实验问答21,981,506 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问0.5%的明胶封盘3天会不会由于封盘时间过长对细胞有影响？

bamboopiggy

你最好重新铺明胶，但是如果方便的话，用多聚赖氨酸比用明胶好。

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问大家铁死亡抑制剂用多大的量呢？

天一湖医者

铁死亡抑制剂一般用量为5mg/kg

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问Beas-2B细胞复苏问题

澳音AY

细胞复苏后死细胞多，可能是冻存或者保存问题。你看细胞是保存在-80冰箱还是液氮中，以及保存了多久

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问如何建立稳定铂耐药的卵巢癌细胞？是否需要先检测敏感细胞的IC50？检测IC50的规范操作是什么？

balalaLy

先检测IC50，再用比IC50高的大剂量冲击，接着用IC50的剂量维持一段时间，再重新测IC50

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问细胞形态在四代分瓶后发生改变

balalaLy

可能是细胞老化了，纤维化，尽量在第2，3代的时候进行实验

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问做了一次，因为我的细胞增殖速度很慢，培养24h基本没有增殖。所以我铺板的细胞密度挺大的，每孔undefined10五次。铺板后第二天换低血清培

balalaLy

你的药物会干扰cck8的结果，加cck8之前最好还是要洗一下。如果药物促凋亡效果明显的话可以不做饥饿处理。

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问DNA抽提后浓度稀释问题

天一湖医者

浓度20ng/ul以上足够了，如果用的是组织提取，浓度一般很高，可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞，浓度低一些也没有关系。

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问RNA抽提方法的比较

汤姆卜丽波

Trizol就是准备和提取上比较复杂，但其实提好了效果会比试剂盒好一点

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问细胞培养中如果染菌了，会对CCK-8的测量结果产生什么影响

汤姆卜丽波

如果细胞被污染了那整体吸光度肯定会变

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问求问各位学霸原代足细胞的问题

bamboopiggy

肾脏足细胞可以传代，理论上是可以冻存的，你可以取部分试试，因为没有具体做过，只能理论分析。但是查到网上卖足细胞的，用冻存液保存，所以应该问题不大

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问求Bacmid BMON14272 图谱或序列

bamboopiggy

你可以参考一下这个公司给的说明书，他们不让我贴连接，我把pdf的头给你贴上。你自己找来看看吧

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问求助 | 酿酒酵母EBY100和质粒pYD1

bamboopiggy

pDY1 可以直接转EBY100。pYD1 是酿酒酵母的配套质粒，你如果想试试可以试试，但是我感觉不配套使用，产量会低很多

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问Jurkat细胞在培养瓶里面聚团好集中啊，请问这正常吗？

bamboopiggy

jurkat是悬浮细胞，你晃晃瓶子，它们就散开了

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问有没有人有RIG-I(DDX58)这个基因的过表达载体呀？

汤姆卜丽波

这个还是找公司设计，自己做起来很麻烦，或者你们课题组有做这个的，也可以问问

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问细胞为什么会被支原体污染？

balalaLy

实验环境中存在再加上操作者实验过程不严格无菌操作，耗材没有完全消毒灭菌

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问求助！肠杯状细胞AB-PAS染色

灵枢天问

这个没有关系的，试剂盒用料不同染出来可能都有差异，不影响你的结果，只要形态可以看到就可以的

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问想问问这个算不算有抑菌效果呢？

灵枢天问

可以做一个菌落计数，菌落比正常组少的值有统计学差异就算

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问小鼠小胶质细胞BV2从公司买回来复苏以后，细胞长了伪足，用的Gibco的血清和BBI的DMEM培养基养的，它还能长成圆形吗？

汤姆卜丽波

伪足也有可能是正常的吞噬连接其他细胞的状态。再养两天看看

3 回答471 围观

问各位友友们，第二个和第三个这种细胞模糊的状态是怎么了？

bamboopiggy

是细胞senescence了，所以细胞变大，细胞核也变大，看着模糊

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问CFW荧光染色染尖孢镰刀菌菌丝染不上怎么办？

bamboopiggy

是不是你的溶液A失效了？你试试延长一下溶液A染色的时间？增加到2min试试

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