清可以么
sswei
传统细胞冻存液是向培养基中加入保护剂,一般是10%二甲基亚砜(DMSO)和10%-90%的牛血清。
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问
怎样在显微镜下判断贴壁细胞生长状态的好坏
sswei
把培养瓶放入显微镜下观察,培养液中无杂质(可能是细胞死亡破裂)、细胞无悬浮或微量悬浮、细胞饱满透明.视野中贴壁细胞贴壁均匀.观察到这些就说明细胞生长很好了
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问
坐标郑州,跪求跪求食管癌TE13细胞!!!我这有KYSE30、KYSE70、Eca109、KYSE150、TE7可以换!球球了!
土井挞克树
我们实验室有,可以有偿提供TE13细胞
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问
请问一下,使用DMSO溶解的药物,在对培养的细胞进行处理时,选择怎样的阴性对照?
dxyc42u
追加两组阴性对照,细胞的这组+DMSO,还有细胞组什么也不加。
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问
求助各位看看这是贴壁的猪肠上皮细胞吗
dxyc42u
是猪上皮细胞,图中圆形的是还没贴壁的
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问
请问这样的条带怎么改进 是组织蛋白样品 条带没有聚集在一起 不知道怎么回事 园里有大神知道吗
土井挞克树
考虑是蛋白组织有降解或者杂质,纯化一下在做吧
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问
5-氟尿嘧啶的正常使用剂量是多少,应该如何搜索。谢谢大家。
dxyc42u
单药静脉注射剂量一般为按体重一日10~20mg/kg,连用5~10日,每疗程5~7克(甚至10克)。若为静脉滴注,通常按体表面积一日300~500mg/m2,连用3~5天,每次静脉滴注时间不得少于6~8小时;静脉滴注时可用输液泵连续给药维持24小时。
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问
图中所示的双层膜包裹的结构是自噬小体吗?
土井挞克树
是的,自噬小体是由双层膜将一小部分细胞质包围而成,其中被消化的物质是细胞质内含有的各种组成成分,如线粒体、内质网的碎片
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问
做ELISA 能不能用96孔细胞培养板?终止液加多加少影不影响最后读数?
dxyc42u
96孔板有点小,后续实验难度大
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问
有哪些数据库可以查到某个基因在不同癌细胞中的表达情况啊?想找找对应高表达的细胞系
sswei
CancerSEA是一个旨在单细胞水平上全面探索癌细胞的不同功能状态的多功能网站,涉及14个细胞功能状态,是25种癌症类型的900个癌症单细胞
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问
嘌呤霉素用紫外线照射后还可能用吗
dxyc42u
可以先做预实验看看还有效果吗,紫外线容易使其化学结构改变
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问
鳞翅目昆虫抗氧化酶家族相关基因怎样筛选?
dxyc42u
首先你要分析已有的两个基因的同源性,并到Genebank等数据库中进行比对,确定两个基因是否具有保守结构域,如果有,你可以根据其保守结构域设计简并引物,到你的目的基因组中扩增新的基因片段。或者以两个已有基因的保守结构域为探针,采用杂交的方法(前提是你要有构建好的基因组文库)钓取含有同样保守结构域相关的基因。如果二者不具有保守结构域或者同源性不高,那么你的实验设计就不可行了。
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问
大鼠和小鼠的腹腔神经节解剖定位,如果一步步开腹寻找
dxyc42u
打开小鼠腹腔后在脊柱旁边寻找神经节
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问
引物上写novel_174-RT是什么意思呀?
dxyc42u
表明这个引物是用于特意性逆转录的
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问
1.如何去除杂交膜气泡? 2.杂交液中鲑鱼精的作用? 3.探针浓度有什么讲究? 若杂交液含探针十几微升,每个探针都要十几微吗
土井挞克树
1.杂交膜气泡如果已经产生,一般选用震荡的方式去除。2.杂交液中鲑鱼精可以起到封闭样品中非特异性片段的作用
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问
活死细胞染色
来一起探讨
可能是所使用的活死细胞染色剂的选择不对,也可能是荧光物质的浓度过大,还有可能是在样品处理过程中没有对其进行避光。
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