dxy_3arf99k6
求助,用了100ng/ml的pma刺激THP1细胞,只贴壁不分化,是什么原因呀,有没有可能我用dmso溶解pma的时候没有全部溶掉?pma好溶解吗?
sswei
只贴壁不生长,可能存在以下原因:1消化过度,2吹打太过.
bamboopiggy
首先确定你的PMA是好使的,然后细胞状态是好的,这两方面影响是最大的。
土井挞克树
可能有残留的pma,建议清除后再观察
loveliufudan
PMA是一种活化剂,可以通过激活PKC酶的活性来诱导细胞分化。如果使用了100 ng/mL的PMA刺激THP-1细胞,但是细胞没有发生分化,可能有以下几个原因:
PMA浓度不够:有时候细胞需要更高浓度的PMA才能诱导分化。您可以尝试增加PMA的浓度,例如200 ng/mL或更高。
刺激时间不够:刺激时间也可能是影响细胞分化的因素之一。您可以尝试增加刺激时间,例如24小时或更长时间。
细胞状态不对:THP-1细胞的分化状态可能会影响它们对PMA的响应。如果细胞处于过度分化或凋亡状态,则可能无法对PMA做出反应。您可以尝试使用新鲜的、处于对应生长阶段的细胞。
此外,PMA是不易溶解的,通常需要使用DMSO将其溶解。在使用PMA前,确保您的PMA在DMSO中完全溶解。您可以在稀释前用旋转器搅拌一段时间来确保完全溶解。如果PMA没有完全溶解,可能会导致PMA的浓度不准确,从而影响细胞分化。
另外,使用PMA时需要注意浓度和时间的选择,以及细胞状态的良好控制。如果以上方法无法解决问题,您可以进一步检查细胞状态,或考虑使用其他细胞系或活化剂。
huarenqiang5
考虑是不是贴壁时间不够?建议贴壁48小时。或者是不是用的无血清培养基?建议用带血清的培养基。
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