实验问答22,109,971 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问细胞污染病原体

loveliufudan

看不太清楚，但是大概率是细菌或者支原体感染，判断是细菌还是支原体感染可以通过以下方法进行：细胞形态观察：细菌感染通常会导致细胞出现各种形态的改变，如细胞增大、变形、聚集、黏附等；而支原体感染则一般不会导致细胞形态的明显改变。细胞内染色：对细胞进行荧光染色或者镜下染色，观察细胞内是否有细菌或者支原体的存在。通常，革兰染色可以用于快速检测细菌的存在，而各种特异性的抗体或者核酸探针可以用于检测支原体的存

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问BV2细胞聚团

sswei

BV2是一种半贴壁半悬浮细胞，它的形态并不规则，存在圆形和梭形两种。据镜下所见应是正常复苏细胞。

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问求解：小鼠背部敷料固定麻醉细节

loveliufudan

固定小鼠的过程确实需要麻醉，否则可能会引起小鼠的压力反应和疼痛。在不使用麻醉的情况下，强制固定小鼠可能会造成不必要的疼痛和伤害，不利于实验结果的准确性和动物福利。如果你不希望每天都给小鼠麻醉进行换药，你可以考虑使用一些更持久的敷料。例如，一些自粘敷料可以长时间固定在小鼠皮肤上，而不需要每天更换。此外，你还可以考虑使用一些缓释药物或包含药物的敷料，这样可以减少每天换药的次数。

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问请问我的细胞这是污染了吗

PanoV13

不是污染，细胞分裂生长会这个样子

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问求助！！！！！如何用qPCR数据做信号通路筛选的分析？

精通小明术

使用qPCR数据进行信号通路筛选的分析，可以采用以下步骤：收集实验数据并处理数据：通过qPCR技术检测一组兴趣基因在不同条件下（例如，对照组和实验组）的表达水平。将数据导入到适当的统计软件中，例如R或Python，并进行标准化和规范化处理。确定差异表达基因：使用适当的统计方法（例如t-test或方差分析），确定哪些基因在对照组和实验组之间具有显著差异表达水平。这些差异表达基因可能是信号通路相关基因

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问取小鼠背根神经（DGR）怎么取

loveliufudan

取小鼠背根神经 (dorsal root ganglion, DGR)需要进行一些操作步骤：1.准备工具和材料：麻醉药物，手套，消毒酒精，手术剪刀，手术镊子，小动物手术台，缝合线和针头等。2.将小鼠放入麻醉室内，用麻醉药物麻醉，使其处于无痛状态，然后将小鼠固定在手术台上。3.在小鼠背部消毒酒精后，进行一段小皮肤切口，以暴露背根神经的位置。然后，用手术镊子和手术剪刀轻轻地将周围的软组织和脂肪组织移开

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问细胞污染

晴空a

看情况应该是污染了，内容物有些混杂不清。

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问细胞攻毒实验中细胞的选择

loveliufudan

确定细菌攻毒的细胞种类，需要先了解金黄色葡萄球菌通常会侵染哪些类型的细胞。金黄色葡萄球菌通常能侵染多种类型的细胞，包括人类上皮细胞、内皮细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等。在进行细胞实验前，需要先选择一种或几种与你研究相关的细胞，如人类上皮细胞或巨噬细胞等。可以在细胞培养基中培养这些细胞，并在培养基中添加金黄色葡萄球菌，观察细胞是否会被侵染并受到菌的损伤。通过这种方式，可以初步确定金黄色葡萄球菌攻毒的细

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问人组织免疫荧光老是有很多非特异性絮状怎么回事

sswei

可能存在有以下几种情况:（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。（3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。（4）从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体，以致容易混淆。（5）

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问小鼠二次开胸：小鼠开胸心肌注射药物5天后再次开胸建立心梗模型

loveliufudan

二次开胸是一项复杂的操作，需要具备一定的实验操作经验和技能。在小鼠心肌梗死模型实验中，开胸操作过程中可能会导致胸腔粘连，影响模型建立和结果分析。如果必须进行二次开胸操作，以下是一些注意事项：在第一次手术中留下足够的操作空间，以便在第二次手术中更好地操作。小心地切开胸骨和肋骨，以避免对心脏造成损伤。在操作过程中保持手术场所清洁，尽量避免细菌感染。细心观察小鼠的呼吸和心跳情况，及时处理任何出现的问题。

