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        杆状病毒表达

        相关实验:重组杆状病毒的纯化实验

        user-title

        小鸭小二郎儿

        构建的重组质粒,二次画线后挑取白斑进行菌液PCR ,为啥没有条带啊各位大佬,按理来说不会没有成功的

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        PCR 的成功与否与模板、引物、DNA 聚合酶及其他反应组分、反应条件这四大要素紧密相关。任一个出问题,就不会出现条带。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        增加样本量,可能是含量太低了,达不到检测的最低值

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些可能的原因:

        模板质量:如果从白斑中提取的质粒DNA质量较低,可能会导致PCR反应失败。建议检查DNA的纯度和浓度,并重新提取质粒DNA。

        PCR反应条件:反应条件可能需要进一步优化,例如引物浓度、PCR反应体系和温度循环程序等。建议优化PCR反应条件,并使用正常的质粒DNA作为对照进行比较。

        引物设计:引物的特异性可能需要进一步检查,确保引物与目标序列匹配。建议使用已验证的引物或尝试设计新的引物。

        细菌转化效率:转化效率可能低于预期,导致白斑中没有重组质粒。建议检查细菌转化条件,并优化转化实验。

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