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        cck8实验,药物浓度越高 OD吸收越高

        相关实验:药物致心肌坏死模型

        user-title

        dxy_cry1gpd3

        想问一下大家,做CCK8实验,每孔3000个细胞,贴壁12小时给药,给药后吸走培养基,每孔加入200ul不同浓度药物,孵育24小时,加CCK8测吸光度。由于药物高浓度在37°培养箱会发生相变沉淀在孔里,我也做了单独药物+cck8的孔,高浓度情况下测出来的OD偏大,但是镜下观察细胞明显变圆。

        我也尝试了把药物吸走 然后加入cck8和培养基 但是孔里仍有部分药物沉淀,细胞也会吸走很多 ,导致组内组间差异大,求问大家怎么解决啊,谢谢大家了。

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        3 个回答

        user-title

        麻黄连翘赤小豆

        有帮助

        药物沉淀对吸光度影响较大,最好能溶解药物

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        可能是细胞浓度过高导致,建议每孔2000细胞试试看。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        有几个建议可以尝试解决:

        1. 改变药物给药方式:考虑使用更短的给药时间,或者减少给药浓度,以降低药物相变沉淀的风险。

        2. 增加培养基洗涤步骤:在给药后,可以进行多次洗涤来尽量去除残留的药物。这可以减少药物对细胞生长和CCK8测定的干扰。

        3. 使用更敏感的测定方法:考虑尝试其他细胞生存和增殖的测定方法,以降低药物残留对结果的影响。例如,使用细胞活力染料或其他荧光探针来评估细胞状态。

        4. 考虑对实验进行优化:如果可能,尝试优化实验步骤,如调整细胞密度、培养条件、给药时间和浓度,以获得更准确和可重复的结果。


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