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冰冻切片免疫荧光求助!杂信号特别多
Eason老歌迷
出现杂点有几个原因。1、二抗未洗净(再使用PBS多洗几次)2、孵育过程中出现了干燥现象,产生非特异性染色(注意湿盒的使用,避免干燥)3、抗原封闭不彻底(使用二抗同源血清进行封闭,延长封闭时间等)4、一抗特异性问题(换抗体,或者多抗换成单抗进行实验)。
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问
请教大神慢病毒转染小鼠BaF3细胞
Miracle星
要不你试一下用逆转录病毒和电转染
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问
基因富集
whilt-shirt
一般至少都几十个吧,少了的话结果不太可靠
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问
这种克隆形成的板子能用吗?
balalaLy
水印的问题不大,但是你这个已经15天了克隆数太少了,而且还聚集在孔板边缘,你可能需要增加铺板细胞数重新做。
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问
求助大家,我的细胞是污染了吗?
Eason老歌迷
是的啊,有点像。细胞污染一般你可以先拿显微镜看看,看看有没有游动和混浊。然后可能是细菌,支原体,真菌,黑胶虫污染。
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问
细胞实验酮类药物溶于0.1%DMSO中,需要设置对照组吗
Eason老歌迷
需要啊!你的药物溶于dmso,那么对照就是0.1%的dmso就行。
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问
A2780细胞形态和状态
汤姆卜丽波
你高倍镜放大看看,我查到的2780是这样的
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问
问一下关于自噬的问题
balalaLy
自噬在不同干预后不同时间点会有不同的表型,建议你做多几次重复实验,如果重复性好,就以自己的实验结果为准。
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问
细菌刺激细胞
Eason老歌迷
一般放回细胞培养箱培养,如果你做好消毒,操作得当,一般不会造成污染的。
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问
细胞污染
汤姆卜丽波
你看一下它是活动的么,有可能是杆菌
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问
缬沙坦作用于细胞,用什么试剂溶解合适
Eason老歌迷
看你用什么实验了,如果是mtt,cck8就可以用dmso溶解。如果是加药,用血清培养基即可。你的浓度设定一般是按照你的实验目的来设计的,最好是先预实验,确定一个大概的范围。
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问
用红细胞裂解液裂解人外周血红细胞,离心后没有白色沉淀
Eason老歌迷
第一个问题:红细胞裂解液(Tris-NH4Cl)的配制比例和方法:称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后,混匀静止4-5分钟,待红细胞完全破碎,1000r/min离心5分钟,弃上清去除红细胞,得到白细胞沉淀。第二个问题:我觉得你的离心力不够,或者是你提的细胞量太少了。
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问
大家帮忙看看这个中间空泡是什么?
Eason老歌迷
如果不在细胞内在细胞外的话,可能是酵母菌等真菌污染。
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问
求助 siha细胞
Eason老歌迷
我也遇到过这种情况,应该是细胞污染了,你先养养看状态,在做处理。
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问
想测pi3k表达量,分为好几个亚基,该怎么选一抗呢
whilt-shirt
根据你的下游蛋白是受哪个亚基影响来选择
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问
X-tile数据解读
Eason老歌迷
是的,p值肯定是小于0.05的才靠谱
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问
实验分析题
Eason老歌迷
问题1:减低,共价问题2:周期蛋白依赖性激酶是细胞周期的关键调节因子,通过与细胞周期蛋白D(cyclin D)形成复合物,可磷酸化视网膜母细胞瘤基因(Rb)继而释放转录因子E2F,促进细胞周期相关基因的转录,使细胞进入S期。
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请大佬指导一下!好人一生平安!
Eason老歌迷
那你就按照你设计的时间来加,你第一天下午去,下面的就是早晨和晚上来加药。
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问
细胞因子干粉重构后的保存时间
Eason老歌迷
一般4℃可稳定储存4-7天,要是存放于-20℃,可稳定保存至少三个月。
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问
DTT毒性强吗?为什么我闻了会恶心,我同学不会啊
汤姆卜丽波
总之是有毒的,而且它确实味道很不好,带好口罩做好防护
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