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科研学霸天团，48小时有问必答

问请问一下表皮细胞常选用的细胞株是哪种呀？怎么搜索查找到皮肤相关细胞常用的细胞株呢？（新手小白真诚发问)谢谢谢谢！

loveliufudan

表皮细胞的常用细胞株包括HaCaT、HEK293T、A431、NHDF、NHEK等。如果你想查找皮肤相关细胞的常用细胞株，可以通过以下几种方式：在PubMed等学术搜索引擎上进行文献检索，使用关键词“skin cells”、“epidermal cells”、“keratinocytes”、“melanocytes”等，可以找到相关研究，其中常用的细胞株可能会被提到。到细胞库网站上搜索相关的细胞株

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问体外培养巨噬细胞过程中，巨噬细胞的形态发生明显变化，体积变大。求助下这种情况是否正常？

loveliufudan

在培养的早期阶段，巨噬细胞可能会分泌多种细胞因子，通过细胞外基质与其他细胞进行交流，此时巨噬细胞的体积可能会逐渐增大。此外，当巨噬细胞处于激活状态时，它们的形态也可能会发生改变，包括伸长、分枝和细胞质的增加等。

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问C2c12细胞培养过程中遇到的问题？

lyang556

可以检测一下支原体，看看是不是支原体污染。也可能是培养基问题。

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问细胞培养过程中的一个疑问求助？

loveliufudan

对于其他pH缓冲系统，例如HEPES、MES和PIPES等，通常不需要使用二氧化碳培养箱来维持pH。这是因为这些pH缓冲体系不会受到CO2的影响，可以在常规的CO2无菌培养箱中稳定地维持pH值。不过，在培养细胞时，还是需要注意使用适当的pH缓冲系统，并遵循相应的操作指南，以确保细胞的正常生长和功能。

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问u87细胞培养问题求助？

是TTT

听你的描述很可能是黑胶虫污染，可以买黑胶虫去除剂试试

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问生长曲线

loveliufudan

测绘肠道菌群的生长曲线通常使用的是菌落计数法（CFU）或者荧光定量PCR（qPCR）等方法，而不是常规的OD600测量法。这是因为肠道菌群包括很多种微生物，不同种类的细菌对光的散射和吸收能力不同，导致在OD600值上的差异很大，因此用OD600值测量肠道菌群的生长曲线会产生很大误差。如果您要进行肠道菌群的生长曲线测量，建议使用菌落计数法或者荧光定量PCR等方法。

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问transwell侵袭固定细胞

土井挞克树

你得问题是甲醇浓度过高以及时间过长，可以降低甲醇浓度，或者可以用70%的乙醇固定，乙醇固定的浓度和时间调节相对简单，成功率高。

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问这是什么细胞污染

huarenqiang5

你这个主要考虑是支原体污染，建议及时处理。

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问研究急性髓系白血病的话，正常细胞系大家一般选择那个细胞系啊

汤姆卜丽波

一般采用人急性髓性白血病细胞系HL-60

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问大佬们帮忙看看293T细胞？

dxy_vh4bdst5

我一般刚复苏，或者低密度复苏培养时候刚开始也是这样，加血清，接种密度高点，就会长的好

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问DAVID做GO富集

汤姆卜丽波

全是1没有变化么。那肯定是你的参数设置错了，你去筛选的是差异基因吧，然后做GO富集，先按照默认参数跑一边

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问求助:☞蛋白质3D结构预测

sswei

先用酶降解为短的肽段，再用质谱仪分析，从谱图中识别每个肽段的氨基酸序列，再将诸多肽段的序列拼接起来成为完整的蛋白质序列。

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问平滑肌炎症模型

橙汁儿青柠味

最方便的应该是qpcr或者elisa检测炎症因子的产生水平了，比如IL1，IL6等等，还有wb检测相关信号通路的活化，比如NF-kB

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问3T3-l1细胞有没有诱导分化之后再做转染的情况，如果有需要什么条件才可以进行呢？

汤姆卜丽波

没什么特殊条件，和正常转染一样，lipo2000瞬转或者慢病毒稳转都可以

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问氨茶碱用于细胞实验，买的规格是mg，最后作用于细胞需要终浓度大概10-5次方mol/L，这种需要怎么稀释呢？

认真搞科研的小王

先配置母液1mol/l或者0.1mol/l之后，可以以10倍梯度稀释，将母液稀释至想要的浓度。

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问贴壁细胞mkn45消化用37度两分钟总是消化不下来，每次都要搞很久，细胞状态就不好了，该怎么办呢

是TTT

可以在显微镜下观察，细胞变成圆形，就可以加培基终止消化，并且吹打下来了，这种方法比较科学

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问请问一下mkn45这个细胞传代胰酶消化多久合适啊

loveliufudan

一般来说，使用0.05%-0.25%的胰酶在37°C下消化细胞5-15分钟，可以将细胞完全分离。不过，实际消化时间和胰酶浓度需要根据实验者的经验和细胞状态进行调整。

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问脂肪细胞诱导分化时IBMX和地塞米松的浓度可以改变吗？有没有大佬做诱导分化效果比较好，分化速度适中的配方，求求

土井挞克树

首先让细胞长满以后，接触抑制2天(是细胞退出生长周期)，加入含有IBMX(一般使用浓度0.5mmol/L)，DEX(地塞米松，一般使用浓度是 1umol/L)和insulin(胰岛素，一般使用浓度1-10ug/ml)的培基2天，再换成只含胰岛素的培基2天，然后每两天换液(普通培基)。这是分化的步骤，但是最关键的是细胞的传代次数，细胞传代次数较多，分化率很低。一般说不能超过20代，最好在10代以内

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问细胞转染过后变的难消化

认真搞科研的小王

1.使用低黏附性的培养器皿进行细胞培养，如无血清的蛋白质涂层培养瓶、聚乙烯醇（PVA）涂层培养瓶等，以减少细胞与表面的黏附力。2.调整胰酶的浓度和消化时间，对于不同类型的CHO细胞和转染后的鼠源病毒，需要进行优化试验，找到最佳的消化条件。3.使用特殊的细胞剥离缓冲液或者酵素替代品进行细胞剥离，例如使用EDTA、TrypLE等。4.细胞密度不宜过高，需要及时调整细胞密度和培养容器尺寸，以保证细胞生长

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问江湖救急！谁能写一下，超详细的DF-1细胞培养过程啊？？

loveliufudan

1.准备工具和试剂DF-1细胞贴壁细胞培养瓶完全培养基：DMEM（高糖）培养基，含10%胎牛血清（FBS），1%青霉素-链霉素溶液DPBS（不含钙、镁）细胞刮刀离心机和离心管显微镜无菌操作台2.培养前的准备将培养瓶和培养基从冰箱和冰柜中取出，分别放入37℃恒温箱中和室温下复温。配制好的完全培养基在37℃恒温箱中加热30-60分钟，使培养基达到37℃。3.细胞传代将离壁的细胞吸入离心管中，然后离心5

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