实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问请问线粒体JC-1染色绿色背景很高怎么办，因为染料有毒性，所以最后用的是完全培养基泡着细胞

sswei

首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液(1～5mg/ml)，储存于-20℃，用时以培养液稀释至10ug/ml终浓度。

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问钙黄绿素和碘化丙啶可以用来染细菌吗，怎么配浓度？

huarenqiang5

都可以用来染细菌，钙黄绿素染细菌建议浓度为5-10μM。

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问96孔测定 mic的疑问

huarenqiang5

可以按下面步骤操作: 将无菌棉签用生理盐水润湿后，直接取过夜培养皿上数个新鲜菌落，与适量无菌生理盐水混匀。然后，用标准比浊管或者浊度计校正菌液浓度至0.5麦氏单位（1~2×108CFU/mL）。最后，用试剂盒中的肉汤按照使用说明书要求的倍数稀释，混匀备用。菌液接种除空白对照外，其余的95孔加入制备好（用前要混匀）的菌液100µL空白对照孔中加入100µL无菌肉汤。盖好

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问帮忙看看细胞数量呀

麻黄连翘赤小豆

差不多有的，最好做个细胞计数，一般这样的细胞可以传代或者直接提取了

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问膜片钳实验求助

huarenqiang5

主要考虑是漏电流导致，建议把漏电先解决试试。

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问加了Polybrene的细胞培养基还可以当作普通的 Complete DMEM使用吗

sswei

polybrene一般使用浓度为2-10 μg/mL,但对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞等)毒性较大。

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问thp-1细胞的传代问题

sswei

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问细胞免疫荧光

dxyc42u

一次做四个片不算重复，可以通过统一调节增加对比情况

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问细胞实验药物溶解

loveliufudan

在构建细胞耐药株的过程中，如果你发现药物不溶于DMSO，可以考虑添加其他助溶剂来提高药物的溶解性。以下是几种常见的助溶剂，你可以尝试其中之一或它们的组合： 1. 甘露醇（Glycerol）：甘露醇是一种常用的助溶剂，可用于提高溶解性。它在适当浓度下添加到药物溶液中，有助于增加溶解度。 2. 乙二醇（Ethylene Glycol）：乙二醇也是一种常用的助溶剂，可以用于提高药物的溶解性。类似于甘露醇

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问流式数据分析

sswei

流式细胞检测结果根据不同图像的类型，看法不一样。1.直方图，横坐标代表荧光信号或散射光信号相对强度，纵坐标一般是相对细胞数。2.散点图，散点图是双变量图的，与直方图比较，其分析通量更高，因此能更好的观察到较小比例细胞群，横坐标和纵坐标都是光信号，点图上的每一个点可以代表某一个细胞的信息。3.密度图，密度图可以表示一个标记的表达水平，而且还可以显示出固定区域中事件的相对密度。可以分为密度图、斑马线图

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问甲状腺H&E切片求助

huarenqiang5

横切面呈蝶形或者马蹄形，基本左右对称，纵切面呈长梭形或长椭圆形，包膜光整，边界清晰，内部回声中等偏强，分布均匀，可见血管回声。切面视角在横切面视角可以比较清晰完整地观察甲状腺和结节，包括左右腺叶、峡部、气管和食管的位置关系以及颈动脉、颈静脉、胸锁乳头肌、带状肌结节的纵横比判断也是以横切面为主。还可以观察到喉返神经的位置关系做一个大致的方位判断；纵切面视角可以比较清

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问细胞长出了很多触手？

sswei

巨噬细胞长了伪足，这个细胞就不能用了，不是老化，是被激活了

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问膜片钳求助！！！

huarenqiang5

可能是软件出现问题了，建议联系公司工程师解决。

3 回答370 围观

问氧化成一个还原型？是否矛盾？

loveliufudan

在谷胱甘肽过氧化物酶系统中，两个分子的谷胱甘肽（GSH）通过形成连接半胱氨酸残基的二硫键被氧化成一分子还原型谷胱甘肽（GSSG）。这是因为氧化作用引起了GSH中两个半胱氨酸残基的氧化反应，从而形成了GSSG。换句话说，GSH分子中的两个半胱氨酸残基之间的二硫键被打破，生成了两个GSH分子中的一个GSSG分子。谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase）则催化了将GSSG还原回GSH

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问求助生理学概念，动作电位知识点

loveliufudan

在生理中，离子的电化学驱动力（electrochemical driving force）等于膜电位（membrane potential）减去离子的平衡电位（equilibrium potential）。这可以通过Nernst方程来解释。Nernst方程描述了离子通过细胞膜的平衡电位。对于一个特定的离子，Nernst方程可以表示为：E = (RT/zF) * ln([X]out/[X]in)其中

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问为什么全胚化学原位杂交阴性对照还有颜色信号

dxy_br5187n

正常情况下阴性对照是不能有颜色信号的。如果你做的全胚化学原位杂交实验阴性对照每次都有颜色信号的话，通常是由于探针或抗体滞留于胚胎体腔和体室以及杂交后漂洗的条件不够严格等。杂交预处理前，将胚胎在解剖镜下用细针在脑室、颈背部、颌面部和心室等处刺孔，以使反应后的探针或抗体不在这些部位滞留。并在漂洗时充分洗除。同时。杂交后使用RNA酶充分消化未杂交的标记RNA探针，提高杂交后漂洗的严格度，抗体反应后充分漂

3 回答650 围观

问前处理中加入MTBE是重点关注脂质吗？

huarenqiang5

加入MTBE提取样本时，提取溶剂会分为两相，一相中含有非极性代谢物（如脂质），另一相中包含极性代谢物。在任何一种两相溶剂提取方法中都会存在一个问题，就是一些跟基质有关的中等极性的代谢物将会被分别溶解入亲脂性溶剂和亲水性溶剂中，而在每一相中溶解的比例会受到基质组成的影响。举一个简单的离子说明以下，受试者空腹和餐后血液中的甘油三酯含量差异会很大，这种差异可能会使两亲性化合物从亲脂相溶剂转

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问鲁格试剂会杀死栅藻吗显微镜制片用鲁格试剂染栅藻藻液，荧光显微镜下看看不见

土井挞克树

大剂量高浓度的鲁格试剂会杀死栅藻的，可以降低浓度

3 回答1139 围观

问红色的是活藻黄色的是死藻吗（荧光显微镜下没染色判断死活）

土井挞克树

可以用颜色进行粗略判断，红色是活藻

3 回答663 围观

问过氧化氢样品提取可以用4℃丙酮代替磷酸缓冲液当提取液吗？

土井挞克树

不建议替代，丙酮性质不稳定效果也不好

3 回答277 围观

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