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问
提取细胞RNA时,不小心将trizol试剂打翻洒在了超净工作台上,该如何处理呢
Miracle星
打翻化学试剂或器皿处理的情况不同,大致来说,1瓶中为挥发性有毒或者是有害试剂,立即打开通风设备,疏散试验人员,第2种瓶中为腐蚀性液体时立即清理掉,此处清理应根据具体情况使用物理或化学方法,比如如果有是装有汞的器皿被打破,汞珠散落在地应撒上硫粉处理。第3天中午是几或者是几无毒无害,则应把打翻的事迹清理进废液缸内,再把碎玻璃渣扫掉就差不多可以了。
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问
长菌了!求解。操作没有什么问题。
Keven轩
可能是超净台的通风系统出了问题,及时换一下滤芯,同时注意无菌操作,这样看杂菌菌落这么大应该是你的操作问题
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问
肿瘤细胞传代几天不长也不死。飘了一些。
我愿送他一轮明月
是不是冻存的时候状态就很差?这样就只能换液、慢慢养。
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问
大家分离神经原代细胞用的消化液和方法是怎样的
Miracle星
培养基选择无血清培养基被认为是最标准最好的培养基,需要的添加剂为B27和谷氨酰胺培养出的细胞状态,均一,胶质细胞几乎不分裂,其中neurobasal是鼠培养级而-a为新生鼠培养基。切忌中途换培养基,要从一而终。
3 回答
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问
不同部位的细胞的分裂速度一样吗?
bamboopiggy
不一样啊,有的快,有的慢,有的长长就不长了
3 回答
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问
细胞种到六孔板后生长不均匀
s1223
铺板前细胞一定要涡旋混匀,混匀后缓慢加入,一定一定要慢,之后慢慢转移至培养箱,动作幅度要小,一定一定要小
4 回答
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问
细胞有时候长了四天了还没长满的原因是什么
bamboopiggy
看你初始铺板的密度,还有你细胞的状况。这个不能看长几天。
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问
由一个单克隆细胞分裂来的CHO细胞,为什么有的大小不一?如何控制细胞粒径,避免其过大?
dxy_3xid5eh3
单克隆细胞也会随着培养时间的增长确实是会产生一些变化,也会存在细胞个体之间的差异,只是相对pull的细胞来说差异更小。可以通过流式分选的方法进行一定粒径的分选。
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问
贴壁细胞传代时候怎么控制胰酶的量呢
Keven轩
一般贴壁能力正常的细胞低浓度胰酶用1mL即可,若贴壁能力强可以增大胰酶浓度或用量
5 回答
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问
Walker 256细胞可以连续传代多少次之后冻存
天一湖医者
原代分离的细胞最好在3代以内,如果是无限传代细胞无所谓。
3 回答
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问
想问下中间细胞聚团的原因是什么
dxy_90k7dzq
状态不好、老化的细胞,也可能会出现抱团生长的情况(比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差)。
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问
贴壁细胞培养应几次换一次培养基?
Keven轩
如果是293T等增殖速度较快的细胞就不需要换了,直接传代即可。如果增殖速度慢,那么一般一天一换液
5 回答
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问
细胞总是爱叠着长,之前不是这样的,请问是什么原因
bamboopiggy
这个感觉是你胰酶消化没有消化成单细胞,所以才逐渐扎堆生长
3 回答
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问
细胞无明显污染但是总是飘很多
dxy_ybjer4q9
是不是培养基添加fbs和双抗的量不足导致的我们一般是培养基:fbs:双抗=50:5:1
4 回答
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问
条件培养基的离心纯化问题
Eason老歌迷
s2结束后,收集培养基上清液,并离心,过滤,即可得到条件培养基
3 回答
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问
鼠的nk细胞分离鉴定
Miracle星
小鼠外周血nk细胞分离液试剂盒,全血或者组织原浆都可以用。
4 回答
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问
结直肠癌元代细胞培养
Eason老歌迷
一,操作前就应该提前准备好所有实验所需物品,以减少走动,二,操作时,试剂用完之后,及时盖上盖子,移动的时候尽量不要从开口容器上经过。三,冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。等反正无菌操作的原则有很多,我只是提了实验中的我经常疏忽的小点。
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问
T3代细胞传代,生长9天细胞突然变黄,显微镜下镜检全都是死细胞,为什么细胞突然死亡?
bamboopiggy
考虑细胞数目是否太多?养的时间太长,导致细胞太拥挤,然后变黄一般就是细胞多了。在除外细胞污染的情况下。
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问
组织细胞取材后如何稳定
dxy_bz3louvw
应该提前准备好无血清培养基,待组织离体后直接放入培养基,减少等待时间,在培养皿中进一步分离纯化(弃掉多余组织),然后再进行后续操作。
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问
P62跑出来条带淡背景很脏怎么办,我用的是abcam的一抗,1:10000。大佬救救孩子吧
Eason老歌迷
背景脏不一定是因为仪器不干净造成的,也有可能是蛋白降解或者整个实验过程中条件不合适造成的。
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