实验问答21,857,286 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问大家EPS的提取方法及操作？

sswei

目前常见的物理提取方法有高速离心、超声波和热提取等,化学方法有NaOH提取、乙二胺四乙酸（EDTA）提取、阳离子交换树脂提取（ＣＥＲ）、甲醛提取、戊二醛提取以及一些不同化学试剂的组合提取甲醛－氢氧化钠法、甲醛－超声等方法。

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问杆状病毒表达

sswei

PCR 的成功与否与模板、引物、DNA 聚合酶及其他反应组分、反应条件这四大要素紧密相关。任一个出问题，就不会出现条带。

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问Hela细胞这样？算正常吗？求问大佬

loveliufudan

形态正常，但是细胞密度偏大，建议控制一下细胞密度，控制细胞密度不仅仅是为了维持细胞生长状态，还可以影响细胞的代谢、细胞功能以及相关实验结果的准确性。因此，选择适当的措施来调节细胞密度非常重要。

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问有人养过KMB-17细胞吗

z流沙z

不一定需要gibco，收到细胞的时候一定要多扩一点，冻存起来备用

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问请问EDTA高压修复是，选器具灭菌，和液体灭菌有区别吗？？

z流沙z

液体灭菌在121°保持的时间比较久

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问抑制菌丝生长速率法，抑菌实验

loveliufudan

假设最终需要得到的测试样品体积为V mL，需要向培养基中加入的化合物质量为m mg。根据题目中给出的信息，化合物的初始质量为5mg，因此有：5mg / V mL = 50ug / 1 mL化简得到：V = 5 / 50 = 0.1 mL即最终测试样品的体积为0.1 mL。又因为需要制成每个测试样品浓度为50ug/mL，因此所需的化合物质量为：m = 0.1 mL × 50ug/mL = 5ug因此

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问有做生物被膜的UU吗为啥结晶紫染色结果和肉眼看的相反

Topmicro

生物被膜是细胞内外界面的分界线，由脂质双分子层和相关的蛋白质和糖类组成。在生物被膜研究中，常用结晶紫等染料对被膜进行染色。然而，经过染色后观察到的结果与肉眼看到的是相反的。这是因为在染色过程中，染料会与被膜中的负电性磷脂头基发生作用，进而产生电荷屏蔽作用，这导致了磷脂双层的排列方式发生了改变。因此，结晶紫染色后的被膜呈现出的是一个不均匀、斑驳的外观，与真实的被膜结构是不同的。而肉眼观察到的被膜外观

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问酵母菌GS115感受态制备

loveliufudan

划线可以避免菌落过多过密，对于大规模制备酵母感受态的情况下，可以更方便地定量接种适量的菌落。但是如果您使用保种的方法接种，也是可以的，只需要注意接种时需要保证接种量一致即可。感受态酵母菌的电转过程中，吹打菌液可能会对电转效果产生一定影响，因为吹打过程中可能会使得酵母菌的细胞壁受到损伤。为了最大限度地保证电转成功，建议在吹打之前将菌落以PBS等缓冲液洗涤干净，然后用吸头将菌落捡起来放入电转管中，避免

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问Beas-2b细胞求助

Topmicro

总是染菌的话建议更换培养基和血清，注意所有耗材都要彻底灭菌后再使用

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问0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算，1OD600不是约3×106细胞/ml吗？

loveliufudan

首先，不同类型和不同生长阶段的细胞对应的OD600值可能不同。其次，OD600值受到许多因素的影响，如培养基组成、细胞大小、细胞形态等，因此需要对特定细胞类型和特定实验条件下的OD600值进行标定和校准。针对你提供的情况，如果说在相同的实验条件下，一个OD600值为0.10的样品相对应的细胞密度是约3x10^5细胞/mL，那么10个OD600为1的样品的细胞密度约为3x10^6细胞/mL，因为OD

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问为什么同时铺的六孔板和t25一段时间之后培养液颜色差很多啊？

z流沙z

铺板的细胞量不一样吧，6孔板中的细胞多所以消耗培养基比较多，代谢物比较多，培养基黄了

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问求助！普通离心方式分离酵母细胞壁和细胞内容物

loveliufudan

酵母细胞壁和细胞内容物的分离可以通过差速离心实现。以下是一种可能的实验流程，供参考：将破碎后的酵母细胞悬液转移到离心管中。对悬液进行低速离心（例如1000g，5分钟）去除酵母细胞碎片和细胞壁残留物，得到上清液。取出上清液，进行高速离心（例如12,000g，15分钟）以沉淀酵母细胞壁。将酵母细胞壁沉淀洗涤并重悬于缓冲液中，用于后续的实验。将上清液转移至新的离心管中，进行更高速的离心（例如30,000

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问用TSA培养基和MH培养基做药敏实验得到的结果不同该用哪个培养基的结果呢

loveliufudan

TSA培养基和MH培养基都是常用的通用培养基，但它们的配方和性质略有不同。TSA培养基主要是以肉汤和胰蛋白胨为基础，适合于多种细菌的培养，而MH培养基则是以马铃薯提取物、蛋白胨和酵母提取物为基础，更适合于培养革兰氏阳性菌和厌氧菌。因此，在进行药敏实验时，如果样品中包含革兰氏阳性菌或厌氧菌，则可以优先选择使用MH培养基进行实验。如果样品中只包含革兰氏阴性菌或其他常见菌种，则可以使用TSA培养基进行实

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问大肠杆菌分光过度用多少nm

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大肠杆菌分光光度检测常用的波长是600nm。在分光光度计上设置波长为600nm时，可以测量到大肠杆菌悬浮液的吸光度。分光光度检测大肠杆菌的吸光度可以用于判断其细胞浓度。一般来说，大肠杆菌的吸光度和细胞数呈线性关系，但是需要注意到，当吸光度达到较高值时，可能会出现分光光度计的分光过度现象，此时需要选择合适的稀释倍数以避免分光过度对测量结果的影响。

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问如何进行厌氧菌的平板计数?

z流沙z

主要是要注意保证提供一个无氧环境

3 回答1448 围观

问求助|植物脱毒苗扩繁，这样子算外部染菌还是内部内生菌没有清除干净😭

土井挞克树

考虑是内生菌侵染所导致的，建议扩繁前杀菌

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问求助96孔板最少加多少微升的液体可以覆盖底面

sswei

96孔板通常每一孔不少于100μl，每毫升不少于104个细胞！

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问细菌对细胞攻毒中细胞的选择

土井挞克树

可以用比如血管内皮细胞做，这个可选细胞很多

2 回答453 围观

问诊断性meta

土井挞克树

打开stata1.依次选择 User-- Meta-Analysis --Influence Analysis, metan-based (metaninf)2.分别设置主菜单“Main”和二级菜单“Effect Opts”，其中模型的选择与该数据做森林图合并的模型一致3.通过Stata的命令回顾窗口“Review-Command”，我们可以调用菜单操作对应的命令：metaninf lnOR se

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问96孔板的抑菌实验怎么计算细菌含量呢

晴空a

可以利用结晶紫染色法测定细胞数量。

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