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        【求助】求助caspase的检测方法

        丁香园论坛

        4207
        本人要研究巨核细胞的凋亡情况,检测caspase-3,8,9,初步判断其通过哪条凋亡通路起作用,有很多不懂之处,需要高人指点一下:
        1 如何检测caspase的活化
        2 若要检测caspase的量,应选择何种可靠简便的方法
        3 有专门的试剂盒可以用来检测caspase吗?
        非常感谢!!
        1. caspase活化会产生裂解条带,western blot可以检测。
        2. western blot可以半定量
        3. caspase的活性有试剂盒可以检测
        谢谢了,是不是一般caspase的检测都是用western blot? western步骤多,比较繁琐,是否有可能检测不到结果?
        caspase蛋白酶的活性检测方法,个人做过和了解的有这样几种:
        1. 荧光光度计/分光光度计法,比较简单,只要有荧光或普通酶标仪即可,操作过程类似与ELISA。试剂盒比较便宜,KeyGene公司有。

        2. 流式细胞法,只要有流式细胞仪,买来试剂盒按照说明操作即可,优点是可以同时检测多种caspase的活性。价格较贵。

        3. WB的方法,比较繁琐,通过半定量比较活化caspase蛋白(即裂解的小片段)的量判断活性强弱。

        选择哪种方法根据实验要求和条件,1或2同3的联合使用,应该最能说明问题。附件是流式法的一个说明书,个人见解仅供参考。
        那是否可以通过流式细胞仪来直接检测caspase的量呢?谢谢
        可以到偶的LAB做,

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        【求助】求助caspase的检测方法

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