• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        先阳选磁珠分选CD4+T细胞后,下一步如何分选CD4+CD25-T细胞?

        相关实验:肿瘤干细胞的分离纯化

        user-title

        丁香实验

        最近试着开始培养细胞,首先就是磁珠分选CD4+CD25-T细胞。请问先阳选磁珠分选CD4+T细胞后,下一步如何分选CD4+CD25-T细胞?阳选?阴选?中间需要间隔多长时间,有没有可操作性?还是用抗体封闭CD4+CD25+T细胞?

        wx-share
        分享

        10 个回答

        user-title

        半两月光

        有帮助
        最近刚做了一次,我用的是美天旎的kit,先阴选CD4阳性细胞,再标CD25抗体,阴选出来的就是CD25阴性细胞,纯度还挺高的,一定要用它推荐的柱子,否则纯度不高
        user-title

        dxy_29k93ve4

        有帮助
        可以先MACS分选完了以后上流式分选
        user-title

        颜渊溪桥

        有帮助
        Biolegend公司有CD4阴选试剂盒,可以解决你这个问题。另外流式分选在多数情况下都可以很好分选想要的细胞群,但是需要多准备些细胞,分选后会死一些。
        user-title

        Timy最爱柠檬水

        有帮助
        优先分选CD25+细胞,从阴选细胞中再去分选CD4+细胞
        user-title

        莹啊免疫啊

        有帮助
        可以流式上机分选,用CD25抗体,流式分选前需要脱磁珠,可以多养两天再脱磁珠,不然细胞损耗太大,一般都跟着磁珠被分离掉了,而且细胞带磁珠的情况下最好不用太用力吹打细胞,会对细胞造成机械损伤。如果后续还需要杀伤之类,就得找好一个合适的培养时长。我一般两天
        user-title

        txs900416

        有帮助
        只能通过流式分选CD25-或者磁珠解离后分选了,或者通过CD25depletion抗体清除CD25阳性细胞。下次分Treg建议先阴选CD25-细胞再阳选CD4+
        user-title

        dxy_0mxazdaw

        有帮助
        首先利用Cd4抗体磁珠分选出CD4+细胞,然后再用CD25+的磁珠去分选细胞,把磁柱上的CD25+细胞丢弃,收集未标记的细胞
        user-title

        西柚味的芋圆

        有帮助
        美天旎公司有human CD4+CD25+ regulatory T cell isolation kit。里面的说明书非常详细,一般是先阴性分选CD4+T细胞,然后再阳性分选CD4+CD25+T细胞,另外的组分就是您所需要的CD4+CD25-T细胞。很多高水平杂志的文章都是用这个样的方法和分选策略,因为做Treg功能分析的时候同样需要用到CD4+CD25-T细胞,因此这个分选方法是有依据可循的。
        user-title

        CXCR3

        有帮助
        分选出来CD4+T细胞,可以标记流式抗体,利用流式分选仪分选CD25-的细胞。
        user-title

        peaceful13

        有帮助
        必须先解离CD4+细胞上面的磁珠,然后再用CD25+的磁珠去分选细胞,把分选出来的CD25+细胞丢弃,收集未被标记的细胞
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序