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        求助大鼠鞘内注射方法

        相关实验:大鼠主动脉内皮细胞培养实验

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        奋进man

        最近在做大鼠鞘内注射,经皮注射L5-L6,但是老找不到准确位置,针也进不去椎间隙,有人做过吗?求分享经验。

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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助
        • 可以参考下这篇文献,写的挺详细的图片描述
        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以做x线引导下穿刺,不然很难定位准确。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        鞘内注射- 注射步骤

        1、使用毛巾覆盖在小鼠头部和背部,露出髂嵴以下的腰部区域;用非惯用手的拇指和食指抓住鼠的髂骨(髋骨),手的顶部轻轻放在小鼠身体和头部上,使其保持平静。

        注:在髂骨上的握力应该足够强,以固定小鼠的腿部活动,并使腿部向外和向下伸展。

        2、使用惯用手食指从腰椎到骶部沿脊柱轻轻按压,同时使用非惯用手轻轻上拉小鼠,以打开椎节之间的空间,方便进针。

        3、将1 ¼”号针的斜面指向小鼠头部,然后将针以70°角插入脊柱中线的腰椎处,当感觉针碰到骨头时,将针的角度调整到30°夹角,并将针插入椎节之间。

        注:需多次尝试找到合适的进入点,针头进入脊柱后推针没有阻力,尾巴或后腿的反射性弹跳出现时,说明已正确入针。

        4、轻轻压下注射器的活塞,将5-10μL的AAV病毒悬液注射至蛛网膜下腔。

        注:注射时间控制在10-30s较好,速度太快会导致小鼠后腿抽筋,该现象会在60s内消失。

        5、注射后,将针180°旋转1-2次,然后将针从脊柱中取出。

        6、小鼠放回笼子观察,确认恢复正常运动功能。

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