实验问答22,833,543 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问人脐静脉内皮细胞细胞培养问题。

土井挞克树

看着像是细菌污染，应该立即消毒杀菌

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问常见的胃癌细胞株的种类和区别

balalaLy

胃癌细胞株的分类主要包括以下几种：一、普通人胃癌细胞株，如NCI-N87、CRL-5822。二、低分化胃癌细胞株，如BGC-823、RPMI-1640。三、未分化人胃癌细胞株，如HGC-27等

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问求问各位大佬图中这种糊糊状的东西是什么原因造成的，图一是前两天拍的，图二今天细胞已经死掉了

蓝莓小布丁

有可能是细菌污染从而影响细胞的生存，建议细胞实验严格控制灭菌。

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问求问各位大佬显微镜下这种糊状的东西是什么污染啊，前两天图一已经感觉不对劲了，今天细胞死了，重新换液以后在显微镜下就如图二

huarenqiang5

这个考虑是支原体污染了，建议及时消毒处理。

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问GraphPad prism软件计算IC50数据处理问题

loveliufudan

GraphPad Prism是一款常用的统计分析软件，可以进行不同类型的数据拟合。在拟合曲线时，常用的方法包括不拟合、三参数、四参数和五参数拟合。下面是这些方法的简单介绍和使用场景：不拟合如果数据本身不需要拟合曲线，那么可以选择不进行拟合。例如，对于一些分类数据或者纯粹的描述性统计数据，可能不需要进行拟合。三参数拟合三参数拟合通常用于拟合带有截距的曲线数据，其方程形式为：Y = Bottom +

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问酿酒酵母菌得到OD600值后如何得到细菌浓度

huarenqiang5

OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。通过吸光值的定义可以知道，吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度。OD值越高说明发酵液中酵母菌的密度越大，测量细菌培养液在600nm出的吸光值，得到的OD600数值如果在0.6-0.8之间，表明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。

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问成骨分化诱导时，间充质细胞长满了可以传代么？

土井挞克树

可以重新稀释培养，这个时候传代有点太早，建议再培养一周

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问六孔板每孔密度传的不均匀会影响药物干预效果嘛？

土井挞克树

密度不均匀是会影响的，需要先统一密度再转移到孔板里面

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问热蛋白组学实验，用TMT标记的话，每个点大约需要裂解几百万细胞

土井挞克树

1ml是可以的，蛋白浓度不会太高。

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问0.1mol/l PH=7.0的磷酸缓冲液溶液怎么配置？

土井挞克树

甲液：NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。乙液：Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，Na2HPO4·12H2O：Mr=358.

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问小鼠模型不同组略微改动差别就不一样

dxy_x9agut5r

增加一下样本量，取平均值，这样能减少一下误差，最终实验结果就不会波动太大

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问体外培养间充质细胞这是什么细胞污染?

loveliufudan

可以考虑这是细菌污染。具体来说，可能是一些革兰氏阴性菌，如肠杆菌等。建议进行以下措施：进行培养液的无菌筛查：可以将培养液分别接种到无菌的富集培养基上（如LB富集培养基），并在适当的温度和时间下培养，观察是否有细菌生长。观察细胞形态：可以进行显微镜观察，观察细胞的形态是否发生了变化。细菌污染会导致细胞形态的改变，如细胞缩小、细胞形态不规则等。采取消除污染的措施：如果确认存在细菌污染，可以尝试使用消毒

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问求问从成年老鼠提取星形胶质细胞，时候，怎么去除神经元的。有没有不传代，直接分离纯化星形胶质细胞的方法，然后进行WB等测试的。万分

sswei

在没有酶促孵育的情况下，使用机械解离可以更好地得到星形胶质细胞。

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问TUNEL 法检测细胞凋亡需要做技术重复或是生物重复吗？

loveliufudan

TUNEL法检测细胞凋亡通常需要进行技术重复和生物重复来确保实验结果的可靠性。在进行重复时，建议同时进行技术重复和生物重复。技术重复意味着对同一样品进行多次实验，以评估实验方法和技术的可重复性。一般来说，至少应该进行三次技术重复来减小随机误差的影响。对于TUNEL法检测细胞凋亡，可以在同一样品的多个位置上进行技术重复，以确保结果的可靠性。生物重复意味着对不同样品进行实验，以评估实验结果的稳定性和可

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问准备做edu，荧光结果该怎么分析啊，

土井挞克树

可以通过edu荧光的表达来看细胞的增殖结果。

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问请问我的hepg2怎么和ATCC的不一样？

Luckybabygirl

其实如果都是梭形，没有差的特别多，是勉强说的过去的，因为细胞在每个人手里养出来的不一样，状态和代数都不一样，可能到后期形态就发生改变了，但如果你这是刚买回来不久，就变样子了，就得去咨询下公司了

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问免疫磁珠分选与其他分选技术（如流式细胞术）相比有何优缺点？

huarenqiang5

流式分选一般都是电荷式分选，即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷，液滴经过电极板，通过电场作用发生偏转，从而实现分选。磁珠分选首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞，然后把标记好的细胞过柱子，带磁珠的细胞就留在柱子上，不带磁珠的细胞就流走了，从而实现分选。不同点： 1、对细胞的刺激。磁珠分选最

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问检测疫苗免疫效果时，有文献会做淋巴细胞增殖实验，请问是用脾细胞做效果好还是用外周血的细胞效果好？

huarenqiang5

淋巴细胞增殖实验用外周血的细胞来做相对来说效果要好。

4 回答395 围观

问原代细胞培养贴壁性差如何改进？

sswei

大多数原代贴壁细胞贴壁时间是6h到12h，细胞不贴壁有好多种原因的：1、如果你用玻璃培养瓶培养的话，有可能你的瓶子没处理好；建议你用一次性培养瓶，进口的都可以。2、一般做原代细胞贴壁培养用胰酶消化，消化的程度要掌握好，如果消化时间不到、分散不均匀不贴壁。一般消化有热消化，就是放在37度里消化，时间比较短不好控制，传代培养常用。还有就是冷消化放在4度里，一般在几个小时以上，胰酶浓度也有要求的，一般都

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问悬浮细胞涂片让染色问题

huarenqiang5

这几种染色方法细胞涂片都不能完全干燥，否则会影响结果。

3 回答806 围观

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