星形孢菌素诱导293T细胞凋亡后检测
dxy_csamswa8
星形孢菌素诱导293T细胞凋亡后，用caspase3/p17p19能检测到，用cleaved caspase 3检测不出来，原因是什么？
3 个回答
秋秋欣欣
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cleaved caspase3的条带比较小，用高浓度的分离胶跑一下，加大一点蛋白量，看看
汤姆卜丽波
有帮助
转膜时间不要太长，选择0.22um的膜用来转膜，需要注意蛋白是否转过等，可以通过marker预染，保证滤纸上不要有蛋白。如果你的是湿转的话，100v转的话时间可以低点，1h到1.5h看看。一抗4度过夜就行了不要孵育太久，不然背景会加深的。看看说明书的抗体推荐稀释度。
bamboopiggy
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你还是用专门的凋亡试剂盒检测吧，wb，可能因为种种原因，你可能做不出来。
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