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科研学霸天团，48小时有问必答

问【求助】小鼠注射胰岛素降血糖

汤姆卜丽波

给小鼠一般腹腔注射胰岛素溶液(0.1毫克/10克体重),胰岛素溶液浓度为2国际单位/毫升

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问哪位大佬能帮助解读一下最后这个公式是什么意思（是荧光分光光度计使用的）

汤姆卜丽波

这个公式有点像线段法，除数Sa-B2是你的代测样品去掉其他溶剂干扰后的吸光度值，被除数是标准样品，你用的浓度是200就是200的值，也是一样的道理，然后算比值，乘标准浓度就是你样品的浓度

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问本人要做原代脂肪细胞，但是提取之后发现养着养着培养皿就开始出现小黑点，像细沙一样，请问应该怎么解决

loveliufudan

这种情况可能是由于细菌或真菌污染所致，可以考虑采取以下措施来解决问题：丢弃受污染的培养皿：如果你发现一些小黑点，可以将受污染的培养皿丢弃，以防止进一步污染其他培养皿。更换培养基：你可以更换新的培养基，并且添加适当的抗生素或抗真菌药物，以杀死任何污染的微生物。加强无菌操作：要防止细菌或真菌污染，可以加强无菌操作，如在实验室中进行操作时穿戴实验服、戴手套，使用灭菌器灭菌培养器具等等。检查供试细胞的来源

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问人脐静脉内皮细胞（HUVEC）传代培养，胰酶消化后，在培养基中，放入培养箱前在显微镜下观察，细胞会聚团是怎么回事啊？菜鸡求助大

认真搞科研的小王

1.细胞-细胞相互作用：HUVEC有一定的自组织能力，胰酶消化后可能会导致表面受损或暴露出附着分子，促进细胞聚集和形成群体。2.细胞-基质相互作用：HUVEC也可以通过与培养基中存在的基质分子（如纤维蛋白、胶原等）相互作用，构建三维结构并形成群体。3.胰酶活性未被及时抑制：在胰酶消化过程中，如果胰酶活性未被及时抑制，则会导致胰酶继续消化HUVEC表面的附着分子，使得细胞表面失去黏附能力，从而发生细

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问请问一下表皮细胞常选用的细胞株是哪种呀？怎么搜索查找到皮肤相关细胞常用的细胞株呢？（新手小白真诚发问)谢谢谢谢！

loveliufudan

表皮细胞的常用细胞株包括HaCaT、HEK293T、A431、NHDF、NHEK等。如果你想查找皮肤相关细胞的常用细胞株，可以通过以下几种方式：在PubMed等学术搜索引擎上进行文献检索，使用关键词“skin cells”、“epidermal cells”、“keratinocytes”、“melanocytes”等，可以找到相关研究，其中常用的细胞株可能会被提到。到细胞库网站上搜索相关的细胞株

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问体外培养巨噬细胞过程中，巨噬细胞的形态发生明显变化，体积变大。求助下这种情况是否正常？

loveliufudan

在培养的早期阶段，巨噬细胞可能会分泌多种细胞因子，通过细胞外基质与其他细胞进行交流，此时巨噬细胞的体积可能会逐渐增大。此外，当巨噬细胞处于激活状态时，它们的形态也可能会发生改变，包括伸长、分枝和细胞质的增加等。

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问C2c12细胞培养过程中遇到的问题？

lyang556

可以检测一下支原体，看看是不是支原体污染。也可能是培养基问题。

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问细胞培养过程中的一个疑问求助？

loveliufudan

对于其他pH缓冲系统，例如HEPES、MES和PIPES等，通常不需要使用二氧化碳培养箱来维持pH。这是因为这些pH缓冲体系不会受到CO2的影响，可以在常规的CO2无菌培养箱中稳定地维持pH值。不过，在培养细胞时，还是需要注意使用适当的pH缓冲系统，并遵循相应的操作指南，以确保细胞的正常生长和功能。

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问u87细胞培养问题求助？

是TTT

听你的描述很可能是黑胶虫污染，可以买黑胶虫去除剂试试

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问生长曲线

loveliufudan

测绘肠道菌群的生长曲线通常使用的是菌落计数法（CFU）或者荧光定量PCR（qPCR）等方法，而不是常规的OD600测量法。这是因为肠道菌群包括很多种微生物，不同种类的细菌对光的散射和吸收能力不同，导致在OD600值上的差异很大，因此用OD600值测量肠道菌群的生长曲线会产生很大误差。如果您要进行肠道菌群的生长曲线测量，建议使用菌落计数法或者荧光定量PCR等方法。

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问transwell侵袭固定细胞

土井挞克树

你得问题是甲醇浓度过高以及时间过长，可以降低甲醇浓度，或者可以用70%的乙醇固定，乙醇固定的浓度和时间调节相对简单，成功率高。

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问这是什么细胞污染

huarenqiang5

你这个主要考虑是支原体污染，建议及时处理。

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问研究急性髓系白血病的话，正常细胞系大家一般选择那个细胞系啊

汤姆卜丽波

一般采用人急性髓性白血病细胞系HL-60

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问大佬们帮忙看看293T细胞？

dxy_vh4bdst5

我一般刚复苏，或者低密度复苏培养时候刚开始也是这样，加血清，接种密度高点，就会长的好

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问DAVID做GO富集

汤姆卜丽波

全是1没有变化么。那肯定是你的参数设置错了，你去筛选的是差异基因吧，然后做GO富集，先按照默认参数跑一边

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问求助:☞蛋白质3D结构预测

sswei

先用酶降解为短的肽段，再用质谱仪分析，从谱图中识别每个肽段的氨基酸序列，再将诸多肽段的序列拼接起来成为完整的蛋白质序列。

3 回答454 围观

问平滑肌炎症模型

橙汁儿青柠味

最方便的应该是qpcr或者elisa检测炎症因子的产生水平了，比如IL1，IL6等等，还有wb检测相关信号通路的活化，比如NF-kB

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问3T3-l1细胞有没有诱导分化之后再做转染的情况，如果有需要什么条件才可以进行呢？

汤姆卜丽波

没什么特殊条件，和正常转染一样，lipo2000瞬转或者慢病毒稳转都可以

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问氨茶碱用于细胞实验，买的规格是mg，最后作用于细胞需要终浓度大概10-5次方mol/L，这种需要怎么稀释呢？

认真搞科研的小王

先配置母液1mol/l或者0.1mol/l之后，可以以10倍梯度稀释，将母液稀释至想要的浓度。

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问贴壁细胞mkn45消化用37度两分钟总是消化不下来，每次都要搞很久，细胞状态就不好了，该怎么办呢

是TTT

可以在显微镜下观察，细胞变成圆形，就可以加培基终止消化，并且吹打下来了，这种方法比较科学

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