实验问答21,845,257 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问肺癌 A549 为什么细胞不贴壁了？

SHINING579

除了以上说的，还可能是培养瓶的问题，以前找别人买贴壁细胞培养瓶，结果她给我送成了用于悬浮细胞培养的培养瓶，细胞也是不贴壁，所以，建议你核实一下是不是这个原因

10 回答9179 围观

问培养箱出问题，细胞还能用吗？

达达力呀

你是做什么检测的？我们之前遇到过断电的情况，我们是做细胞核型分析的，结果还好。

6 回答8980 围观

问细胞复苏时如何换液呢？

elite_xy

冻存细胞取出后37℃速溶，取15ml离心管，加入10ml含血清培养基，将冻存管中液体（通常1.5ml）也加入离心管中，习惯轻吹几下混匀，1200转常温离心5min，去掉上清，加入5ml含血清培养基，轻吹制成细胞悬液，加入到培养瓶中，即可。注意，新复苏的细胞不要经常去看去动。换液的话，只要把培养基吸出，再加入新的培养基就可以了。如果你复苏的细胞长得很不均匀，可以胰酶消化下来再混匀后在重新加进去（像正

11 回答7063 围观

问用 -70℃ 冰箱细胞冻存复苏成活率低的原因有哪些？

chinalip

1、细胞冻存于－70-80℃保存半年左右是没有问题的，关键是用于冻存的细胞首先状态要好，然后进行程序性降温，4度1h，-20度2h，后转移到-80度。当然也可以使用程序降温盒（提前拿出来解冻）。2、DMSO的浓度10%左右为最好。3、复苏和冻存的程序怎样才能达到最好效果？复苏和冻存的总的原则是慢冻速溶，复苏时预先打开水浴锅37度，将冻存细胞取出立即溶解，加入培养基后离心五分钟，重悬细胞后置于细胞培

3 回答5354 围观

问PBS 容易把细胞冲散，细胞刚过夜是因为贴壁不牢吗？应该怎么改进？

五里云

划痕要用贴壁牢一点的细胞，一般只能用于上皮，纤维样细胞系。

7 回答4622 围观

问胚胎细胞凋亡检测用哪种试剂盒比较好？

lijuan2008_李娟

Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒，不错，实验室都在用

2 回答1102 围观

问细胞免疫荧光

浩ert

注意一抗浓度

3 回答3748 围观

问细胞未出凋亡，可能的原因是什么？

alaling

如果你确定这个药物对正常人的窗口上限是200微摩尔，那么这个细胞系很可能就是对你的药物是耐药的。究其原因有两个，一个是其天生耐药，另外一个，也是最大的可能就是这个细胞株是经过低浓度药物培养起来的耐药株。所以传代越多不太会产生耐药性，但如果你这本身是低浓度药物培养起来的耐药株，就会出现耐药的情况。由于很多细胞系经过无数传代，其中又经过无数处理，记录不清的情况非常常见，所以细胞很容易出现类似的耐药

6 回答3654 围观

问肝细胞 HL-7702 要怎么培养？

amyliu33

如果回输给人类，要用无血清的培养基。肝细胞为多边形，贴壁培养。

7 回答2574 围观

问关于 PHA 刺激 PBMC 增殖，用 CCK-8 检测，实验孔 OD 值却不稳定是为什么？

roby_0_0_2000

你的PHA-p 5ug/ml就可以了，浓度大了自然会死。死于过度刺激。还要加IL-2，不加会死的。

3 回答4017 围观

问细胞逐步冻存，放置时间稍长有问题吗？

我是金博士

既然要求-20°20min，那你为啥40min呢？这个时间是个经验值，具有普适性，但也不排除个体差异性，看看细胞有没有破坏，就知道这样行不行了，20min只是个大概值，你可以比较一下嘛，就有结果了。

2 回答1569 围观

问复苏后第二代死亡是为什么？

yyygo

CHO细胞，做稳定转染，为何不加MTX筛选呢？这样不能保证细胞是单克隆啊，如果是细胞瞬时转染表达的话，瞬时快速不需压力筛选

3 回答1890 围观

问为什么会出现自发性荧光？

loyh

所有细胞都会有不同强度的自发荧光，自发性荧光与细胞内的NADH、核黄素等成分所引起的，这些成分可以被蓝光所激发，发射光波谱大约500-700nm范围，与几种常用的荧光染料，如FITC/PE等的发射波谱有一定的交叉！它的波峰为绿光，因此与FITC发射波谱重叠最多。

3 回答2692 围观

问细胞冻存后复苏后的最佳接种浓度?

fyydnz

好久没做实验了，但把我依稀记得的细胞冻存复苏的心得说一下吧！个人觉得没有统一的规定说一管冻存的细胞可以复苏几瓶。首先得看你当时冻存细胞的状态，数量等，要是“种子”不行的话，你后面再怎么复苏，细胞状态也不会好的！再者当复苏后，当离心去除冻存液之后，用培养基吹打开细胞后，可以用肉眼观察下大概细胞浓度，如果觉得细胞浓度很高，可以适当多接种几瓶，要是浓度很低的话，那就少接种，有个一瓶就够了。第三，接种后

2 回答3298 围观

问为什么要使用无血清培养基？

JMZ贝雷帽

避免细胞本身的增值对实验造成的影响

2 回答5182 围观

问细胞凋亡检测试剂怎么选择呢？

我是金博士

细胞凋亡检测试剂已经是常规试剂了，选择没那么复杂。国产的多是买的国外的自己进行分装，实验试剂这东西，经费少的话可以试试国产，经费足或者对结果要求高建议还是就直接用国外的好。如果你仅仅是一般地细胞凋亡，可以用Annexin V-FITC&PI，这个凯基公司有的，我用过。好像是20T，5-600RMB。如果你还涉及到了细胞内本身表达报告基因,诸如(E)GFP之类的，你可以买BD公司的Annex

2 回答2247 围观

问神经元不长是什么原因？

天颜

1.消化时间长了！跟加什么关系不大。2.PLL铺板没?没有必死无疑！

2 回答1967 围观

问冻存细胞从 -80 转到液氮的运输有没有好的方法？

xxfn

没有，哪有这样，不会是这个影响，细胞培养中的其他问题吧应该是

3 回答3324 围观

问umr-106 细胞培养结果完全不能用，到底是为什么呀？

wangyy1990

是的，“如果血清里里不含你药物的成分，且不和你药物相互作用，是可以加血清的。”。我们一般也是1%的血清，后期不加血清。

3 回答2457 围观

问原代大鼠神经元培养为什么会染菌？

yyygo

黑胶虫不会使培养基产生明显变化，而且对细胞的生长也不会有大影响，一般细胞生长好的话，黑胶虫会自动被抑制，菌液变浑浊变白是染其他菌了，而且是原代培养，染菌的主要事项要注意很多了，可以看一下网上很多文章吧

3 回答2195 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

实验小助手

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序