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        酵母双杂不长点

        相关实验:质粒的酵母直接转化

        user-title

        专心打工

        想请教一下大家,我做的酵母双杂,在二缺涂板之后不长点,可能是什么原因导致的呢?谢谢大家!

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        4 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        原因是:可能转化过程有问题。质粒质量不好。培养基有问题,酵母感受态不好。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑以下几点原因:酵母双杂交效率低、筛选条件太严格或与目的蛋白相互作用的蛋白太少。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能是酵母失活了,建议确认一下你用的酵母是否还有其活性

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        酵母双杂交实验不长点可能有以下几种原因:

        1. 转化效率问题:可能是转化效率不高,也可能是转化步骤中的某个步骤有问题,这可能需要你检查并优化你的转化协议。

        2. 质粒问题:你的质粒可能存在问题,可能是质粒的制备不纯或者质粒的浓度不足。你可以通过测序或电泳来检查你的质粒。

        3. 选择性培养基:你可能需要检查你的选择性培养基是否正确配制,以及是否加入了正确的抗性筛选剂。

        4. 突变或抑制性:如果你的酵母株存在某些突变,或者你的两个蛋白之间存在强烈的抑制作用,这可能阻止了他们的生长。

        5. 温度和时间问题:你可能需要检查你的孵育温度和时间,确保他们适合你的酵母株的生长。

        6. 交叉反应或自激活:有时,蛋白质间的交叉反应或者蛋白质的自激活也会影响结果。


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