测定总抗坏血酸和还原型抗坏血酸需要做几个标准曲线，具体步骤怎么做呀。因为前段时间做标准曲线一直达不到想要的结果。求求大神解答

测定总抗坏血酸和还原型抗坏血酸的标准曲线通常需要制备多个标准品溶液，并通过不同浓度的标准品测定得到吸光度值。

测定总抗坏血酸和还原型抗坏血酸的标准曲线通常需要制备多个标准品溶液，并通过不同浓度的标准品测定得到吸光度值。以下是一般的步骤：

1. 准备标准品溶液：根据预期的浓度范围，制备一系列已知浓度的抗坏血酸标准品溶液。可以使用已知浓度的抗坏血酸标准溶液或通过稀释已知浓度的抗坏血酸溶液来制备。

2. 测定标准品溶液的吸光度：使用合适的分光光度计，在适当的波长下（通常是265 nm或其他适合的波长），测定每个标准品溶液的吸光度值。确保使用与测定样品时相同的条件。

3. 绘制标准曲线：将标准品溶液的浓度作为X轴，对应的吸光度值作为Y轴，绘制标准曲线。一般来说，浓度与吸光度之间应该呈线性关系。

4. 计算未知样品的浓度：测定未知样品的吸光度值，并使用标准曲线来计算其抗坏血酸浓度。

如果你之前的标准曲线结果没有达到预期，可能需要注意以下几点：

• 标准品的浓度范围是否适当：确保标准品的浓度范围涵盖了待测样品中抗坏血酸的浓度范围。

• 标准品的稳定性：检查标准品的储存条件和使用期限，确保标准品的稳定性和活性。

• 实验操作的准确性：注意实验操作的准确性，如标准品的准确稀释、吸光度测量的准确性等。

制作步骤：

1.制作标准曲线配制浓度为2mg/L,4mg/L,6mg/L,8mg/L,10mg/L,12mg/L,14mg/L的AsA系列标准液。取各浓度标准液1.0ml于试管中,加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀,再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4-乙醇、1.0ml 0.5%BP-乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3-乙醇,总体积5.0ml。将溶液置于30℃下反应90min,然后测定A534。以AsA浓度为横坐标,以A534为纵坐标绘制标准曲线,求出线性方程。

2.提取取植物叶片1.0g,按1∶5(W/V)加入5%TCA研磨,4000r/min离心10min,上清液供测定。

3. 测定 (1)AsA测定取1.0ml样品提取液于试管中,按上述相同的方法进行测定,并根据标准曲线计算AsA含量。