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        药物处理后细胞镜下观察明显死亡,但cck8检测与对照无差异

        相关实验:细胞毒性分析

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        阿司匹林__

        在细胞长到80%时加药物刺激24h,镜下实验组明显变化,但cck8检测无差异,没趋势。这是为什么呢?

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        对照如下:

         

         

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        12 个回答

        user-title

        小呀么小呀

        有帮助

        请问你找到原因了吗?我也遇到了同样的问题。细胞死了测出来活性很高,细胞活着测出来活性很低

        user-title

        梁峻立_麻醉

        有帮助

        我跟你情况差不多,我是肉眼观细胞没死那么多,但是测出来模型组只有对照组活力的30%。找不到原因。。

        user-title

        此用户已注销

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        可能与配置细胞悬液和加入cck8溶液后醇的时间过长相关。

        user-title

        dxy_bim8kk56

        有帮助

        还有就是,96孔板里面染菌了,细胞形态有变化,但是测cck8的时候会把这些菌也当作活细胞测了

        user-title

        静心观照

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        原因:一些物质会影响CCK-8的实验测定结果,当培养体系内含有还原性物质存在时会还原WST-8,从而使OD值增加;当有氧化性物质存在时会抑制还原反应进而使OD值减小。

        如果药物是中药或复方提取物的话,还要考虑药物浓度过高导致药物沉积在孔底,也可能会导致OD值偏高。

        解决办法:更换新的培养基后再加CCK8,甚至可以用PBS清洗一下细胞再用新的培养基加CCK8。

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        feixue7758527w

        有帮助

        那就要看看具体CCk8哪里出现问题了,大多数还是cck8实验的问题,可以考虑重复实验,如果不行,建议减少一点细胞密度看看。

        user-title

        周末也要努力呀

        有帮助

        你是不是把死细胞洗走了,导致剩下的都是活细胞,因而检测结果不准确。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你铺的细胞太多,cck8已经无法分辨出差异 ,cck8只能检测活细胞

        user-title

        秋秋欣欣

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        可以摸索一下细胞的种板量以及贴壁时间,看是否能够解决

        user-title

        CXYzhao

        有帮助

        CCK8检测要考虑的影响因素:

        1.加入CCK8溶液时孔中生成气泡,会影响OD 值的读数;

        2.要设计空白对照组;

        3.对于大多数情况,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了;

        4.使用酶标仪之前要提前开启10min预热;

        5.若连续多天检测,必须保持所有条件一致。

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        高山云初

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        CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        细胞太密会影响检测结果,另外检测波长有没有选对

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