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        求助,CFSE摸浓度染色人PBMC后怎么看结果选合适的浓度,怎么做峰图

        相关实验:原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

        user-title

        阿瞳tong

        CFSE用不通的浓度染色外周血PBMC后刺激培养5天,怎么看哪个浓度最合适呢?另外峰图是怎么做出来的呢?

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        3 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        CFSE是一种荧光染料,可以用于评估淋巴细胞增殖和分化。对于您的问题,您可以使用不同的CFSE浓度(通常在1-10μM之间)染色外周血PBMC,刺激培养5天,然后使用流式细胞术分析不同浓度CFSE染色的细胞增殖情况。您可以比较不同CFSE浓度下的峰图(即荧光强度与细胞数量之间的关系图),找到最适合的浓度。一般而言,如果染色浓度过高,会导致荧光信号饱和,而浓度过低则可能会影响细胞增殖的检测。

        峰图是通过流式细胞术获得的。流式细胞术是一种用于检测、分类和计数细胞的技术,通过检测细胞中荧光标记物的强度和频率,可以得到峰图。在CFSE染色实验中,荧光信号的强度与细胞增殖次数成反比,因此在峰图中,荧光信号的强度较弱的峰代表增殖次数较多的细胞,荧光信号较强的峰则代表增殖次数较少的细胞。峰图的分析可以用流式细胞仪或相关的数据分析软件进行。

        user-title

        sswei

        有帮助

        选择荧光强度最大者,可以作为CFSE 的终浓度

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        梯度刺激后人pbmc表达最高的浓度可以设为合适浓度

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