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        人组织免疫荧光老是有很多非特异性絮状怎么回事

        相关实验:细胞免疫荧光

        user-title

        KKKPY

        图片描述非常弱的激光强度下都很多这种絮状非特异性 请问大家有遇到这种情况吗?

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        可能存在有以下几种情况:

        (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。

        (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。

        (3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。

        (4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。

        (5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。

        (6)荧光素不纯,标本固定不当等。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        通常是由于以下几种原因引起的:

        组织切片不干净:在组织切片过程中,如果没有彻底去除脂肪和其他不需要的物质,这些物质会在染色过程中引起非特异性结构的形成。

        蛋白质结构异常:在染色过程中,如果标记的抗体与其他蛋白质结合,可能会形成非特异性结构。

        染色过程中的污染:如果使用的试剂或设备有污染,可能会引起非特异性结构的形成。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        应该是背景杂质污染,背景非特异性结合导致的杂质荧光

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