RAW264.7细胞的M2极化方案

求助，我用20ng/ml的IL-4和IL-13对RAW264.7细胞进行刺激48h，然后WB测定ARG-1的表达量，但是一直做不出来，反而老是跑出M1的极化标志物：NOS2。想请问各位有用这株细胞进行M2极化成功的方案吗？

然后据说RAW264.7 本身易于M1极化，传代超过15代后无法进行M2极化，且M2极化峰值时间为8～12h（20 ng/ml IL-4），此后会变回阴性，除非添加新鲜IL-4。不知道这是否有依据呢？