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问【求助】各位大佬有了解的比较成熟的胃肠动力障碍动物模型的造模方法的嘛？麻烦告知

loveliufudan

常见的胃肠动力障碍动物模型有胃溃疡、胃复流、胃轻瘫、小肠细菌移位等。其中，胃轻瘫是一种常用的胃肠动力障碍模型。以下是一种常用的SD大鼠胃轻瘫模型的制备方法：SD大鼠进行禁食24小时，但可自由饮水。在无麻醉的情况下，将SD大鼠取出，并施行电针刺激（电流强度0.4mA，频率10Hz，刺激时间5秒，刺激5次）。术后继续禁食，观察SD大鼠的胃排空情况，如果排空受阻，则表示模型制备成功。

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问盐酸胍洗镍柱原理

loveliufudan

盐酸胍是一种强碱性离子交换剂，它可以用于金属离子的分离和纯化。在洗镍柱中，盐酸胍通过吸附和解吸作用分离和纯化镍离子。具体来说，洗镍柱中通常填充有一种固定相，例如硅胶或其他亲水性的材料，表面带有负电荷。当盐酸胍进入柱子时，它会与固定相表面上的负电荷形成静电作用力，并将其取代。此时，柱子内部的镍离子会与盐酸胍发生离子交换作用，从而与固定相分离。当洗镍柱中的镍离子被完全吸附时，可以使用酸性溶液（例如盐酸

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问[求助]求大神帮忙看看这几张图片里有自噬小体吗？

土井挞克树

图中空泡状的小囊泡是自噬小体。

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问mdsc与t细胞共培养实验

土井挞克树

wt小鼠中的mdsc对t细胞有负向调控作用。

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问斑马鱼幼鱼地塞米松造模后只要换蒸馏水清洗就会大量死亡，怎么破啊

土井挞克树

可以尝试用pbs清洗，先用pbs清洗不要用蒸馏水

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问生物膜结晶紫染色

dxy_58wfiw47

我之前也遇到这样的问题后来发现清洗完浮游菌后直接放烘箱烘干（15-20分钟即可）效果比用甲醇等固定液效果要好可以试试看你的菌适不适合这个方法

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问MDCK（MDR1转染）细胞在24孔板transwell里的100倍。问题首先是细胞形态怎么全是球状呢？且是不是有细胞叠层的现象

loveliufudan

MDCK细胞在Transwell的培养条件下呈现球状形态，可能是由于以下几个原因：细胞密度过高：如果细胞密度过高，MDCK细胞可能会聚集在一起并形成球状。培养基成分：如果培养基成分不适合MDCK细胞生长，细胞形态可能会发生改变。营养不良：如果细胞没有足够的营养和生长因子，细胞形态可能会变得不规则或球状。至于细胞叠层的现象，它可能是由于细胞密度过高、培养时间过长或培养基成分不合适等原因造成的。这种叠

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问细胞划痕实验contral组效果更好怎么办？

loveliufudan

在这种情况下，有几个可能的解释：细胞毒性：药物浓度过高可能会导致细胞毒性，从而影响细胞的生长和划痕愈合。即使您已经将药物浓度调小，可能仍然存在细胞毒性的问题。如果您怀疑这是问题的原因，可以尝试使用不同的药物浓度或不同的药物来验证。细胞状态：即使细胞是同一批铺在六孔板上的，也可能存在细胞状态的差异。有些细胞可能更健康、更活跃，而有些细胞可能处于应激状态或缺乏营养。这些差异可能会影响细胞的反应和划痕愈

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问MDCK细胞接毒后不到半天变成这种状态

loveliufudan

下面是可能的原因和建议：毒株问题：接种的病毒毒株可能存在问题，例如病毒浓度过高或存在毒性。您可以尝试使用不同的病毒毒株或不同的浓度进行接种实验，以确定是否与毒株有关。细胞状态问题：即使操作规范，MDCK细胞在接种前可能已经存在细胞状态问题，例如缺乏营养或处于应激状态，这些问题可能会影响细胞对病毒的反应。您可以尝试使用健康的细胞并保证其正常生长，以降低细胞状态对实验结果的影响。采样管污染问题：采样管

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问求助小鼠颅骨成骨细胞提取

此用户已注销

你好，请问你成功提取出来了吗。

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