实验问答22,717,295 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问流式同时检测表面抗原及胞内抗原是前后分别孵育抗体吗？

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问计算细胞活力的时候需要减去空白对照孔吗，还是用实验组的吸光值除以正常对照组的呢

loveliufudan

在计算细胞活力时，通常会采用空白对照和正常对照来进行校正，具体的方法取决于你的实验设计和所用的试剂。以下是两种常见的方法：1. 空白对照校正法：你可以测量空白对照（通常是不含细胞的培养基）的吸光值，然后从实验组和正常对照的吸光值中减去空白对照的吸光值。这个校正可以帮助去除由培养基或其他试剂引起的干扰，从而更准确地反映细胞的活力。2. 使用正常对照组：你也可以将实验组的吸光值除以正常对照组的吸光值，

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问培养瓶口容易出现气泡

loveliufudan

拧松盖子后出现气泡的原因是培养基中溶解的CO2获得释放的通道,被迫从溶液状态转换为气态而形成气泡。密封时CO2无处释放,拧松后有出口就会快速冒泡。

1 回答530 围观

问求助大家，一个10cm的培养皿长满后可以传几个12孔板比较合适呀？呜呜，实验室没有六孔板了，只能传12孔板了😭

loveliufudan

一般情况下，一个10cm的培养皿长满细胞后，可以传3-4个12孔板比较合适。这样可以确保细胞不会过于密集，有足够的空间进行生长，同时也可以减少细胞过分分散的情况。当然，确保培养条件和培养基适当以支持细胞的生长和健康。在后续的RNA提取试验中，也要确保细胞的状态良好，以获得准确的实验结果。

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问cck8实验中，给药组与对照组的OD值几乎一致，且孵育4h后的OD值都只有0.2左右是什么问题呢？

陌离_nhwc

降低给药浓度试试，不做处理的OD值如何

14 回答1257 围观

问常用的细胞固定液有哪些？

汤姆卜丽波

1.95%乙醇是最常用的细胞学快速固定液。此固定液适用于HE染色和巴氏染色，在细胞细节表现上略差于甲醇。2.甲醇固定时间快，细胞收缩小，细胞核保存较好，结构清晰，染色鲜艳，常作为液基细胞特别是穿刺细胞涂片的固定液。3.冰乙酸醇固定液能沉淀核蛋白，渗透性强，固定快，常与其他溶液混合使用。4.无水乙醇对糖原保存较好，容易使细胞收缩，很少单独使用，一般只用于需要做糖原染色的涂片的固定。5.Carnoy液

40 回答11510 围观

问药物处理后细胞镜下观察明显死亡，但cck8检测与对照无差异

feixue7758527w

那就要看看具体CCk8哪里出现问题了，大多数还是cck8实验的问题，可以考虑重复实验，如果不行，建议减少一点细胞密度看看。

12 回答3681 围观

问药物A配制需要五毫升，计算后需要从从10mM储存液取0.5uL，请问这0.5uL算在配制的5毫升的体系里面么？

dxy_m9ieao5q

不算，不算，肯定不算的。😃😃

7 回答404 围观

问求问24孔板每孔接入细胞悬液500ul，生长12h如何确定每孔的细胞数量？是消化后离心重悬为1ml再取10ul计数吗？

mini白无心

还是消化后重悬，再计数比较准确

6 回答858 围观

问AC16培养方法是啥啊，养不好呀？

祝福未来的自己

完整的培养基讲细胞分散，并通过细胞的冻存技术免受冰冻和解冻过程中的损伤。

4 回答485 围观

问hepg2细胞上有很多颗粒物，是什么污染吗？

mini白无心

看着背景还挺干净的，不像是污染

9 回答515 围观

问请问细胞活性，细胞增殖，细胞毒性有什么差别与联系

祝福未来的自己

指细胞所具有的生长和代谢能力。以总细胞中活细胞所占百分比表示。

9 回答3681 围观

问4T1细胞，容易连着生长，有什么好的解决办法吗？这是60倍镜的明场细胞图

huarenqiang5

1.建议分次消化。一次消化至有细胞移动漂浮时终止，再进行二次消化剩余的细胞，尽量消化成单颗细胞，4T1细胞传代第二天有少量细胞团贴壁未展开为正常现象，继续培养细胞会展开； 2.有可能是细胞密度过大，可通过降低传代密度来改善。

6 回答608 围观

问L929细胞培养过程中，传了几次代以后出现这样圆圆的

高山云初

很可能是因为细胞消化过度或者老化，导致细胞融合

4 回答1720 围观

问如何做细胞培养技术～清洗、消毒？

feng_9630

1.用流动水清洗。2.用用紫外线灯消毒。

5 回答641 围观

问求助问一下这油脂块一样的东西是污染了吗，刚复苏就有，感觉是悬浮的，可以洗掉，貌似也不怎么影响细胞生长，但是养几天就会出现

周末也要努力呀

建议离心时候加PBS多洗几次，更换培养基

5 回答445 围观

问为什么用DMEM培养细菌，培养出来，血清瓶里变红了

橙汁儿青柠味

dmem里面含有酚红，细菌会是ph值升高，所以变红了

9 回答1050 围观

问求助🆘细胞铺板前进行了计数，根据计数结果进行铺板，之后细胞长满后每孔的细胞数量还用计数吗？

Keven轩

一般不需要了，除非显微镜下明显看出细胞死了很多

8 回答630 围观

问请问一下有人用cd19和cd27分选记忆B细胞的吗？

羽2BRD

你看一下抗体是不是选择种属错了，或者是因为样品的表达水平不够，需要添加诱导剂或者更换更敏感的进口的抗体

3 回答670 围观

问做细胞实验，粉末状vc配制成液体了（已过滤），细胞培养基也过滤了，两者加在一起需要再过滤一次吗？

土井挞克树

一般是不用了，如果有污染就需要再次过滤

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