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抗坏血酸含量的测定
实验分类：
植物学实验
最新修订时间：
简介
抗坏血酸即维生素 C, 广泛存在于新鲜水果、蔬菜中，它是一种高活性物质，参与 很多新陈代谢活动。抗坏血酸是生物体内抗氧化体系成员之一，因此抗坏血酸含量可作为植 物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。通过本实验 掌握用分光光度计法测定植物抗坏血酸含量的方法。
原理
抗坏血酸含量的测定的基本原理是还原型抗坏血酸 (AsA) 可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯噂 (BP) 反应形成红色螯合物。此物质在 534 nm 波长的吸收值与 AsA 含量呈正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸 (DAsA) 可由二硫苏糖醇 (DTT) 还原成 AsA。测定 AsA 总量，从 中减去还原型 AsA, 即为 DAsA 含量。
来源：丁香实验团队
操作方法
1. 制作标准曲线配制浓度为2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列标准液。取各浓度标准液1.0ml于试管中，加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀，再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml 0.5%BP－乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3－乙醇，总体积5.0ml。将溶液置于30℃下反应90min，然后测定A
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