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(求助) 有人在做基底膜体外培养的螺旋神经节 神经纤维免疫荧光染色吗?求解!
balalaLy
我4年前有做过,NF200确实不好染,实在染不好,你可以考虑换另一个Marker,或者用Neun,丁大连老师有一篇文章就是染螺旋神经节的,你可以找来看一下。
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乳酸脱氢酶释放实验遇到的问题
Eason老歌迷
我之前也遇到过这种情况。需要注意一下各组细胞接种密度是否均一,生长状态是否一致。一般细胞种板时应不断摇晃细胞悬液使之密度均一,另外注意每组细胞各孔OD值是否相差很大,如果标准差太大,则样本不能很好的代表总体。如果这些都没问题,就应该注意一下药物的配制问题,药物配制的时间(时间过久可能失效)、纯度(纯度不高会影响药效)
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请问,这是HCT15细胞,这个给个的团块不会移动,是什么污染吗?好奇怪呀
Eason老歌迷
你的图没有上传上来。可能你这个细胞培养皿里的团块是传代没有传均匀,细胞成团了,并不是污染。
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SW620细胞背景有黑点 是污染了吗
申东熙老伯
这个黑点会动吗?如果细胞长的慢,这个黑点会动的话应该是污染。现在这个也有点像细胞碎片啊。
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细胞侵袭实验
balalaLy
那些一坨一坨的东西是死细胞,细胞穿不过去饿死了。可能是因为小室底下有气泡,接触不到下室的培养基。
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小鼠骨髓间充质细胞培养
Eason老歌迷
看着还行,状态还行。刚提取出来的时候,用PBS洗涤贴壁细胞(第0代),每3-4天加入新鲜培养基;初始贴壁纺锤形细胞第3天显示为单个细胞; 在4-8天内,培养物变得更加清晰,并在2周内达到65-70%的影响;在这个阶段,培养物通常表现出两个特征:首先,平板可能含有不同大小不同的成纤维细胞集落; 第二种可以包含散布在细胞集落之间或之上的非常少量的造血细胞。
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可以帮忙解答一下胰腺组织取材吗
Eason老歌迷
有点像,我建议你下次连带着附近器官一起取,我们都是连带着附近的器官一起取下来,然后再进行分离,这样好辨别和分离。
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RAW264.7细胞的M2极化方案
dxywode
变化没有LPS刺激大,前段时间有个做巨噬细胞的老师建议我不要用细胞株做M2型,用骨髓细胞做。
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TCID50结果在稀释梯度高的孔忽然出现异常阳性,是污染吗?
Eason老歌迷
可能是研磨裂解不充分,让病毒颗粒没有完全释放出来,聚集导致后面孔有阳性。
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关于实验配液的一些问题
Eason老歌迷
估计是没审核出来错误,25—ml,就是25毫升,0.2—ml就是0.2毫升。
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乳鼠成纤维细胞培养问题讨论
Eason老歌迷
大部分都是用高糖DMEM,但我最近用低糖培养细胞时,也未发现有明显不同。他们之间就只有糖份的含量不同,其余是完全一样的。
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求细胞生长
Eason老歌迷
一般刚开始做的话你就可以做6纵列,每列5个副孔。96孔板的每个孔上,加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后,与未加入的细胞悬浮液混合,然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后,用左手轻轻握住木板的左边,然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ,将剩下的三面逐一拍打,静置5分钟左右,然后放入
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提速的细胞DNA特别黏,加样时一加一大坨,怎么处理一下能不黏?浓度也不高,加水稀释不行,在冰箱冷冻过也不太行
bamboopiggy
感觉是你细胞的量太多了,提取的时候蛋白沉淀没有做好,粘的东西可能是蛋白,要不你过柱提dna吧
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胰酶污染的话有什么表现吗,怎么判断
天一湖医者
胰酶污染的话表现:胰酶浑浊,色黄(偏酸),有臭味儿,镜下见到球菌。
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角蛋白10,分子量50,出现这种情况不晓得什么原因,各位大佬们,救救我吧!
Eason老歌迷
一个是背影有点脏,建议你封闭时间长一点。二是你Western转膜液要用新鲜的,不然转膜效果不好。三是抗体孵育时间可以久一点,抗体浓度别太浓。
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【求助】双荧光素酶实验结果和荧光定量结果相反
Eason老歌迷
不应该啊,我觉得可能是你的实验操作有问题。双荧光素酶报告实验还是很准确的,采用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成,实验过程中萤火虫荧光素酶与基因表达的特定实验条件有关,海肾荧光素酶用来做转染的内参,以校正不同样品之间转染的转染效率。
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MRC-5污染
天一湖医者
从图片上看,应该是细菌污染了。
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低分化PC12
Eason老歌迷
看着不像是真菌感染,我觉得可能是细胞团,真菌丝形状不是这样的。
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求助:小鼠原代肝星状细胞提取!!!
Eason老歌迷
给你分享一下我的提取方法吧,说不定对你有所帮助。先原位灌注:1、1ml5%水合氯醛麻醉大鼠,腹壁酒精消毒,十字切口打开腹腔,用湿棉签将肠管推向左侧,暴露门静脉和下腔静脉。2将充满灌流液的针经小口插入门静脉,止血夹或线结扎,软管部分用纸胶布固定以免滑脱。3、灌注I液灌注在肝脏迅速发白后前断下腔静脉,肝脏在全部灌注完后可见白色纹理。可以注射器灌注,也可以使用专门的大鼠灌注器。先灌注液:5min37度\
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【求助】取材小鼠大脑杏仁核
bamboopiggy
你可以去视频网站找找看,我取的时候,是从大脑底部,先取丘脑,然后海马和杏仁核
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