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        各位同仁,求助!

        相关实验:拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验

        user-title

        SsLucky

        最近在做光散射信号测定实验,zapA蛋白和ftsZ蛋白的,用了HMK缓冲液,扫描出来350nm处的荧光。

        问题1:荧光出自何处,蛋白本身还是HMK缓冲液?

        2:为什么我用荧光分光光度计测出来的值有好多个0单位为OPS,但是文献里面人家的值只有几百,是我单位设置错误了吗?

        非常感谢路过的朋友相助!

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        3 个回答

        user-title

        晓雨知春来

        有帮助

        可以在不含蛋自的HIMK缓冲液中进行扫描,以确定荧光的来源。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        问题1:荧光出自何处,蛋白本身还是HIMK缓冲液?

        • 荧光出自何处的确需要进一步确认。在光散射信号测定实验中,通常使用荧光探针来标记特定的分子或物质,以便观察其在特定波长处的荧光信号。因此,如果您使用了荧光探针来标记zapA蛋白和ftsZ蛋白,那么荧光很可能来自这些蛋白本身。然而,如果您没有使用荧光探针,那么荧光可能是来自HIMK缓冲液中的成分。您可以考虑进行对照实验,即在不含蛋白的HIMK缓冲液中进行扫描,以确定荧光的来源。

        问题2:为什么我用荧光分光光度计测出来的值有好多个0单位为OPS,但是文献里面人家的值只有几百,是我单位设置错误了吗?

        • 单位设置错误是可能的原因之一。OPS(Optical Density per Second)是荧光信号的测量单位,通常与样品中的荧光强度成正比。如果您测量到的值为0,可能是由于仪器设置或操作问题引起的。请确保您的仪器已正确校准,并在进行测量时选择正确的波长、积分时间和荧光通道。此外,还应确认是否对荧光信号进行了适当的稀释或调整,以确保在仪器的线性测量范围内。

        与文献中报道的值进行比较时,请注意不同实验条件、样品处理方法和荧光探针的差异可能导致结果的不同。确保您的实验条件与文献中的实验条件尽可能接近,以便更好地比较和解释结果。


        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑是缓冲液中的荧光,可以进行淬灭处理

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