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        酵母菌GS115感受态制备

        相关实验:酵母菌基因克隆实验

        user-title

        idiotOC0P

        酵母菌感受态制备一定要每次都去划线吗,酵母菌长得太久了吧,可以不可以挑菌之后保种然后用菌种去接种呢,反正长到OD1.3~1.5就行了吧?还有就是感受态酵母菌在使用电转的时候,吹打菌液会有影响吗,具体应该怎么操作才能最大限度保证电转成功呢。

        拜谢各位!

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        3 个回答

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        酵母挑菌冻存保种后可以用来接种

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以挑菌之后保种然后用菌种去接种

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        划线可以避免菌落过多过密,对于大规模制备酵母感受态的情况下,可以更方便地定量接种适量的菌落。但是如果您使用保种的方法接种,也是可以的,只需要注意接种时需要保证接种量一致即可。

        感受态酵母菌的电转过程中,吹打菌液可能会对电转效果产生一定影响,因为吹打过程中可能会使得酵母菌的细胞壁受到损伤。为了最大限度地保证电转成功,建议在吹打之前将菌落以PBS等缓冲液洗涤干净,然后用吸头将菌落捡起来放入电转管中,避免吹打过程中对菌落造成损伤。

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