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        Beas-2B细胞复苏问题

        相关实验:细胞复苏实验

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        实验小助理静静

        各位大神同行,之前从别的课题组拿到一管icell的Beas-2B细胞,昨日晚上复苏,1min内复苏好的,并马上离心去除掉了DMSO,细胞计数大约有300W个,接种至2个T25的培养瓶中培养,培养基每瓶6mL:DMEM高糖+10%FBS+1%双抗,培养20 h后观察细胞状态,发现约1/3细胞贴壁,漂浮一层死细胞。求助可能是什么原因造成的?第一张图为刚复苏时细胞,第二张图为培养20 h后的细胞。急!谢谢大家图片描述图片描述

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        4 个回答

        user-title

        澳音AY

        有帮助

        细胞复苏后死细胞多,可能是冻存或者保存问题。你看细胞是保存在-80冰箱还是液氮中,以及保存了多久

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        有少量存活下来的细胞,很大可能是冻存的过程有问题。没有按照梯度冻存法冻存,或者加完冻存液之后在室温或4度放太久

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可能不是你的问题,你的操作没问题,是不是你要的细胞,保存有问题,被化过?但是没关系,你把死细胞换液换掉,养几代就好了。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        一个是培养基污染引起的,另外飘着死细胞,与细胞状态及操作处理有关。可能原来细胞状态不好。或者你处理过程中消化时间过长。其三,消化完后吹打过度或者用力过大等。

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