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        原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

        相关实验:原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

        最新修订时间:

        原理

        苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。

        材料与仪器

        步骤

        一、配制试剂:


        1. 苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;


        2. 甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;


        3. 甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;


        二、染色步骤:


        1. 用Hanks液漂洗盖玻片3次;


        2. 用甲醛钙固定液固定20min;


        3. 用蒸馏水漂洗盖玻片3次;


        4. 用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;


        5. 用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;


        6. 用70%乙醇漂洗盖片3次;


        7. 用甘油明胶封片后观察;


        三、结果:


        原代细胞含脂类的区域呈橘红色;

        注意事项

        在染色时,要保证时间防止染色不彻底,颜色不明显。

        来源:丁香实验

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