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科研学霸天团,48小时有问必答
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裂红液会失效吗?会导致细胞死亡吗?
balalaLy
过期太久可能液体的ph改变了或者离子浓度改变导致其它细胞死亡
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问
某个氨基酸缺失对蛋白功能影响可以用什么软件预测下致病性
迟C迟
可用NCBI的子程序预测蛋白结构,还有UniProt、SWISS、 STRING、ProtParam等数据库都可以试试。
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问
edu细胞增殖染色的问题
荒诞小说
10uM有点太低了。建议增加EdU浓度和延长培养时间。你的细胞是什么细胞?不同的细胞培养时间不一样。一般的细胞是2h左右,但也有例外,比如神经细胞,培养时间就要延长。另外,EdU试剂盒有个非常需要注意的问题是,染色的试剂需要按顺序配(血的教训,没有按顺序配,就没有染上)
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问
求教:HL-1细胞空泡
bamboopiggy
一开始的细胞空泡,可能是细胞老化的原因,传代过程中,这些细胞会死掉。后面小RNA干扰出现的空泡,可能跟你的转染试剂有关系。至于买细胞,你可以找那家公司在国内的代理帮忙买。
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问
0.5%的明胶封盘3天会不会由于封盘时间过长对细胞有影响?
bamboopiggy
你最好重新铺明胶,但是如果方便的话,用多聚赖氨酸比用明胶好。
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问
大家铁死亡抑制剂用多大的量呢?
天一湖医者
铁死亡抑制剂一般用量为5mg/kg
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问
Beas-2B细胞复苏问题
澳音AY
细胞复苏后死细胞多,可能是冻存或者保存问题。你看细胞是保存在-80冰箱还是液氮中,以及保存了多久
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问
如何建立稳定铂耐药的卵巢癌细胞?是否需要先检测敏感细胞的IC50?检测IC50的规范操作是什么?
balalaLy
先检测IC50,再用比IC50高的大剂量冲击,接着用IC50的剂量维持一段时间,再重新测IC50
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问
细胞形态在四代分瓶后发生改变
balalaLy
可能是细胞老化了,纤维化,尽量在第2,3代的时候进行实验
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问
做了一次,因为我的细胞增殖速度很慢,培养24h基本没有增殖。所以我铺板的细胞密度挺大的,每孔undefined10五次。铺板后第二天换低血清培
balalaLy
你的药物会干扰cck8的结果,加cck8之前最好还是要洗一下。如果药物促凋亡效果明显的话可以不做饥饿处理。
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问
DNA抽提后浓度稀释问题
天一湖医者
浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系。
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问
RNA抽提方法的比较
汤姆卜丽波
Trizol就是准备和提取上比较复杂,但其实提好了效果会比试剂盒好一点
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问
细胞培养中如果染菌了,会对CCK-8的测量结果产生什么影响
汤姆卜丽波
如果细胞被污染了那整体吸光度肯定会变
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问
求问各位学霸原代足细胞的问题
bamboopiggy
肾脏足细胞可以传代,理论上是可以冻存的,你可以取部分试试,因为没有具体做过,只能理论分析。但是查到网上卖足细胞的,用冻存液保存,所以应该问题不大
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问
求Bacmid BMON14272 图谱或序列
bamboopiggy
你可以参考一下这个公司给的说明书,他们不让我贴连接,我把pdf的头给你贴上。你自己找来看看吧
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问
求助 | 酿酒酵母EBY100和质粒pYD1
bamboopiggy
pDY1 可以直接转EBY100。pYD1 是酿酒酵母的配套质粒,你如果想试试可以试试,但是我感觉不配套使用,产量会低很多
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问
Jurkat细胞在培养瓶里面聚团好集中啊,请问这正常吗?
bamboopiggy
jurkat是悬浮细胞,你晃晃瓶子,它们就散开了
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问
有没有人有RIG-I(DDX58)这个基因的过表达载体呀?
汤姆卜丽波
这个还是找公司设计,自己做起来很麻烦,或者你们课题组有做这个的,也可以问问
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问
细胞为什么会被支原体污染?
balalaLy
实验环境中存在再加上操作者实验过程不严格无菌操作,耗材没有完全消毒灭菌
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问
求助!肠杯状细胞AB-PAS染色
灵枢天问
这个没有关系的,试剂盒用料不同染出来可能都有差异,不影响你的结果,只要形态可以看到就可以的
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