Miracle星
cck8实验做了一次,因为我的细胞增殖速度很慢,培养24h基本没有增殖。所以我铺板的细胞密度挺大的,每孔undefined10五次。铺板后第二天换低血清培养基,1%浓度,饥饿培养24h。第三天,配好药物浓度梯度,加药。培养24h。第四天,因为我的药物是重金属离子,跟CCK8会有强烈的反应,我就先把原培养液吸出,很小心的尽力吸干净,我没有用PBS冲洗,因为我怕冲洗会冲洗掉细胞。接着加入100ul培养基每孔,再加入10ulCCK8每孔。孵育后半个小时,1个小时,2小时,4小时都在酶标仪上检测了。
我的第一个问题是:我的药物是致细胞凋亡的,有没有饥饿培养的必要呢?
第二个问题是:我的检测结果正常组OD值在0.5~0.4之间,加药组最低0.29,空白(只有培养基和CCK8)是0.27左右。这样的实验结果可信么?OD值范围是多少比较合适呢?必须要做OD和细胞数的标准曲线么?
天一湖医者
第二个问题,OD比值一般在1.8~2.0之间,是的,必须要标准曲线。
balalaLy
你的药物会干扰cck8的结果,加cck8之前最好还是要洗一下。如果药物促凋亡效果明显的话可以不做饥饿处理。
bamboopiggy
1.你的药物是促凋亡的,那没有必要再去饥饿细胞,尤其你细胞长的还慢。
2,不用非要做标曲,只要你的实验结果能说明问题就好。一般OD值在1以下都是可以的。
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